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  • 来自专栏生物信息云

    染色质免疫沉淀(ChIP)实验(附视频)

    染色质免疫沉淀技术是目前唯一研究体内 DNA与蛋白质相互作用的方法。 实验前准备 在实验开始前,先准备好本次实验所需的各种试剂盒和相关常规试剂,如本次实验分装 Pierce Agarose ChIP Kit, 此试剂盒, 提供了简化的方法来实现交联反交联、 蛋白消化、 免疫沉淀和 这时可继续进行接下来的免疫沉淀反应实验,也可以将样品冻存于-80℃中备用。 染色质免疫沉淀反应将上一步骤得到的上清,约 50μl,转移 5μl 至另一新的离心管中作为 Input对照。 DoctorA,您在实验中,以及上个问题中提到的 Input 对照,它是怎么来的,重要性体现在哪里呢? 在进行免疫沉淀前,取一部分断裂后的染色质做 Input 对照。 若想得到一个好的实验结果, 抗体的选择需要注意什么呢? 染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是 ChIP 实验成功的关键。

    2.7K22发布于 2019-09-17
  • 来自专栏生命科学

    蛋白 AG 磁珠免疫沉淀(IP)实验 精选参考文献|MCE

    蛋白 A/G 磁珠为 IP、Co-IP 和 ChIP 实验提供了一种快速便捷的方法。 MCE 蛋白质 A/G 磁珠通常用于从血清、细胞培养上清或腹水中分离抗体,以及从细胞或组织提取物中免疫沉淀和共免疫沉淀抗原。Free Sample (200 μL)限时可申请试用。 功能实验表明,MAGE-C3通过激活上皮间质转化(EMT)促进肿瘤转移。MAGE-C3抑制抗肿瘤免疫并调节T细胞的细胞因子分泌,这意味着免疫抑制功能。 7、Cell Res. 2025 Mar;35(3):165-185.Raptin与下丘脑GT 1 -7神经元中GRM 3 VFT或GRM 3跨膜结构域(TMD)之间结合的免疫沉淀(IP)分析。 将具有人GRM 3-VFT或人GRM 3-TMD过表达的下丘脑GT 1 -7神经元的细胞裂解物与PBS或His-Raptin孵育。

    34110编辑于 2025-09-10
  • 【免疫学实验】揭秘蛋白互作:免疫沉淀与免疫共沉淀

    一、 免疫沉淀(IP):精准捕获目标蛋白 免疫沉淀是利用抗体从复杂的混合物中分离特定蛋白质的技术。 1. 免疫沉淀与 SDS-PAGE 分析 免疫沉淀法用于从细胞裂解液中富集特定抗原。细胞可通过 ³⁵S-蛋氨酸代谢标记(标记所有新合成蛋白)或 表面碘化/生物素化(仅标记膜蛋白)进行示踪。 最后通过放射自显影(或显色)确定蛋白位置 三、 免疫共沉淀(Co-IP):验证蛋白互作 如果说免疫沉淀是“抓单个”,那么免疫共沉淀就是“抓团伙”。 实验逻辑: 捕获: 在含有潜在复合物的细胞提取物中,使用蛋白A的抗体进行免疫沉淀。 验证: 将沉淀下来的复合物进行电泳和免疫印迹(Western Blot),使用蛋白B的抗体进行检测。 总结 免疫沉淀技术不仅帮助我们纯化和鉴定蛋白质(分子量、等电点),更是通过免疫共沉淀技术,成为了揭示蛋白质之间物理相互作用的金标准实验方法。

    31010编辑于 2025-12-29
  • 来自专栏图形学与OpenGL

    实验7 OpenGL光照

    一.实验目的: 了解掌握OpenGL程序的光照与材质,能正确使用光源与材质函数设置所需的绘制效果。 二.实验内容: (1)下载并运行Nate Robin教学程序包中的lightmaterial程序,试验不同的光照与材质系数; (2)运行示范代码1,了解光照与材质函数使用。 三.实验原理: 为在场景中增加光照,需要执行以下步骤: (1) 设置一个或多个光源,设定它的有关属性; (2) 选择一种光照模型; (3) 设置物体的材料属性。 实验提高 在实验5太阳系模型的基础上,尝试为其增加光照与材质效果,如图A.5(b)所示。 ? ? (a)太阳系模型     (b)增加光照后的效果

