首页
学习
活动
专区
圈层
工具
发布
    • 综合排序
    • 最热优先
    • 最新优先
    时间不限
  • 来自专栏生物信息云

    染色质免疫沉淀(ChIP)实验(附视频)

    染色质免疫沉淀技术是目前唯一研究体内 DNA与蛋白质相互作用的方法。 实验前准备 在实验开始前,先准备好本次实验所需的各种试剂盒和相关常规试剂,如本次实验分装 Pierce Agarose ChIP Kit, 此试剂盒, 提供了简化的方法来实现交联反交联、 蛋白消化、 免疫沉淀和 这时可继续进行接下来的免疫沉淀反应实验,也可以将样品冻存于-80℃中备用。 染色质免疫沉淀反应将上一步骤得到的上清,约 50μl,转移 5μl 至另一新的离心管中作为 Input对照。 DoctorA,您在实验中,以及上个问题中提到的 Input 对照,它是怎么来的,重要性体现在哪里呢? 在进行免疫沉淀前,取一部分断裂后的染色质做 Input 对照。 若想得到一个好的实验结果, 抗体的选择需要注意什么呢? 染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是 ChIP 实验成功的关键。

    2.7K22发布于 2019-09-17
  • 来自专栏生命科学

    蛋白 AG 磁珠免疫沉淀(IP)实验 精选参考文献|MCE

    蛋白 A/G 磁珠为 IP、Co-IP 和 ChIP 实验提供了一种快速便捷的方法。 MCE 蛋白质 A/G 磁珠通常用于从血清、细胞培养上清或腹水中分离抗体,以及从细胞或组织提取物中免疫沉淀和共免疫沉淀抗原。Free Sample (200 μL)限时可申请试用。 功能实验表明,MAGE-C3通过激活上皮间质转化(EMT)促进肿瘤转移。MAGE-C3抑制抗肿瘤免疫并调节T细胞的细胞因子分泌,这意味着免疫抑制功能。 用来自小鼠肝全细胞裂解物的泛Kbhb或泛Kac抗体进行免疫沉淀。赖氨酸β-羟基丁酰化(Kbhb)是由生酮饮食(KD)诱导的翻译后修饰,KD是一种对多种人类疾病具有治疗作用的饮食。 用针对Myc-标签或Flag-标签的抗体免疫沉淀蛋白质提取物,然后用指定的抗体进行免疫印迹。

    34110编辑于 2025-09-10
  • 【免疫学实验】揭秘蛋白互作:免疫沉淀与免疫共沉淀

    一、 免疫沉淀(IP):精准捕获目标蛋白 免疫沉淀是利用抗体从复杂的混合物中分离特定蛋白质的技术。 1. 免疫沉淀与 SDS-PAGE 分析 免疫沉淀法用于从细胞裂解液中富集特定抗原。细胞可通过 ³⁵S-蛋氨酸代谢标记(标记所有新合成蛋白)或 表面碘化/生物素化(仅标记膜蛋白)进行示踪。 最后通过放射自显影(或显色)确定蛋白位置 三、 免疫共沉淀(Co-IP):验证蛋白互作 如果说免疫沉淀是“抓单个”,那么免疫共沉淀就是“抓团伙”。 实验逻辑: 捕获: 在含有潜在复合物的细胞提取物中,使用蛋白A的抗体进行免疫沉淀。 验证: 将沉淀下来的复合物进行电泳和免疫印迹(Western Blot),使用蛋白B的抗体进行检测。 总结 免疫沉淀技术不仅帮助我们纯化和鉴定蛋白质(分子量、等电点),更是通过免疫共沉淀技术,成为了揭示蛋白质之间物理相互作用的金标准实验方法。

