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染色质免疫沉淀(ChIP)实验(附视频)
染色质免疫沉淀技术是目前唯一研究体内 DNA与蛋白质相互作用的方法。 实验前准备 在实验开始前，先准备好本次实验所需的各种试剂盒和相关常规试剂，如本次实验分装 Pierce Agarose ChIP Kit， 此试剂盒， 提供了简化的方法来实现交联反交联、 蛋白消化、 免疫沉淀和 这时可继续进行接下来的免疫沉淀反应实验，也可以将样品冻存于-80℃中备用。 染色质免疫沉淀反应将上一步骤得到的上清，约 50μl，转移 5μl 至另一新的离心管中作为 Input对照。 DoctorA，您在实验中，以及上个问题中提到的 Input 对照，它是怎么来的，重要性体现在哪里呢？ 在进行免疫沉淀前，取一部分断裂后的染色质做 Input 对照。 若想得到一个好的实验结果， 抗体的选择需要注意什么呢？ 染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是 ChIP 实验成功的关键。
2.7K22发布于 2019-09-17 - 来自专栏生命科学
蛋白 AG 磁珠免疫沉淀（IP）实验 精选参考文献｜MCE
蛋白 A/G 磁珠为 IP、Co-IP 和 ChIP 实验提供了一种快速便捷的方法。 MCE 蛋白质 A/G 磁珠通常用于从血清、细胞培养上清或腹水中分离抗体，以及从细胞或组织提取物中免疫沉淀和共免疫沉淀抗原。Free Sample (200 μL）限时可申请试用。 功能实验表明，MAGE-C3通过激活上皮间质转化（EMT）促进肿瘤转移。MAGE-C3抑制抗肿瘤免疫并调节T细胞的细胞因子分泌，这意味着免疫抑制功能。 用来自小鼠肝全细胞裂解物的泛Kbhb或泛Kac抗体进行免疫沉淀。赖氨酸β-羟基丁酰化（Kbhb）是由生酮饮食（KD）诱导的翻译后修饰，KD是一种对多种人类疾病具有治疗作用的饮食。 用针对Myc-标签或Flag-标签的抗体免疫沉淀蛋白质提取物，然后用指定的抗体进行免疫印迹。
33710编辑于 2025-09-10 【免疫学实验】揭秘蛋白互作：免疫沉淀与免疫共沉淀
一、 免疫沉淀（IP）：精准捕获目标蛋白 免疫沉淀是利用抗体从复杂的混合物中分离特定蛋白质的技术。 1. 免疫沉淀与 SDS-PAGE 分析 免疫沉淀法用于从细胞裂解液中富集特定抗原。细胞可通过 ³⁵S-蛋氨酸代谢标记（标记所有新合成蛋白）或 表面碘化/生物素化（仅标记膜蛋白）进行示踪。 最后通过放射自显影（或显色）确定蛋白位置 三、 免疫共沉淀（Co-IP）：验证蛋白互作 如果说免疫沉淀是“抓单个”，那么免疫共沉淀就是“抓团伙”。 实验逻辑： 捕获： 在含有潜在复合物的细胞提取物中，使用蛋白A的抗体进行免疫沉淀。 验证： 将沉淀下来的复合物进行电泳和免疫印迹（Western Blot），使用蛋白B的抗体进行检测。 总结 免疫沉淀技术不仅帮助我们纯化和鉴定蛋白质（分子量、等电点），更是通过免疫共沉淀技术，成为了揭示蛋白质之间物理相互作用的金标准实验方法。
29910编辑于 2025-12-29- 来自专栏生命科学
MCE | 磁珠 VS 琼脂糖珠
琼脂糖珠长久以来，多孔的琼脂糖珠(也称琼脂糖树脂)作为免疫沉淀实验中的固相支持物常用的材料 但值得注意的是，在免疫沉淀实验中，抗体的量常常不足以满足琼脂糖珠的饱和荷载量，没有被抗体覆盖的琼脂糖珠的部分则可以自由地结合任何可粘附的物质，这种非特异性结合升高引起背景信号升高，这时，“高荷载量优势” 排除由于微珠本身材质引起的非特异性结合：将裂解样本与微珠单独混合孵育，随后去除微珠并收集上清液，再进行免疫沉淀实验。b. 琼脂糖珠：琼脂糖珠必须通过离心浓缩在管底部，并在每次孵育和洗涤除去上清液，通常需要肉眼识别管底部的琼脂糖珠，因此，每个免疫沉淀实验至少需要使用25-50 μL 的琼脂糖珠。 相反，磁珠免疫沉淀反应不需要离心，配合使用磁性分离架磁性分离，在 30 分钟内即可完成实验，因此可以在较短时间内轻松处理并获得较多样本的分析数据。
