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染色质免疫沉淀(ChIP)实验(附视频)
实验前准备 在实验开始前，先准备好本次实验所需的各种试剂盒和相关常规试剂，如本次实验分装 Pierce Agarose ChIP Kit， 此试剂盒， 提供了简化的方法来实现交联反交联、 蛋白消化、 免疫沉淀和 这时可继续进行接下来的免疫沉淀反应实验，也可以将样品冻存于-80℃中备用。 染色质免疫沉淀反应将上一步骤得到的上清，约 50μl，转移 5μl 至另一新的离心管中作为 Input对照。 1-10μg 抗体，视抗体滴度浓度而定。 DoctorA，您在实验中，以及上个问题中提到的 Input 对照，它是怎么来的，重要性体现在哪里呢？ 在进行免疫沉淀前，取一部分断裂后的染色质做 Input 对照。 若想得到一个好的实验结果， 抗体的选择需要注意什么呢？ 染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是 ChIP 实验成功的关键。
2.7K22发布于 2019-09-17 - 来自专栏生命科学
蛋白 AG 磁珠免疫沉淀（IP）实验 精选参考文献｜MCE
蛋白 A/G 磁珠为 IP、Co-IP 和 ChIP 实验提供了一种快速便捷的方法。 MCE 蛋白质 A/G 磁珠通常用于从血清、细胞培养上清或腹水中分离抗体，以及从细胞或组织提取物中免疫沉淀和共免疫沉淀抗原。Free Sample (200 μL）限时可申请试用。 功能实验表明，MAGE-C3通过激活上皮间质转化（EMT）促进肿瘤转移。MAGE-C3抑制抗肿瘤免疫并调节T细胞的细胞因子分泌，这意味着免疫抑制功能。 用来自小鼠肝全细胞裂解物的泛Kbhb或泛Kac抗体进行免疫沉淀。赖氨酸β-羟基丁酰化（Kbhb）是由生酮饮食（KD）诱导的翻译后修饰，KD是一种对多种人类疾病具有治疗作用的饮食。 用针对Myc-标签或Flag-标签的抗体免疫沉淀蛋白质提取物，然后用指定的抗体进行免疫印迹。
34110编辑于 2025-09-10 【免疫学实验】揭秘蛋白互作：免疫沉淀与免疫共沉淀
一、 免疫沉淀（IP）：精准捕获目标蛋白 免疫沉淀是利用抗体从复杂的混合物中分离特定蛋白质的技术。 1. 免疫沉淀与 SDS-PAGE 分析 免疫沉淀法用于从细胞裂解液中富集特定抗原。细胞可通过 ³⁵S-蛋氨酸代谢标记（标记所有新合成蛋白）或 表面碘化/生物素化（仅标记膜蛋白）进行示踪。 最后通过放射自显影（或显色）确定蛋白位置 三、 免疫共沉淀（Co-IP）：验证蛋白互作 如果说免疫沉淀是“抓单个”，那么免疫共沉淀就是“抓团伙”。 实验逻辑： 捕获： 在含有潜在复合物的细胞提取物中，使用蛋白A的抗体进行免疫沉淀。 验证： 将沉淀下来的复合物进行电泳和免疫印迹（Western Blot），使用蛋白B的抗体进行检测。 总结 免疫沉淀技术不仅帮助我们纯化和鉴定蛋白质（分子量、等电点），更是通过免疫共沉淀技术，成为了揭示蛋白质之间物理相互作用的金标准实验方法。
31010编辑于 2025-12-29- 来自专栏图形学与OpenGL
实验10 Bezier曲线生成
1．实验目的： 了解曲线的生成原理； 掌握几种常见的曲线生成算法，利用VC+OpenGL实现Bezier曲线生成算法。 2．实验内容： （1）结合示范代码了解曲线生成原理与算法实现，尤其是Bezier曲线。 （2）调试、编译、修改示范程序。 3．实验原理： Bezier曲线是通过一组多边形折线的顶点来定义的。 图A.10（a）Bezier曲线 5．实验提高 模仿上述代码，以( 10, 5, 0 ),( 5, 10, 0 ),( -5, 15, 0 ),( -10, -5, 0 ),( 4, -4, 0 ) ,( 10, 5, 0 ), ( 5, 10, 0 ), ( -5, 15, 0 ), ( -10, -5, 0 )，( 10, 5, 0 )为控制点，将其转变为B样条曲线生成算法，见图A.10(b)。 图A.10（b）B样条曲线
1.4K40发布于 2020-10-29 - 来自专栏生命科学
MCE | 磁珠 VS 琼脂糖珠
琼脂糖珠长久以来，多孔的琼脂糖珠(也称琼脂糖树脂)作为免疫沉淀实验中的固相支持物常用的材料 但值得注意的是，在免疫沉淀实验中，抗体的量常常不足以满足琼脂糖珠的饱和荷载量，没有被抗体覆盖的琼脂糖珠的部分则可以自由地结合任何可粘附的物质，这种非特异性结合升高引起背景信号升高，这时，“高荷载量优势” 排除由于微珠本身材质引起的非特异性结合：将裂解样本与微珠单独混合孵育，随后去除微珠并收集上清液，再进行免疫沉淀实验。b. 琼脂糖珠：琼脂糖珠必须通过离心浓缩在管底部，并在每次孵育和洗涤除去上清液，通常需要肉眼识别管底部的琼脂糖珠，因此，每个免疫沉淀实验至少需要使用25-50 μL 的琼脂糖珠。 相反，磁珠免疫沉淀反应不需要离心，配合使用磁性分离架磁性分离，在 30 分钟内即可完成实验，因此可以在较短时间内轻松处理并获得较多样本的分析数据。