    31010编辑于 2025-12-29
  • 来自专栏全栈程序员必看

    漏洞挖掘——实验11 侧信道攻击+TCPIP实验

    漏洞挖掘前言 题目 Lab 侧信道攻击 + TCP/IP实验 Pre 1、用IE访问某些网站的时候,输入javascript:alert(document.cookie)会有什么反应,解释原因。 解答 Lab 侧信道攻击 + TCP/IP实验 一、侧信道攻击 这次测信道攻击的漏洞的主要原因是:1、密码是逐个字符判断的。 运行演示: 攻击成功 二、TCP/IP实验 Task (1) : ARP cache poisoning 三台机器的IP地址为:192.168.43.204、192.168.43.181、192.168.43.23

    1K30编辑于 2022-09-14
  • 来自专栏惊羽-布壳儿

    实验室(11) - openldap

    7622d52404fb436aae9c2588e6ce3f8a.png 2.3 在konga网关配置路由 此处只写了upstream 的配置,此外还需要配置service,route,详情参考 [云实验

    95320编辑于 2022-06-15
  • 来自专栏CreateAMind

    Google Research Football (scenario 11) 实验

    谷歌足球游戏环境使用介绍 在之前的公众号文章中我们介绍了Football Academy中的两个scenario的实验: Google Research Football (scenario 2) 实验 Google Research Football (scenario 7) 实验 这里分享的是Football Academy中最后一个 scenario 的一些实验结果。 scenario 2 和 scenario 7 都不是完整比赛,游戏复杂度相对较低,scenario 1111v11 比赛,更像完整比赛,但是被抢断,出界,进球都会终止比赛。 我们正在进行11v11的正式比赛训练,用训练过的agent也可以跑scenario 11,但是不会刻意避免终止的情况,所以得分不高。 3. 随机 scenario 11 进球集锦 ?

    1.4K30发布于 2019-09-24
  • 来自专栏图形学与OpenGL

    实验11 B样条曲面生成

    1.实验目的: 掌握B样条、NURBS(非均匀有理B样条)曲线、曲面的概念。 掌握B样条、NURBS曲面编程方法。 2.实验内容: 结合示范代码了解曲线B样条曲面生成原理与算法实现,尤其是NURBS曲面。 调试、编译、修改示范程序。 3.实验原理: 求值器能够描述任何角度的多项式或有理多项式样条或表面,包括B-样条,NURBS(非均匀有理B-样条)表面,Bezier曲线和表面,以及Hermite样条。 图A.11(a)生成B样条曲面 5.实验提高 根据控制点(-1.5, -1.5, 2.0)、(-0.5, -1.5, 2.0)、(0.5, -1.5, -1.0)、(1.5, -1.5, 2.0)、 图A.11(b)重新生成B样条曲面

    2.2K40发布于 2020-10-29
  • 来自专栏张国平_玩转树莓派

    树莓派基础实验11:U型光电传感器实验

    ---- 二、组件 ★Raspberry Pi 3主板*1 ★树莓派电源*1 ★40P软排线*1 ★U型光电传感器模块*1 ★双色LED模块*1 ★面包板*1 ★跳线若干 三、实验原理 ? 在这个实验中,我们将通过使用此更改来打开或关闭LED灯。 四、实验步骤 第1步:连接电路,该实验实验6(轻触开关按键实验)相同。这里要注意光电传感器使用3.3V电源,而不是5V。 树莓派 T型转接板 U型光电传感器 GPIO 0(序号11) GPIO 17 SIG(OUT) 3.3V 3.3V VCC GND GND GND 树莓派 T型转接板 双色LED GPIO 1(序号12 U型光电传感器实验电路图 ? U型光电传感器实验实物接线图 第2步:这次编程有两个函数要注意,是关于输入的高级应用。    /usr/bin/env python import RPi.GPIO as GPIO PIPin = 11 Rpin = 12 Gpin = 13 def setup(): GPIO.setmode