55020编辑于 2023-03-15 - 来自专栏生命科学
免疫沉淀常见问题解答 | MedChemExpress
其次根据实验目的，选择合适的表面活性基团以及由此衍生的偶联方式、蛋白结合量等。 注 1：Co-IP 实验时，常用 NP-40 等非离子型裂解液，以免破坏蛋白-蛋白相互作用。注 2：确保目的蛋白在抗原样品中有较高水平表达。 例如，同型对照抗体 (没有特异靶标的一抗，但在类别和亚型上，其跟实验应用中的靶标一抗一致) 等。 Output：在某些 Co-IP 实验中，实验人员会把 IP 后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测，该对照组称为 output 组。...... 好了，说了这么多，希望本篇对大家有所帮助，祝伙伴们拿到心仪的实验结果。
67720编辑于 2023-02-03 - 来自专栏生命科学
MCE丨重组蛋白常见的融合标签
相关产品Tag Peptides标签多肽，可用于标签蛋白的竞争性洗脱，可作为相关检测的阳性对照Anti-HA Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 HA 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-c-Myc Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 c-Myc 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-Flag Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 Flag 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-GST Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 GST 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。
49310编辑于 2023-03-22 链霉亲和素-生物素系统在免疫沉淀中的应用 - MedChemExpress
因此 SABS 广泛应用于免疫沉淀 (IP)、蛋白纯化以及成像实验的信号放大，如免疫荧光 (IF)、酶联免疫吸附实验 (ELISA)、原位杂交等实验。 MCE链霉亲和素磁珠在涉及多种应用的 64 篇文献中被引用 (累计影响因子 360+)，如免疫沉淀 (IP)、染色质免疫共沉淀 (CHIP)、RNA pull down、蛋白纯化等。 为了验证这一假设，作者使用三种生物素标记的 CnHsf3-线粒体靶向寡核苷酸进行 CHIP 实验。 ▐ 案例 3：RNA 免疫沉淀 (RIP)作者假设 YTHDC1 参与 HaCaT 细胞中 SQSTM1 表达的调节。 RNA 免疫沉淀(RIP)-qPCR 实验表明，YTHDC1 蛋白可以与 SQSTM1 mRNA 相互作用。
1.8K00编辑于 2024-01-18【辰辉创聚生物】重组蛋白表达与纯化|蛋白表达不同标签的优势及用途
本文将系统总结我们在不同的重组蛋白表达系统中积累的经验与实践，提供一些实用的标签搭配建议，为您的实验设计提供有价值的参考。 尽管标签较大，可能对目标蛋白的结构和功能产生一定影响，但它在蛋白纯化、免疫沉淀及功能分析等方面具有广泛的应用。去除GST标签时，通常需要使用酶切或亲和素洗脱方法，以恢复目标蛋白的天然功能。 Flag标签FLAG标签是一个小型的八肽序列（DYKDDDDK），常用于免疫沉淀和Western Blot等检测方法。它与抗FLAG抗体具有高特异性，广泛用于蛋白检测和分析。 Strep-tag II标签小巧且具有高特异性，能够与链霉亲和素高效结合，适用于蛋白纯化和免疫沉淀。它对蛋白结构影响较小，去标签过程简便。 选择合适的蛋白标签需要根据实验需求来决定。以下是常见标签的特点，帮你一眼看清：His-tag：小巧、便宜，适合常规使用。GST-tag：提高蛋白溶解性，适用于Pull-down实验。