    90710发布于 2018-10-09
  • 来自专栏张国平_玩转树莓派

    树莓派基础实验7:倾斜开关实验

    ---- 二、组件 ★Raspberry Pi 3主板*1 ★树莓派电源*1 ★40P软排线*1 ★倾斜传感器模块*1 ★双色LED模块*1 ★面包板*1 ★跳线若干 三、实验原理 ? 倾斜传感器实验原理图   在倾斜开关中球以不同的倾斜角度移动,以制造触发电路。倾斜开关模块使用双向传导的球形倾斜开关。当它向一侧倾斜时,只要倾斜度和力满足条件开关就会通电,从而输出低电平信号。 四、实验步骤 第1步:连接电路,该实验实验6(轻触开关按键实验)相同。这里激光模块的实物与模块原理图的端口名称不一致,我们按照实物的端口名称来连接。 倾斜开关实验 ? 倾斜开关实验实物连接图 第2步:这次编程有两个函数要注意,是关于输入的高级应用。   

    1.6K30发布于 2020-09-27
  • 来自专栏CreateAMind

    Google Research Football (scenario 7) 实验

    在之前的公众号我们介绍了谷歌足球环境(Google Research Football ) 谷歌足球游戏环境使用介绍 和其中 scenario 2 的 实验 Google Research Football (scenario 2) 实验 这里分享的是 scenario 7 的一些实验结果。 对于scenario 7,可以比较快地找到的策略有两个:一个是直接带球突破后卫射门,另一个是传球给队友(左右两个队友中任意一个),然后队友射门。

    1.1K10发布于 2019-09-09
  • 来自专栏小樱的经验随笔

    ucoreOS_lab7 实验报告

    lab7 会依赖 lab1~lab6 ,我们需要把做的 lab1~lab6 的代码填到 lab7 中缺失的位置上面。 和 lab6 操作流程一样,我们只需要将已经完成的 lab1~lab6 与待完成的 lab7 (由于 lab7 是基于 lab1~lab6 基础上完成的,所以这里只需要导入 lab6 )分别导入进来,然后点击 count > 0,表示共享资源的空闲数 count < 0,表示该信号量的等待队列里的进程数 count = 0,表示等待队列为空 实验 7 的主要任务是实现基于信号量和管程去解决哲学家就餐问题,我们知道 在实验 7 中,具体的信号量数据结构被定义在(kern/sync/sem.h)中: typedef struct { int value; wait_queue_t wait_queue 能够基于信号量来完成条件变量机制;事实上在本实验中就是这么完成的,只需要将使用信号量来实现条件变量和管程中使用的锁和等待队列即可。 最终的实验结果如下图所示: ?

    1.7K20发布于 2019-08-05
  • 来自专栏图形学与OpenGL

    实验7 3D机器人

    1.实验目的: (1) 熟悉视点观察函数的设置和使用。 (2) 熟悉3D图形变换的设置和使用。 (3) 进一步熟悉基本3D图元的绘制。 (4) 体验透视投影和正交投影的不同效果。 2.实验内容: (1)简单机器人。设计如图A.7所示。机器人由四大部分组成,即头、身、双手、双腿,分别由立方体经过图形变换而成。 图A.7 简单机器人 3.实验原理: (1)视点设置函数 void gluLookAt(GLdouble eyex, GLdouble eyey, GLdouble eyez, GLdouble atx void gluWireTetrahedron(void) //线框模型 void gluSolidTetrahedron(void) //实体模型 4.实验代码: #include <glut.h> 写入代码; glutSolidCube(1); //绘制立方体腿 glPopMatrix(); glutSwapBuffers(); //双缓冲下的刷新方法 } 5.实验提高

    1.6K40发布于 2020-10-27
  • 来自专栏生命科学

    MCE | 磁珠 VS 琼脂糖珠

    琼脂糖珠长久以来,多孔的琼脂糖珠(也称琼脂糖树脂)作为免疫沉淀实验中的固相支持物常用的材料 但值得注意的是,在免疫沉淀实验中,抗体的量常常不足以满足琼脂糖珠的饱和荷载量,没有被抗体覆盖的琼脂糖珠的部分则可以自由地结合任何可粘附的物质,这种非特异性结合升高引起背景信号升高,这时,“高荷载量优势” 排除由于微珠本身材质引起的非特异性结合:将裂解样本与微珠单独混合孵育,随后去除微珠并收集上清液,再进行免疫沉淀实验。b. 琼脂糖珠:琼脂糖珠必须通过离心浓缩在管底部,并在每次孵育和洗涤除去上清液,通常需要肉眼识别管底部的琼脂糖珠,因此,每个免疫沉淀实验至少需要使用25-50 μL 的琼脂糖珠。 相反,磁珠免疫沉淀反应不需要离心,配合使用磁性分离架磁性分离,在 30 分钟内即可完成实验,因此可以在较短时间内轻松处理并获得较多样本的分析数据。

