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  • 来自专栏生命科学

    Cyanine 染料 | MedChemExpress

    CY 染料的分类CY 染料分为非磺化花菁和磺化花菁。两者的光谱特性基本相同,在 DNA 和蛋白质的标记中,它们是可互换的,两种均可用于标记生物分子。 为减少空间位阻影响,CY 染料常做各种修饰,具体如下:1) Succinimidyl ester (SE) 修饰:该类型 CY 染料可与蛋白的氨基末端或伯胺反应,从而实现包括多肽、抗体等的蛋白标记。 CY 花菁类染料优点1) 光谱窄,信号强;2) 花菁类染料的摩尔吸光系数高于其他荧光染料;3) 磺化花菁类染料易溶于水,对组织细胞毒性小,适用于动物和细胞实验;4) 荧光波段在近红外区段的组织透过性更好 Cy5659/670Cy5 是明亮的红色荧光染料,用于标记肽,蛋白质,寡核苷酸的氨基基团的反应染料。 Cy7-SE720/790CY7-SE (Sulfo-Cyanine7 Succinimidyl Ester) 是一种近红外荧光标记试剂,常用于小动物体内成像,也用来标记核酸,蛋白,多肽,纳米粒,多聚物等

    29620编辑于 2023-01-10
  • 来自专栏技术文章

    选对染料少走弯路,Elabscience 流式死活染色试剂获全球科研认可

    相同样本排除死细胞前后结果对比(A组未加死活染料染色,B组加入PI染料进行染色)2. 自发荧光干扰:死细胞会导致背景自发荧光增强,其信号强度甚至可能超过某些荧光素的真实信号。 排除死细胞的关键是使用死活细胞鉴定染料。目前主要的死活鉴定染料分为核酸染料和胺基染料,它们的原理不同,适用场景各异。1. 核酸染料(适用于未固定样本)该方法的原理基于活细胞膜的完整性:活细胞因膜结构保持完整,具有选择透过性,使得PI、7-AAD、DAPI这类核染料无法进入细胞内部,因此不会显现荧光;而死细胞由于膜已破损,染料可进入细胞内并与核酸结合 使用时,在完成流式抗体染色后,于上机前加入核酸染料并进行短暂孵育。 胺基染料(适用于需固定的实验)该方法的原理是通过染料与蛋白质伯氨基的共价结合实现的:活细胞因仅与细胞膜表面蛋白结合,荧光信号较弱;而死细胞由于细胞膜破损,染料可结合胞内大量蛋白,因此荧光信号较强。

    10000编辑于 2025-12-31
  • 来自专栏生信宝典

    一文读懂:PCR,qPCR,Real-time PCR,RT-PCR和RT-qPCR

    (2)实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR(Real-time PCR,Quantitative Real-time PCR,qPCR),即第二代PCR技术,是指在整个扩增的过程中,引入了荧光染料或者荧光基团 ■ 一种是用荧光染料,主要为SYBRGreenⅠ染料,该染料能与DNA双链结合,结合之后会显示荧光信号,而在没有结合的时候几乎检测不到荧光信号,随着拷贝数的增加,荧光信号增强。 基于泊松分布原理,数字PCR技术核酸样品分配到大量独立、平行的微反应单元中,使每个反应室中平均只有一个拷贝或者没有目标DNA分子,然后加入荧光信号进行扩增,从而实现靶标核酸分子的绝对计数,提高检测灵敏度和准确度 这是目前全新的一种 PCR 检测方式,能对核酸进行检测和定量,采用直接计数目标分子而不依赖任何校准物或者外标,即可确定低至单拷贝的待检靶分子的绝对数目。 由于这种检测方式具有比传统荧光定量 PCR 更加出色的灵敏度和精确性,数字 PCR迅速得到广泛的关注,尤其在痕量核酸样本检测、复杂背景下稀有突变检测、核酸拷贝数变异和基因表达量微小差异鉴定方面表现出的优势已被普遍认可