    2.6K10发布于 2020-09-27
  • 链霉亲和素-生物素系统在免疫沉淀中的应用 - MedChemExpress

    因此 SABS 广泛应用于免疫沉淀 (IP)、蛋白纯化以及成像实验的信号放大,如免疫荧光 (IF)、酶联免疫吸附实验 (ELISA)、原位杂交等实验。 ▐ 案例 1:免疫沉淀 (IP)为了证实 Rab11a 是否在缺氧条件下的 MSC-sEV (间充质干细胞来源的小细胞外囊泡)回收中发挥作用,作者使用了链霉亲和素磁珠共沉淀生物素标记的 MSC-sEV 作者发现在常氧组和缺氧组中,Rab11a 均被链霉亲和素磁珠共沉淀,但在生物素化的 MSC-sEV 或 NPC + 未生物素标记的 MSC-Sev 组中则不然,这表明缺氧下 Rab11a 与内化 MSC-sEV ▐ 案例 3:RNA 免疫沉淀 (RIP)作者假设 YTHDC1 参与 HaCaT 细胞中 SQSTM1 表达的调节。 RNA 免疫沉淀(RIP)-qPCR 实验表明,YTHDC1 蛋白可以与 SQSTM1 mRNA 相互作用。

    1.9K00编辑于 2024-01-18
  • 来自专栏王忘杰的小屋

    VeeamBackup&Replication11备份恢复系统综合实验

    与其他备份软件的对比 https://www.veeam.com/cn/backup-software-comparison-for-small-business.html 勒索软件猖獗,备份非常重要 实验目标 : 1、windows平台+linux存储库架构部署 2、虚拟机备份还原 3、物理机完全崩溃还原 4、应用感知、数据库备份还原 5、SAP数据库插件安装 实验环境: windows2022+Alma8搭建备份系统 sqlserver2014进行数据库感知、备份、还原 centos7安装SAP备份插件 一、windows2022+Alma8搭建备份系统 从官网下载Veeam Backup & Replication 11 其中免费社区版提供10个工作负载,而企业版购买后授权50个起步,本次实验使用社区免费版搭建 https://www.veeam.com/cn/downloads.html windows2022配置为

    2.1K10编辑于 2022-09-22
  • 来自专栏张国平_玩转树莓派

    树莓派基础实验27:温湿度传感器DHT11 实验

    ---- 二、组件 ★Raspberry Pi主板*1 ★树莓派电源*1 ★40P软排线*1 ★湿度传感器DHT11模块*1 ★面包板*1 ★跳线若干 三、实验原理 ? 温湿度传感器 ? DHT11数据格式示例 2. DHT11的工作原理: ? 数据时序图 DHT11的总体通信流程: 第一步:主机(树莓派)先发送开始信号,从机(DHT11)会返回一个相应信号进行应答。 当单片机和DHT11正在通信时,总线处于通信状态,一次完整的通信过程如下: 第一步:DHT11 上电后(DHT11 上电后要等待 1秒以越过不稳定状态在此期间不能发送任何指令),测试环境温湿度数据,幵记录数据 校验数据 更多资料请参考DHT11 官方手册: https://www.dfrobot.com.cn/image/data/DFR0067/DFR0067_DS_10.pdf 四、实验步骤 第1步: 温湿度传感器DHT11 实验电路图 ? 温湿度传感器DHT11 实验实物接线图 第2步:编写控制程序。将提取的二进制数据转化为十进制数据,校验后打印出来。   

    8.4K21发布于 2020-09-27
  • 来自专栏生命科学

    MCE | 磁珠 VS 琼脂糖珠

    琼脂糖珠长久以来,多孔的琼脂糖珠(也称琼脂糖树脂)作为免疫沉淀实验中的固相支持物常用的材料 但值得注意的是,在免疫沉淀实验中,抗体的量常常不足以满足琼脂糖珠的饱和荷载量,没有被抗体覆盖的琼脂糖珠的部分则可以自由地结合任何可粘附的物质,这种非特异性结合升高引起背景信号升高,这时,“高荷载量优势” 排除由于微珠本身材质引起的非特异性结合:将裂解样本与微珠单独混合孵育,随后去除微珠并收集上清液,再进行免疫沉淀实验。b. 琼脂糖珠:琼脂糖珠必须通过离心浓缩在管底部,并在每次孵育和洗涤除去上清液,通常需要肉眼识别管底部的琼脂糖珠,因此,每个免疫沉淀实验至少需要使用25-50 μL 的琼脂糖珠。 相反,磁珠免疫沉淀反应不需要离心,配合使用磁性分离架磁性分离,在 30 分钟内即可完成实验,因此可以在较短时间内轻松处理并获得较多样本的分析数据。