    55820编辑于 2023-03-15
  • 来自专栏生命科学

    免疫沉淀常见问题解答 | MedChemExpress

    其次根据实验目的,选择合适的表面活性基团以及由此衍生的偶联方式、蛋白结合量等。 注 1:Co-IP 实验时,常用 NP-40 等非离子型裂解液,以免破坏蛋白-蛋白相互作用。注 2:确保目的蛋白在抗原样品中有较高水平表达。 例如,同型对照抗体 (没有特异靶标的一抗,但在类别和亚型上,其跟实验应用中的靶标一抗一致) 等。 Output:在某些 Co-IP 实验中,实验人员会把 IP 后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测,该对照组称为 output 组。...... 好了,说了这么多,希望本篇对大家有所帮助,祝伙伴们拿到心仪的实验结果。

    68320编辑于 2023-02-03
  • 来自专栏数通

    实验篇| Nginx反向代理-7层代理

    反向代理是Nginx的核心功能之一,而‌7层代理(应用层代理)‌能基于HTTP协议精准控制请求,实现负载均衡、安全防护、SSL卸载等高级功能。 本文通过window操作系统实验,带你用Nginx简单的搭建7层代理。

    28910编辑于 2025-03-12
  • 来自专栏ffffffff0x

    工控安全:S7-300启停实验

    前言 西门子(SIEMENS)公司的 PLC 产品包括 LOGO、S7-200、S7-1200、S7-300、 S7-400、S7-1500 等。西门子 PLC 在我国的应用比其他系列多。 S7 系列 PLC 产品可分为微型 PLC(如 S7-200),小规模性能要求的 PLC(如 S7-300)和中、高性能要求的PLC(如S7-400)等。 S7-200、S7-300、S7-400 系列的 PLC 采用早期的西门子私有协议 S7Comm 进行通信。 --- 环境搭建 本次实验用模拟器代替现场设备,先访问软件官网 http://snap7.sourceforge.net/ ,点击 Download 会跳转到 https://sourceforge.net 300实验环境,复现S7-300的启停实验,西门子私有协议 S7Comm 不像 S7CommPlus 的加密协议(S7-1500 等),不涉及任何反重复攻击机制,可以被攻击者轻易利用。

    2.4K41发布于 2021-01-14
  • 来自专栏全栈程序员必看

    实验7 粒子群优化算法求解tsp问题

    实验1 BP神经网络实验 实验2 som网实验 实验3 hopfield实现八皇后问题 实验4 模糊搜索算法预测薄冰厚度 实验5 遗传算法求解tsp问题 实验6 蚁群算法求解tsp问题 实验7 粒子群优化算法求解 tsp问题 实验8 分布估计算法求解背包问题 实验9 模拟退火算法求解背包问题 实验10 禁忌搜索算法求解tsp问题 一、实验目的 理解并使用粒子群优化算法 二、实验内容 实现基于粒子群优化算法的旅行商路线寻找 三、实验环境 使用Python3.0 在 eclipse进行编辑 四、实验步骤 1、输入介绍: 城市总数目为14,采用以下城市坐标,坐标取整数。 运行截图: 路线随机选取 距离48.7 100个粒子迭代100次 距离 40.4 100个粒子迭代 600次 距离32.3 五、总结 多次实验之后发现测试组数据的14个城市,所能达到的最优解

    1.5K11编辑于 2022-11-10
  • 来自专栏生命科学

    MCE丨重组蛋白常见的融合标签

    相关产品Tag Peptides标签多肽,可用于标签蛋白的竞争性洗脱,可作为相关检测的阳性对照Anti-HA Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 HA 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-c-Myc Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 c-Myc 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-Flag Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 Flag 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-GST Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 GST 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验

    50510编辑于 2023-03-22
  • 链霉亲和素-生物素系统在免疫沉淀中的应用 - MedChemExpress

    因此 SABS 广泛应用于免疫沉淀 (IP)、蛋白纯化以及成像实验的信号放大,如免疫荧光 (IF)、酶联免疫吸附实验 (ELISA)、原位杂交等实验。 MCE链霉亲和素磁珠在涉及多种应用的 64 篇文献中被引用 (累计影响因子 360+),如免疫沉淀 (IP)、染色质免疫共沉淀 (CHIP)、RNA pull down、蛋白纯化等。 为了验证这一假设,作者使用三种生物素标记的 CnHsf3-线粒体靶向寡核苷酸进行 CHIP 实验。 ▐ 案例 3:RNA 免疫沉淀 (RIP)作者假设 YTHDC1 参与 HaCaT 细胞中 SQSTM1 表达的调节。 RNA 免疫沉淀(RIP)-qPCR 实验表明,YTHDC1 蛋白可以与 SQSTM1 mRNA 相互作用。