    6.7K22编辑于 2024-01-23
  • 来自专栏生命科学

    核酸提取干货 - MedChemExpress

    如果要对核酸的结构和功能进行研究,首先就要对核酸进行提取和纯化。核酸提取是个啥?字面意思,就是把核酸从样本中提取出来呗!那一般常见的提取方法有哪些呢? 提取步骤核酸提取主要包括细胞裂解、核酸吸附、杂质漂洗和核酸洗脱四步。那具体到实验中,我们该选择哪种提取方法呢?这就要看个人的实验设计方案及实验组的经费情况啦! 自配试剂的优缺点是显而易见的,若后续实验对核酸要求不高 (如常规的 DNA 提取,后续用做普通 PCR 扩增),这种提取方法也可选择。但如果对核酸的质量要求比较高 (如定量或文库构建等。 MCE 新推出三款核酸提取纯化试剂盒,均利用硅胶膜离心柱对核酸进行特异性吸附,改良的裂解液可以促进细胞充分裂解、蛋白变性、核酸释放;改良的吸附缓冲液能有效地促进核酸结合到硅胶膜上;最后经过洗脱即可获得高纯度核酸 我不仅包含 蛋白酶 K,更有核酸助沉剂助力,提取的核酸那可不团团来嘛!纯化的病毒 DNA/RNA 可用于 PCR、RT-PCR、qPCR 等实验。

    82423编辑于 2022-12-27
  • 来自专栏生信技能树

    问了一下chatGPT实验室常见的生物化学试剂哪些对人体有害

    三氯乙酸缓冲液 Tris缓冲液 试剂盐: 氯化钠(盐) 氯化钾 磷酸二氢钠 硫酸铵 氨水 蛋白质分析试剂: 苯甲醛 吡啶 酚 布拉德福试剂(Bradford reagent) BCA试剂(蛋白质定量) 核酸分析试剂 : 乙酸 氯仿 硝酸 DNA染料(例如,乙溴蓝、SYBR Green) 酶和底物: 脱氧核糖核酸酶(DNA酶) 核糖核酸酶(RNA酶) 蛋白酶 底物(例如,底物用于酶活性测定) 抗体和标记物: 抗体(多抗 、单抗) 荧光标记物(例如,荧光染料、荧光标记的抗体) 酶标记物(例如,辣根过氧化物酶,碱性磷酸酶) 培养基和培养试剂: LB培养基 DMEM培养基 細胞凍存液(DMSO) 分离试剂: 溴化乙锭 异硫氰酸盐 乙二胺四乙酸(EDTA) 二硫代硫酸(DTT) 巯基乙醇(β-ME) 其他: 乙醇 甘油 硝酸银 聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE凝胶) 这些试剂在实验室中用于各种生物化学和分子生物学实验,包括蛋白质分析、核酸分析

    66640编辑于 2023-11-08
  • 来自专栏AI掘金志

    核酸采样机器人来了,我们能实现「核酸自由」吗?

    坐标深圳,本月已完成18次核酸检测。 作者 | 路遥 编辑 | 余快 疫情几年来,保住绿码,成了中国人尤其是深圳人的头等大事。 见面寒暄更多不是问“你吃了吗?”,而是“你做核酸了吗?” 自主扫描粤核酸码后,机器会自动匹配试管条形码,采样前,将自助核酸采样机提供的一次性无菌封装咬口器插入机器卡槽,然后张嘴对准咬口器,剩下的交给机器人即可。 从流程上看,自助核酸采样与由医护人员进行的核酸采样别无二致:采集信息、进行采样。 不可忽视的问题 作为新兴市场,核酸采样机器人行业还处于发展初期,诸多问题需要解决。 第一个问题是,核酸采样机器人真的提高采样效率了吗? 此外,核酸机器人离大规模商业化落地有多远? 由于缺乏国家层面的统一标准,越来越多的企业入局,核酸采样机器人产品也五花八门。