55820编辑于 2023-03-15 - 来自专栏生命科学
免疫沉淀常见问题解答 | MedChemExpress
其次根据实验目的，选择合适的表面活性基团以及由此衍生的偶联方式、蛋白结合量等。 注 1：Co-IP 实验时，常用 NP-40 等非离子型裂解液，以免破坏蛋白-蛋白相互作用。注 2：确保目的蛋白在抗原样品中有较高水平表达。 例如，同型对照抗体 (没有特异靶标的一抗，但在类别和亚型上，其跟实验应用中的靶标一抗一致) 等。 Output：在某些 Co-IP 实验中，实验人员会把 IP 后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测，该对照组称为 output 组。...... 好了，说了这么多，希望本篇对大家有所帮助，祝伙伴们拿到心仪的实验结果。
68320编辑于 2023-02-03 链霉亲和素-生物素系统在免疫沉淀中的应用 - MedChemExpress
一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合 (图 1)，二者的解离常数 (kd) 约为 10-15，这种紧密而特异的结合非常快速且能够承受极端的 pH 值、温度、有机溶剂和变性试剂。 因此 SABS 广泛应用于免疫沉淀 (IP)、蛋白纯化以及成像实验的信号放大，如免疫荧光 (IF)、酶联免疫吸附实验 (ELISA)、原位杂交等实验。 ▐ 案例 3：RNA 免疫沉淀 (RIP)作者假设 YTHDC1 参与 HaCaT 细胞中 SQSTM1 表达的调节。 RNA 免疫沉淀(RIP)-qPCR 实验表明，YTHDC1 蛋白可以与 SQSTM1 mRNA 相互作用。 下述为 2 种方法举例：1）解离生物素化核酸：为了从链霉亲和素磁珠上分离生物素化核酸，在 pH 8.2 的 95% 甲酰胺+ 10 mM EDTA 中孵育磁珠，65°C 孵育 5 分钟或 90°C 孵育
1.9K00编辑于 2024-01-18- 来自专栏杂谈
Linux实验10 Apache服务器配置
Apache服务器，全称为Apache HTTP Server，是由Apache软件基金会开发和维护的一款开源网页服务器软件。它是世界上最流行的Web服务器软件之一，能够在多种计算机操作系统上运行，包括Unix、Linux、Windows等。Apache服务器以其稳定性、安全性和高度可配置性著称，支持多种功能和技术，比如CGI、SSL/TLS安全协议、虚拟主机等。它还能够通过模块化架构轻松扩展功能，允许用户根据需要添加如PHP、Python等动态内容处理模块。Apache服务器因其开源特性，拥有庞大的用户社区和丰富的文档资源，适合从个人网站到大型企业级应用的各种Web服务部署场景。
83810编辑于 2024-05-17 - 来自专栏图形学与OpenGL
实验10 Bezier曲线生成-实验提高-控制点生成B样条曲线
本代码根据已知控制点( 10, 5, 0 ),( 5, 10, 0 ),( -5, 15, 0 ),( -10, -5, 0 ),( 4, -4, 0 ),( 10, 5, 0 ), ( 5, 10, 0 ), ( -5, 15, 0 ), ( -10, -5, 0 )，( 10, 5, 0 )来生成三次B样条曲线。 & operator[](const int i) { return c[i]; } }; vector<Point> GctrlPt, GbsCurvePt; int GnumSegment = 10 , 5, 0 }, { 5, 10, 0 }, { -5, 15, 0 }, { -10, -5, 0 }, { 4, -4, 0 }, { 10, 5, 0 }, { 5, 10, 0 }, { - 5, 15, 0 }, { -10, -5, 0 } }; Point pt; for (int i = 0; i < 9; i++) { Point pt = Point(points[i]
80330编辑于 2022-06-12 - 来自专栏图形学与OpenGL
实验10 Bezier曲线生成-实验提高-交互式生成B样条曲线