47300编辑于 2025-08-13- 来自专栏生信菜鸟团
Cell：对亚细胞蛋白质组进行全局表征，发现许多蛋白质是通过其空间分布的变化而非丰度变化来调节的
所有免疫沉淀和N/O/C分离均使用每个重复107个细胞进行了三次实验。 Para_02 定量分析揭示了每种细胞器免疫沉淀的丰富的蛋白质富集谱（图1F–1L；图S1D；STAR方法）。 线粒体外膜蛋白TOMM20的天然免疫沉淀显示982种蛋白质的富集（富集≥2倍，p值≤0.01，在三次实验中；图1F和1G），其中线粒体蛋白质的富集最大（图1H）。 我们的数据集总共包括8,192个独特的表达基因（"猎物"，在至少一次免疫沉淀的所有重复实验中被检测到；STAR方法）和8,538个总蛋白质，包括相同基因产物的异构体。 可以在天然免疫沉淀下游进行PTM富集，以提供更多见解。 最后，我们的质谱实验是在大量细胞群体中进行的，无法解析单细胞水平上的蛋白质定位变化。 所有实验均在二级生物安全实验室中进行。
64110编辑于 2025-02-27 - 来自专栏数据科学（冷冻工厂）
HiChIP 数据分析: 分析简介
摘要 HiChIP 是一种基于原位 Hi-C 的新型方法，用于分析染色质相互作用，它在流程中加入了一个免疫沉淀 (ChIP) 步骤，以研究由特定蛋白质驱动的染色质结构。 在本文中，我们描述了一种计算流程，用于分析在人类胚胎干细胞中，在热休克处理前后，通过 Rad21（黏连蛋白复合体的一部分）免疫沉淀获得的 HiChIP 数据。 它属于 3C 技术 的一种，并复现了经典的原位 Hi-C 流程，只是在 DNA 消化和连接之后额外增加了一个染色质免疫沉淀 (ChIP) 步骤，从而仅分离并测序与特定蛋白质交联的片段。 尽管具备方法学优势，免疫沉淀步骤的加入会导致测序读取在分布上不均匀，并偏向特定限制性片段，这一点必须在识别局部富集的相互作用（loops）时予以特别考虑。 来自公共 HiChIP 数据集（包含不同实验条件）的原始测序数据，首先使用 HiC-Pro进行处理，该流程对读段对进行比对和过滤。
26510编辑于 2025-09-17 - 来自专栏生信技能树
m6A-Seq数据质量评估：trumpet包
文献摘要 RNA甲基化免疫沉淀测序(MeRIP-seq或m6A-seq)已被广泛用于分析RNA N6-腺苷甲基化在转录组中的分布。 除此之外，还可以用于其他RNA免疫沉淀测序技术数据评估如m1A-seq, CeU-Seq, Ψ-seq等。 低reads count或比对到特定基因组区域的reads比例差异过大可能与低数据质量有关，这是由于多样本混库测序不平衡、DNA污染或实验过程中的其他偏差造成的。 PCR artifacts 可能进一步加剧了m6 A-seq实验reads覆盖的异质性。 ? 3.reads分布可视化 RNA m6A一般分布在起始密码子和终止密码子附近。 4.使用ESES评估免疫沉淀反应效率 m6A-Seq数据的一个主要评价指标就是免疫沉淀反应效率，只要体现在免疫沉淀信号的富集程度。
1.8K20发布于 2021-02-03 - 来自专栏技术开发——你我他
实验六 异常处理实验