    51920编辑于 2022-11-08
  • 来自专栏亨利笔记

    在香港做核酸指南

    题图摄于香港弥敦道 从外地进入香港的朋友,基本上都要在香港做核酸。如果要从香港入境中国内地,需提供纸质的核酸检测结果。本文说说做核酸的流程和注意事项。 入境香港的旅客,无论从哪个国家来,根据防疫的规定,抵港第2天需接受核酸检测(注:入境当天算第0天)。如果离港前往内地,还需要做两次核酸。 抵港第2天的核酸检测,可以去社区中心免费做。 因为香港本地人基本不需要做核酸,提前1-2天预约即可。 香港社区流动核酸检测点(原来是篮球场) 到了检测现场会再收一条短信确认手机的正确性。 社区出具的纸质核酸检测报告,供出行使用 另一次核酸检测需要在航班预定起飞时间前8小时内,在机场现场做免费强制快速核酸检测,2-3小时出结果(电子版),需要从电子邮件或手机短信中获得报告链接,然后下载电子报告 香港机场的快速核酸检测点 最好提前几天预约机场的核酸检测,注意网站上有收费和免费两种检测,要选择免费那种,是专门为进入中国内地的免费检测。

    3.6K30编辑于 2023-04-04
  • 来自专栏生命科学

    SYBR Green qPCR Master Mix 试剂盒 | MedChemExpress

    产品介绍Real-time Quantitative PCR Detecting System,简称qPCR,即实时荧光定量核酸扩增检测系统 ,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,是目前较为先进的核酸分子诊断技术,被美国FDA承认并推崇。 本产品预先混有 Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 荧光染料、稳定剂和镁离子等通用组分,只需加入模板、引物、双蒸馏水便可进行Real Time

    79710编辑于 2023-01-13
  • 来自专栏生命科学

    亲脂性细胞膜染料: DiO, Dil, DiR, Did - MedChemExpress

    常见 Di 染料常见的 Di 染料包括 DiO、DiI、DiD、DiR,在被激发后形成不同颜色的荧光 (如图 1)。 (但相较其他三种染料,DiO 染料荧光强度较弱,对于某些固定的组织切片染色效果略差)。 如图 4 所示,Dil 染料标记外泌体,然后与目标细胞共培养。 Dil 染料购自 MCE■ DiDDiD 为一种红色荧光染料,激发/发射波长为 646/663 nM,DiD 荧光信号高、不易淬灭、自身荧光干扰低,不仅用于细胞/组织染色,小动物活体成像中是最常用的。 DiD 染料购自 MCE■ DiRDiR 是一种近红外染料,激发/发射波长为 754/778 nm,用于正向或逆向示踪各类细胞或组织,与 DiD 一样,DiR 自身荧光背景较低,也被用在活体成像中。

    1.8K20编辑于 2023-01-09
  • 来自专栏冰河技术

    核酸系统崩了,谁之过?

    ” 相信很多小伙伴都知道了,当前成都疫情非常严峻,就在成都人民排起长队等待核酸检测时,结果核酸检测系统崩了,没错,就是崩了! 本来我是想保持沉默的,某软作为此次核酸系统的承建商,不仅没有出来向广大的成都人民表示歉意,反而一再强调此次0级事故与软件无关,还一再强调自己的系统多么多么“牛逼”!! 某软作为核酸系统的承建商,出现问题后,抓紧排查和修复问题本来就是应该做的事情,事后发文不仅没有表达对成都人民的歉意,还一再甩锅是网络问题,强调与核酸系统软件无关,更多的是强调自己的系统多么多么的“牛逼” 不说别的,首先向成都人民表达了歉意,后续更多的是客观、合理的解释了此次核酸系统出现故障的原因以及目前的解决方案,也直言不讳的说明了后续存在不确定性的因素,和后续的处理措施。