    1.9K00编辑于 2024-01-18
  • 来自专栏开源部署

    CentOS7使用DevStack快速搭建OpenStack实验环境

    安装环境:CentOS 7系统下安装DevStack 一、下载Ubuntu或者CentOS 7安装(实体机或者虚拟机都可以),建议选择最小安装镜像即可。

    81520编辑于 2022-07-14
  • 来自专栏机器人课程与技术

    实验7 蓝桥ROS1使用外设 适用kineticmelodicnoetic

    内容:使用游戏手柄、使用RGBD传感器,ROS摄像头驱动、ROS与OpenCV库、标定摄像头、视觉里程计,点云库、可视化点云、滤波和缩减采样、配准与匹配、点云分区

    48920编辑于 2022-05-19
  • 来自专栏作图丫

    单基因泛癌+简单实验就能发表7分+

    今天小编为大家带来一篇单基因泛癌+简单实验发表了7分+的Front. 来自HPA的数据表明,前五个富含CD147 RNA 的细胞系是U-87、U-2197、NTERA-2、HaCaT和MCF7(图2C)。 图6 05 单细胞分析和免疫荧光染色 作者研究了几种癌症类型中CD147在肿瘤和基质细胞上的表达,包括GBM(图7A)、HNSC(图7B)、KIRC(图7C)、LUAD(图7D)、PRAD(图7E)、CHOL (图7F)等。 小编总结 本文是一篇传统的单基因泛癌文章,其亮点在于加了免疫荧光实验,并且基因选择了CD147这种与免疫密切相关的CD分子,提醒我们做单基因泛癌选择基因时,一定要选择与肿瘤与免疫密切相关的明星基因。

    63531编辑于 2022-06-24
  • 来自专栏生信菜鸟团

    Cell:对亚细胞蛋白质组进行全局表征,发现许多蛋白质是通过其空间分布的变化而非丰度变化来调节的

    所有免疫沉淀和N/O/C分离均使用每个重复107个细胞进行了三次实验。 Para_02 定量分析揭示了每种细胞器免疫沉淀的丰富的蛋白质富集谱(图1F–1L;图S1D;STAR方法)。 线粒体外膜蛋白TOMM20的天然免疫沉淀显示982种蛋白质的富集(富集≥2倍,p值≤0.01,在三次实验中;图1F和1G),其中线粒体蛋白质的富集最大(图1H)。 我们的数据集总共包括8,192个独特的表达基因("猎物",在至少一次免疫沉淀的所有重复实验中被检测到;STAR方法)和8,538个总蛋白质,包括相同基因产物的异构体。 可以在天然免疫沉淀下游进行PTM富集,以提供更多见解。 最后,我们的质谱实验是在大量细胞群体中进行的,无法解析单细胞水平上的蛋白质定位变化。 Sample generation for proteomics analysis 用于蛋白质组学分析的样本生成 Input material Para_01 所有实验均使用每组约10^7个细胞,从生长至

    68210编辑于 2025-02-27
  • 【辰辉创聚生物】重组蛋白表达与纯化|蛋白表达不同标签的优势及用途

    本文将系统总结我们在不同的重组蛋白表达系统中积累的经验与实践,提供一些实用的标签搭配建议,为您的实验设计提供有价值的参考。 尽管标签较大,可能对目标蛋白的结构和功能产生一定影响,但它在蛋白纯化、免疫沉淀及功能分析等方面具有广泛的应用。去除GST标签时,通常需要使用酶切或亲和素洗脱方法,以恢复目标蛋白的天然功能。 Flag标签FLAG标签是一个小型的八肽序列(DYKDDDDK),常用于免疫沉淀和Western Blot等检测方法。它与抗FLAG抗体具有高特异性,广泛用于蛋白检测和分析。 Strep-tag II标签小巧且具有高特异性,能够与链霉亲和素高效结合,适用于蛋白纯化和免疫沉淀。它对蛋白结构影响较小,去标签过程简便。 选择合适的蛋白标签需要根据实验需求来决定。以下是常见标签的特点,帮你一眼看清:His-tag:小巧、便宜,适合常规使用。GST-tag:提高蛋白溶解性,适用于Pull-down实验

    48700编辑于 2025-08-13
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