    55820编辑于 2023-03-15
  • 来自专栏生命科学

    免疫沉淀常见问题解答 | MedChemExpress

    其次根据实验目的,选择合适的表面活性基团以及由此衍生的偶联方式、蛋白结合量等。 注 1:Co-IP 实验时,常用 NP-40 等非离子型裂解液,以免破坏蛋白-蛋白相互作用。注 2:确保目的蛋白在抗原样品中有较高水平表达。 例如,同型对照抗体 (没有特异靶标的一抗,但在类别和亚型上,其跟实验应用中的靶标一抗一致) 等。 Output:在某些 Co-IP 实验中,实验人员会把 IP 后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测,该对照组称为 output 组。...... 好了,说了这么多,希望本篇对大家有所帮助,祝伙伴们拿到心仪的实验结果。

    68320编辑于 2023-02-03
  • 【辰辉创聚生物】重组蛋白表达与纯化|蛋白表达不同标签的优势及用途

    本文将系统总结我们在不同的重组蛋白表达系统中积累的经验与实践,提供一些实用的标签搭配建议,为您的实验设计提供有价值的参考。 Flag标签FLAG标签是一个小型的八肽序列(DYKDDDDK),常用于免疫沉淀和Western Blot等检测方法。它与抗FLAG抗体具有高特异性,广泛用于蛋白检测和分析。 Strep-tag II标签小巧且具有高特异性,能够与链霉亲和素高效结合,适用于蛋白纯化和免疫沉淀。它对蛋白结构影响较小,去标签过程简便。 SUMO标签SUMO标签是一种约11 kDa的小型泛素样修饰物,广泛应用于重组蛋白的表达和纯化。它有助于提高目标蛋白的溶解度,促进正确折叠,并减少包涵体的形成。 选择合适的蛋白标签需要根据实验需求来决定。以下是常见标签的特点,帮你一眼看清:His-tag:小巧、便宜,适合常规使用。GST-tag:提高蛋白溶解性,适用于Pull-down实验

    48700编辑于 2025-08-13
  • 来自专栏生命科学

    MCE丨重组蛋白常见的融合标签

    相关产品Tag Peptides标签多肽,可用于标签蛋白的竞争性洗脱,可作为相关检测的阳性对照Anti-HA Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 HA 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-c-Myc Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 c-Myc 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-Flag Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 Flag 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-GST Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 GST 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验

    50510编辑于 2023-03-22
  • 来自专栏杂谈

    Linux实验11 配置匿名用户登录FTP服务器

    二、实验步骤 1.FTP服务器 1.1 FTP服务器固定IP地址为192.168.100.100 1.2 安装vsftp 1.3 修改防火墙和SELinux设置 1.4 创建根目录,新建测试文件file1.100

    6K10编辑于 2024-05-28
  • 来自专栏生信菜鸟团

    Cell:对亚细胞蛋白质组进行全局表征,发现许多蛋白质是通过其空间分布的变化而非丰度变化来调节的

    所有免疫沉淀和N/O/C分离均使用每个重复107个细胞进行了三次实验。 Para_02 定量分析揭示了每种细胞器免疫沉淀的丰富的蛋白质富集谱(图1F–1L;图S1D;STAR方法)。 线粒体外膜蛋白TOMM20的天然免疫沉淀显示982种蛋白质的富集(富集≥2倍,p值≤0.01,在三次实验中;图1F和1G),其中线粒体蛋白质的富集最大(图1H)。 我们的数据集总共包括8,192个独特的表达基因("猎物",在至少一次免疫沉淀的所有重复实验中被检测到;STAR方法)和8,538个总蛋白质,包括相同基因产物的异构体。 可以在天然免疫沉淀下游进行PTM富集,以提供更多见解。 最后,我们的质谱实验是在大量细胞群体中进行的,无法解析单细胞水平上的蛋白质定位变化。 所有实验均在二级生物安全实验室中进行。