    46030编辑于 2022-12-01
  • 来自专栏简说基因

    从零开始学PCR技术(五):试验污染

    (4) 标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染。 (5) 有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。 2. 试剂污染 PCR 试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被 PCR 核酸模板污染。 3. 现在国外的诊断试剂盒大部分都会将内标直接添加在反应液中与模板一起扩增,但是这样的内标不能监控采样,运输和核酸提取的过程。 核酸提取对照 可以使用内参基因,假病毒混合基质,灭活病毒混合基质来监控提取到扩增的流程。 5. (3) 荧光染料对照 最常使用的是 ROX 染料,由于荧光定量 PCR 的荧光信号在每个样品孔会有微小的差异所以使用特定的 ROX 荧光染料,系统可以根据 ROX 荧光染料的信号值来校准每孔的荧光信号。

    1.5K10发布于 2020-12-03
  • 链霉亲和素-生物素系统在免疫沉淀中的应用 - MedChemExpress

    下述为 2 种方法举例:1)解离生物素化核酸:为了从链霉亲和素磁珠上分离生物素化核酸,在 pH 8.2 的 95% 甲酰胺+ 10 mM EDTA 中孵育磁珠,65°C 孵育 5 分钟或 90°C 孵育 使用磁力架将磁珠吸到试管壁上,将含有生物素化核酸的上清液从试管中取出。2)解离生物素化蛋白质:对于生物素化蛋白质,则可在 0.1% SDS 或 SDS-PAGE 缓冲液中煮沸磁珠 3 分钟。 链霉亲和素可以与多种荧光染料/报告标签结合,同时生物素标记抗体、酶的标记率高且不影响蛋白的活性,因此链霉亲和素-生物素系统可用于几乎所有的免疫测定实验。 除 Vari Fluor 488-Streptavidin 外,MCE 还可以提供多种 Vari Fluor 染料标记的链霉亲和素。 这些 Vari Fluor 染料的发射光谱覆盖整个可见光和近红外光,在多色标记实验中能够很容易地进入细胞核和胞质结构并标记靶蛋白,进行成像和分析。参考文献:[1] Bide Tong, et al.

    1.8K00编辑于 2024-01-18
  • 来自专栏蛋蛋编程手记

    核酸地图遇到的困难

    通过政务网站能拿到核酸检测点的信息,但是这个信息目前还只是位置名称,我最终需要的是这个点位的经纬度信息。 这里我是通过腾讯云地图的api来做的转换。

    45110编辑于 2022-12-12
  • 来自专栏蛋蛋编程手记

    做一个核酸检测地图

    最近南京疫情又紧张了,现在乘坐公共交通,上班进公司园区都需要48小时的核酸检测报告,所以每天要时刻关注核酸检测点相关信息。 于是我想,要是能有一款软件能够一下子把周边的核酸检测地点展示在地图上,那不是很方便大家做核酸检测么。

    29020编辑于 2022-12-12
  • 来自专栏ImportSource

    成都核酸系统崩溃原因大猜想

    作为一名普通的参与者,9月2日下午我是排队排了将近3个小时才成功做了核酸。 首先大家确定是东软开发的这个核酸系统,并且是9月1日切换到这个新的核酸系统,至于为什么从老的省系统切换到新的东软的这个系统咱也搞不清楚。 2119万人口,我们假定一个小区2119人,每个小区有一个核酸检测点,那么就是1万个核酸检测点,也就可以认为东软这个核酸系统最高并发量约为1万。划重点,最高并发量为:1万。 那东软这个核酸系统有没有这样调整呢?不得而知。所以nginx出现瓶颈是可能的。 数据库 我们猜想这个核酸系统用的就是mysql,并且极有可能是单库单表。

    1.5K20编辑于 2022-11-11
  • 来自专栏编程技术宇宙

    到处都要核酸,干脆搞这个!

    今年情况大家都懂得,到处都是要核酸,就懒得跑了,趁着假期多看点书吧。 最近又在研读操作系统方面的东西,回顾了我从一开始学习操作系统至今的整个历程,大致分为了几个阶段: 1、是什么?