& operator[](const int i) { return c[i]; } }; vector<Point> GctrlPt, GbsCurvePt; int GnumSegment = 10
89230编辑于 2022-06-12 - 来自专栏生命科学
MCE丨重组蛋白常见的融合标签
相关产品Tag Peptides标签多肽，可用于标签蛋白的竞争性洗脱，可作为相关检测的阳性对照Anti-HA Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 HA 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-c-Myc Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 c-Myc 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-Flag Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 Flag 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-GST Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 GST 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。
50510编辑于 2023-03-22 - 来自专栏全栈程序员必看
10_linux内核定时器实验
nsecs) 纳秒延时函数 void udelay(unsigned long usecs) 微秒延时函数 void mdelay(unsigned long mseces) 毫秒延时函数 二、内核定时器实验 1、添加设备树节点 1）添加设备节点 实验使用定时器控制 led 亮灭，在根节点下创建设备节点： gpioled { compatible = "gpioled_test"; status imx6ul-evk 中添加 pinctrl 节点： gpioled: ledgrp { fsl,pins = < MX6UL_PAD_GPIO1_IO03__GPIO1_IO03 0x10b0
2.6K30编辑于 2022-09-13 - 来自专栏生信菜鸟团
Cell：对亚细胞蛋白质组进行全局表征，发现许多蛋白质是通过其空间分布的变化而非丰度变化来调节的
所有免疫沉淀和N/O/C分离均使用每个重复107个细胞进行了三次实验。 Para_02 定量分析揭示了每种细胞器免疫沉淀的丰富的蛋白质富集谱（图1F–1L；图S1D；STAR方法）。 线粒体外膜蛋白TOMM20的天然免疫沉淀显示982种蛋白质的富集（富集≥2倍，p值≤0.01，在三次实验中；图1F和1G），其中线粒体蛋白质的富集最大（图1H）。 可以在天然免疫沉淀下游进行PTM富集，以提供更多见解。 最后，我们的质谱实验是在大量细胞群体中进行的，无法解析单细胞水平上的蛋白质定位变化。 80-90%融合度的10厘米培养皿中收获细胞，并进行了三重重复实验。 Transcriptomics 转录组学 Para_01 为了进行OC43感染细胞的转录组分析，我们基本上按照所有蛋白质组学实验的方法，在37°C下在10厘米培养皿中培养和感染细胞。
68210编辑于 2025-02-27 - 来自专栏wuuconix
实验室机器安装Windows 10记录 - wuuconixs blog
背景 昨天将实验室的主机重装成win10了。现在我就是在实验室远程连接寝室的笔记本来写博客。 在配置好远程连接并且深刻体会到远程带来的方便与快捷后，我已经离不开它了。 进入实验室也快半年了，就没来过几次2333，我觉得很大部分原因是，每次来实验室都要备上沉重的笔记本。 有时候突然想要去实验室了，但是想到要拿笔记本，拿充电器，拿键盘，拿鼠标，背着沉重的包走过来。 于是昨天我打算把用了快3个月的Ubuntu Server刷成win10，这样就能不用带笔记本了，而远程连接。或者不远程，直接用实验室的主机也能干很多事了。 https://www.microsoft.com/zh-cn/software-download/windows10 结果发现狗比微软官网只提供了下载工具而没有直接下载iso镜像的选项。 这里提供了两个选择，windows 10和windows 家庭版。第一个我怀疑是专业版。但是为了保险起见，我选择了熟悉的家庭版。 之后就是正常u盘启动然后重装啦，不多说了。