实验六 异常处理实验 一、实验目的与要求 1、理解异常的概念，掌握Python中重要的内建异常类以及处理异常的几种方式。 二、实验原理 在Python中，程序在执行的过程中产生的错误称为异常，比如列表索引越界、打开不存在的文件等。所有异常都是基类Exception的成员，它们都定义在exceptions模块中。 三、预习与准备 1、提前预习Python异常以及模块的语法知识，实验之前编写好程序代码。 2、练习关于Python异常处理以及模块使用的常见操作。 四、实验过程记载 （对实验的主要过程与步骤进行记载；若有较多的截图或代码，可以单独用附件的形式列出） 实验题1 假设成年人的体重和身高存在此种关系：身高（厘米）-100=标准体重（千克）。 except AssertionError as reason: print(reason) 实验题3 创建一个模块文件，它用于互换两个数的值。
2.5K30发布于 2020-06-08 - 来自专栏文武兼修ing——机器学习与IC设计
神经网络压缩实验-Deep-compression实验准备剪枝实验量化实验
首发于个人博客，结合论文阅读笔记更佳 实验准备 基础网络搭建 为了实现神经网络的deep compression，首先要训练一个深度神经网络，为了方便实现，这里实现一个两层卷积+两层MLP的神经网络 /base.ptb") 剪枝实验 剪枝是deep compression的第一步，含义是将部分较小（小于某个阈值)的权值置位为0，表示这个连接被剪掉，且在之后的微调过程中，这个连接的梯度也将被置位为0， 即不参加训练 准备相关工具 剪枝实验需要准备一些函数：剪枝函数，梯度剪枝函数和稀疏度评估函数 剪枝函数 剪枝函数输入模型和阈值，将所有绝对值小于阈值的权值置位为0 def puring(model,threshold weight 0.5765625 fc2.bias 0.7 Total: 0.01398429139292775 由上发现，经过权值微调后，在保持原有的稀疏度的情况下将准确率提高到了90%以上 量化实验
2.8K20发布于 2018-10-09 - 来自专栏往期博文
【FPGA实验】流水灯实验
管脚绑定 管脚绑定参照正点原子给的管脚图： 实验效果
77720编辑于 2022-06-14 - 来自专栏生命科学
细胞转染、重组蛋白、荧光素酶检测试剂盒实验 | MedChemExpress
但是没有一种方法是可以通用的，所以不少研究者在实际实验过程中难免踩雷.... 来！先了解一下常见的几项转染技术 不同转染技术都有各自明显的优缺点，是不是不知道该怎么选择啦？告诉你一个绝招吧！ 操作简单，适用性广，在体内和体外都有很高的转染效率，且对细胞几乎没有毒性，这可是转染实验中的一大法宝。 是由高质量的鼠源 lgG2b 单克隆抗体与琼脂糖 Sepharose 4B 共价偶联而得，具有较高的 Flag 标签蛋白结合容量，可用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 Flag 标签蛋白的免疫沉淀 、蛋白纯化实验。 可用于大肠杆菌、酵母、昆虫和哺乳动物表达系统中表达的Flag标记蛋白的高效纯化或免疫沉淀 (IP)。
47310编辑于 2023-03-03 - 来自专栏生物信息云
NCB | CRAD控制的细胞骨架失调通过β-catenin引发粘液性结直肠癌
---- 1.CRAD inactivation in CRC ---- 生信+实验确定CRAD在癌症中的表达，生信分析CRAD在癌症中的突变。 ---- 2. 来自细胞裂解物的共免疫沉淀（Co-IP）和纯化蛋白质的下拉测定验证了CRAD和CP之间的内源性和直接相互作用（图2b）。因此，作者假设CRAD通过抑制CP来增强F-actin聚合（图2c）。 共免疫沉淀试验表明，过表达CRAD减少了CP和肌动蛋白之间的相互作用（图2d，e）。 5.Inhibition of CRC cell proliferation by CRAD ---- 细胞+动物实验 6.Intestinal adenoma development induced Accelerated intestinal tumorigenesis by CRAD KO 9.Mucinous intestinal tumorigenesis by CRAD KO ---- 后面的实验都是动物水平上的验证