    47420编辑于 2022-05-17
  • 来自专栏程序猿石头

    核酸“混检”流程能优化吗?

    估计大家都有做过核酸检测吧?我也做过好多次。 我参加到的检测流程基本是这样: 医院挂号缴费,然后排队,领个管儿,再排队,然后到“全副武装”的护士那里,用棉签捅一捅喉咙,放到你领的管儿里面。 这种,基本上都是一个人采样(所谓的“单采单检”),用一份核酸检测的试剂进行检查。 全员核酸 不知道你有没有参与过大规模的核算检测。 大规模核算是这样的吗?比如全员核酸? 假设不考虑核酸检测实操过程中的困难,比如每人采样后,可以直接将标本进行拆分(不考虑采样标本被稀释,从而影响结果等等),标号分组等工序。 是否能设计一种类似的方案,排列组合一下,拆分,尽量用较少的核酸检测试剂,较少的次数,来确定到底谁中招?

    92520发布于 2021-09-24
  • 来自专栏让技术和时代并行

    性能调优|成都核酸系统篇

    先来吃个瓜,最近成都核酸检测系统挂了,发文称经受了上海每小时600w次峰值考验,算下来QPS不足1700,看到这文章就是在找骂,吃瓜群众不要急着骂人,因为这文章压根就不是写给你们这些技术专家看的。

    94420编辑于 2023-03-18
  • 来自专栏亨利笔记

    香港做核酸指南(2023.2.更新)

    自香港、澳门入境内地的人员,如7天内无外国和其他境外地区旅居史,无需核酸阴性结果入境;如7天内有外国和其他境外地区旅居史,需48小时内的染核酸阴性证明才可入境。 从2月6日起,内地和港澳居民从香港入境中国内地,无需提供核酸检测阴性结果。如果是从海外入境香港停留,并于7日内前往内地的旅客,需要提供 48 小时内的电子版或纸版的核酸检测阴性结果。 本文说说在香港做核酸的流程和注意事项。 旅客在香港如果需要做核酸检测,可去社区中心做出行核酸检测。提前预约检测时间,需要留一个手机号码,检测现场会收一条短信确认手机的正确性,以便通知检测结果。 注意,社区中心有免费的核酸检测,只提供短信检测结果,不出具核酸报告,不能作为出行使用,预约时应选择用于出行的自费检测(上图)。 香港社区检测中心 香港计算时间从采样时间算起,因此旅客需要计划好做核酸的时间。例如,打算周五上午过境(乘车或乘机等),核酸检测应在周三中午之后进行。

    89660编辑于 2023-04-04
  • 来自专栏腾讯专有云

    核酸检测3秒背后的故事

    从不明病毒爆发,到武汉封城,再到现在防疫常态化,大规模核酸检测成为我们重要的防疫利器,而核酸检测系统的稳健和性能直接影响人们的工作和生活。 健康码崩溃! 冬季气温降低,更有利于病毒传播。 2021年冬季,各地爆发疫情,迅速开展全民核酸检测。集中时间、地区的大规模核酸检测,导致高并发请求,极大考验了现有的核酸检测系统。 医疗防疫通 12月23日,腾讯配合某省上线全员核酸检测系统并持续优化,支持全省多地市至少 4 轮的大规模核酸检测工作开展,实现居民打开微信即点即用,支持超 800W 人的用户申报及核酸检测。 防疫通在 现场上线前,尤其针对大规模核酸检测这种场景,需要做严格的性能压测,数据库连接数被打满的问题正常是可以提前发现的。 为了满足 500 万人口的城市核酸检测系统的稳定性,客户提出了系统架构设计上要有冗余,架构要能撑得住 1000万人的核酸检测,客户压测团队通过模拟 三地约1000万常住人口在1至2天内的核酸检测,来摸底系统性能是否达标

    1.6K10编辑于 2022-06-24
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