    68210编辑于 2025-02-27
  • 来自专栏百味科研芝士

    免费领取数十G最全分子生物实验资源包,科研小白也能成为实验达人

    点击蓝字关注我们 你有没有爱过一个实验 你有没有恨过一个实验 在面对实验的时候, 你有没有茫然过 失望过紧张过 张皇过无措过 ? 【比师姐细心,比父母专业,比对象温柔的】 百味科研芝士实验小分队为你带来 超超超超全面的13G全套生物实验设计资源 ? 分子生物学技术 1.实时荧光定量PCR(real time-QPCR) 2.Western blot技术大全 3.分子克隆技术 4.miRNA.mRNA.IncRNA的引物设计 5.染色质免疫沉淀chip 6.蛋白兔疫共沉淀coip 7.酶联接兔疫吸附测定(ELISA) 8.兔疫组化实验(IHC) 9.凝胶迁移实验(EMSA) 10.DNA甲基化检测 11.分子克隆技术 12.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR 手把手教你细胞划痕技术 手把手教你做细胞侵袭实验 外泌体分离纯化实验视频教程 TUNEL法检测细胞凋亡 关注公众号,后台回复"实验",获取13G资源包 ?

    1.1K10发布于 2019-05-23
  • 来自专栏生信菜鸟团

    【生信文献200篇】67 CHIP-Atlas数据库

    影响因子: 8.804 发表时间: 2018-11-09 研究领域: ChIP-seq 网页工具 DOI: 10.15252/embr.201846255 01 关于ChIP-Atlas ChIP-Atlas ChIP-Atlas可跨越数千个ChIP-seq实验进行数据挖掘。 02 CHIP-seq 染色质免疫沉淀测序(ChIP-seq)是一种分析修饰组蛋白、RNA聚合酶和其他参与转录或基因表达调控的蛋白的全基因组结合的方法。 其实验流程是: 先通过甲醛交联:使目标蛋白与染色质连结在一起; 提取基因组DNA并将其打断成小片段; 添加与目的蛋白特异结合的抗体,该抗体与目标蛋白形成免疫沉淀复合体。 03 ChIP-Atlas开发流程 3.1 数据来源及分布 上图ChIP-Atlas中记录的ChIP-seq和DNase-seq实验数量(截至2018年5月),表明每个物种来自ENCODE, Roadmap

    5.7K21发布于 2021-10-12
  • 来自专栏数据科学(冷冻工厂)

    HiChIP 数据分析: 分析简介

    摘要 HiChIP 是一种基于原位 Hi-C 的新型方法,用于分析染色质相互作用,它在流程中加入了一个免疫沉淀 (ChIP) 步骤,以研究由特定蛋白质驱动的染色质结构。 在本文中,我们描述了一种计算流程,用于分析在人类胚胎干细胞中,在热休克处理前后,通过 Rad21(黏连蛋白复合体的一部分)免疫沉淀获得的 HiChIP 数据。 它属于 3C 技术 的一种,并复现了经典的原位 Hi-C 流程,只是在 DNA 消化和连接之后额外增加了一个染色质免疫沉淀 (ChIP) 步骤,从而仅分离并测序与特定蛋白质交联的片段。 尽管具备方法学优势,免疫沉淀步骤的加入会导致测序读取在分布上不均匀,并偏向特定限制性片段,这一点必须在识别局部富集的相互作用(loops)时予以特别考虑。 来自公共 HiChIP 数据集(包含不同实验条件)的原始测序数据,首先使用 HiC-Pro进行处理,该流程对读段对进行比对和过滤。

    31710编辑于 2025-09-17
领券