64710编辑于 2022-12-16 【免疫学实验】“Western Blot”的前世今生:免疫印迹技术简述
在生物医学实验室中，免疫印迹（Immunoblotting），也就是大家耳熟能详的 Western Blot（WB），是一项不可或缺的“明星技术”。 它与我们之前介绍的免疫沉淀（IP）技术一样，都是为了鉴定细胞裂解液中的特定蛋白质。但相比于IP，WB有着独特的优势。 ⚖️ 一、 为什么选择免疫印迹？ 免疫沉淀通常需要利用放射性同位素标记细胞，这对于实验条件和安全性都有较高要求。 而免疫印迹技术巧妙地避开了这一难题。它不需要对细胞进行放射性标记，而是通过“分离-转移-检测”三部曲来锁定目标蛋白。
37510编辑于 2025-12-29- 来自专栏技术开发——你我他
实验五 Python文件操作实验
实验五 Python文件操作实验 一、实验目的与要求 1、掌握文件的打开和关闭。 2、掌握文件的不同操作，如读写、重命名、删除。 3、熟悉闭包、装饰器以及常见内置函数的使用。 二、实验原理 在python中，使用open方法打开文件，凡是打开的文件，切记要使用close方法关闭文件。 三、预习与准备 1、提前预习Python文件操作以及高级函数的语法知识，实验之前编写好程序代码。 2、练习关于Python文件及文件夹的常见操作。 四、实验过程记载 实验题1分析程序运行结果：阅读下面的程序，分析代码是否能够编译通过。如果能编译通过，请列出运行的结果，否则请说明编译失败的原因。 源码: sum=map(lambda x:x+1,[1,2,3,4,5]) result=filter(lambda x:x%2,list(sum)) print(list(result)) 实验题3
4.1K40发布于 2020-06-08 - 来自专栏技术开发——你我他
实验四 Python函数编程实验
实验四 Python函数编程实验 一、实验目的与要求 1、理解函数的概念，掌握Python语言中声明和调用函数的方法。 2、理解局部变量和全局变量的作用域，学习在调试窗口查看变量的值。 二、实验原理 函数是组织好的，可重复使用的，用来实现单一或相关联功能的代码段，它能够提高应用的模块性和代码的重复利用率。 三、预习与准备 1、提前预习Python函数的语法知识，实验之前编写好程序代码。 2、练习使用Python函数的常见操作。 四、实验过程记载 （对实验的主要过程与步骤进行记载；若有较多的截图或代码，可以单独用附件的形式列出） 实验题1分析程序运行结果：阅读下面的程序，分析代码是否能够编译通过。 实验题4使用Python语言开发一个简单的学生管理系统。运用该学生管理系统编辑学生的信息，适时更新学生的资料。例如，新生入校，要在学生管理系统中录入刚入校的学生信息。
3.5K21发布于 2020-06-07 - 来自专栏技术开发——你我他
实验二 Python语言基础实验
实验二 Python语言基础实验 一、实验目的与要求 1、了解Python语言的基本语法和编码规范。 2、掌握Python语言的数据类型、运算符、常量、变量、表达式和常用语句等基础知识。 二、实验原理 Python的编码风格具有独特的规范。Python中的单行注释以#开头，多行注释可以使用三引号作为开头和结束符号。 三、预习与准备 1、提前预习Python语言的基础语法知识，实验之前编写好程序代码。 2、练习使用常量和变量、运算符和表达式、常用语句以及序列数据结构。 四、实验过程记载 （对实验的主要过程与步骤进行记载；若有较多的截图或代码，可以单独用附件的形式列出） 1、参照下面的步骤练习使用变量：用id()函数输出变量地址的示例程序如下，请分析运行该程序。
4.5K31发布于 2020-06-07
腾讯云开发者
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