93130编辑于 2023-01-30 【辰辉创聚生物】重组蛋白表达与纯化|蛋白表达不同标签的优势及用途
本文将系统总结我们在不同的重组蛋白表达系统中积累的经验与实践，提供一些实用的标签搭配建议，为您的实验设计提供有价值的参考。 尽管标签较大，可能对目标蛋白的结构和功能产生一定影响，但它在蛋白纯化、免疫沉淀及功能分析等方面具有广泛的应用。去除GST标签时，通常需要使用酶切或亲和素洗脱方法，以恢复目标蛋白的天然功能。 Flag标签FLAG标签是一个小型的八肽序列（DYKDDDDK），常用于免疫沉淀和Western Blot等检测方法。它与抗FLAG抗体具有高特异性，广泛用于蛋白检测和分析。 Strep-tag II标签小巧且具有高特异性，能够与链霉亲和素高效结合，适用于蛋白纯化和免疫沉淀。它对蛋白结构影响较小，去标签过程简便。 选择合适的蛋白标签需要根据实验需求来决定。以下是常见标签的特点，帮你一眼看清：His-tag：小巧、便宜，适合常规使用。GST-tag：提高蛋白溶解性，适用于Pull-down实验。
48700编辑于 2025-08-13- 来自专栏前端达人
10+个很酷的VueJS组件，模板和实验示例
https://gruhn.github.io/vue-qrcode-reader VueJS Expo VueJS Expo是使用Vue.js框架收集的漂亮的网站，应用程序和实验。
2.7K20发布于 2020-06-24 - 来自专栏生信技能树
m6A-Seq数据质量评估：trumpet包
除此之外，还可以用于其他RNA免疫沉淀测序技术数据评估如m1A-seq, CeU-Seq, Ψ-seq等。 低reads count或比对到特定基因组区域的reads比例差异过大可能与低数据质量有关，这是由于多样本混库测序不平衡、DNA污染或实验过程中的其他偏差造成的。 下表中，相对于其他样本，IP2样本的外显子区域read覆盖度高，在区域覆盖度 > 10^4^ reads 时更显著。 PCR artifacts 可能进一步加剧了m6 A-seq实验reads覆盖的异质性。 ? 3.reads分布可视化 RNA m6A一般分布在起始密码子和终止密码子附近。 4.使用ESES评估免疫沉淀反应效率 m6A-Seq数据的一个主要评价指标就是免疫沉淀反应效率，只要体现在免疫沉淀信号的富集程度。
1.8K20发布于 2021-02-03 - 来自专栏喔家ArchiSelf
全栈必备：系统架构设计的10个思维实验
本文初步列举了在系统架构设计中的10个常见知识点，并使用思维实验的方式尝试系统设计。这样的刻意练习或许可以起到一定的辅助效果。 1. 实验四：设计一种可伸缩的流量控制器 流量控制对于保护系统免受大量请求的影响至关重要。 10. 全文检索 全文搜索是一种在应用程序或网站中搜索特定单词或短语的功能。当用户在搜索框中输入查询时，应用程序或网站将返回最相关的结果，以帮助用户快速找到所需内容。 实验十：设计一个网络爬虫 一个网络爬虫被用来从网站中提取信息并为搜索引擎建立索引。 一句话小结 “刻意练习”，本文介绍了10个系统架构设计的思维实验，包括分布式文件系统、服务协调控制、API网关、分布式消息系统和全文检索等。
55950编辑于 2023-09-02 - 来自专栏数据科学（冷冻工厂）
HiChIP 数据分析: 分析简介
摘要 HiChIP 是一种基于原位 Hi-C 的新型方法，用于分析染色质相互作用，它在流程中加入了一个免疫沉淀 (ChIP) 步骤，以研究由特定蛋白质驱动的染色质结构。 在本文中，我们描述了一种计算流程，用于分析在人类胚胎干细胞中，在热休克处理前后，通过 Rad21（黏连蛋白复合体的一部分）免疫沉淀获得的 HiChIP 数据。 它属于 3C 技术 的一种，并复现了经典的原位 Hi-C 流程，只是在 DNA 消化和连接之后额外增加了一个染色质免疫沉淀 (ChIP) 步骤，从而仅分离并测序与特定蛋白质交联的片段。 尽管具备方法学优势，免疫沉淀步骤的加入会导致测序读取在分布上不均匀，并偏向特定限制性片段，这一点必须在识别局部富集的相互作用（loops）时予以特别考虑。 来自公共 HiChIP 数据集（包含不同实验条件）的原始测序数据，首先使用 HiC-Pro进行处理，该流程对读段对进行比对和过滤。
31710编辑于 2025-09-17 - 来自专栏百味科研芝士
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1.1K10发布于 2019-05-23
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