在chip_seq数据分析中,通常会对peak区域在基因组上的分布进行探究,查看其分布是否存在规律,比如是否在转录起始位点,或者转录终止位点附近存在富集,此时我们可以通过deeptools这个工具来实现
而deeptools中的bamCoverage可以方便的实现这个功能。 ? 1. 安装 conda或者pip安装: conda install -c bioconda deeptools # 或者 pip install deeptools github源代码安装: git clone https://github.com/deeptools/deepTools.git wget https://github.com/deeptools/deepTools/archive/1.5.12 .tar.gz tar -xzvf python setup.py install --prefix /User/Tools/deepTools2.0 一定要注意一下的依赖包必须满足要求: ?
在deeptools中,提供了多种归一化方式 1. (per bin) = number of reads per bin / (number of mapped reads (in millions) * bin length (kb)) 用法如下 deeptools CPM CPM的公式如下 CPM (per bin) = number of reads per bin / number of mapped reads (in millions) 用法如下 deeptools BPM BPM的公式如下 BPM (per bin) = number of reads per bin / sum of all reads per bin (in millions) 用法如下 deeptools coverage scaling factor = (total number of mapped reads * fragment length) / effective genome size 用法如下 deeptools
deeptools是一款非常好用的工具,提供了很多有用的功能,本文主要介绍如何使用deeptools来计算样本间的相关性,并进行可视化,主要分为以下两个步骤 1. 通常通过样本的表达谱来计算样本间的相关性,对于chip-seq等没有明确定量结果的数据,通常的策略是将基因组划分为等长的区间,称之为bin, 计算每个区间内的覆盖度,然后通过比较不同样本间的覆盖度来计算样本相关性,借助deeptools 通过deepTools,可以很方便的对生物学重复的一致性进行评估。 ·end· —如果喜欢,快分享给你的朋友们吧— 扫描关注微信号,更多精彩内容等着你!
下面是100个lncRNA组装流程的软件的笔记教程 bamCoverage是deeptools下的一个工具,主要用于BAM转换为bigWig deeptools是基于Python开发的一套工具,用于处理诸如 工具主要用途: - BAM和bigWig文件处理 - 质量控制 - 热图和其他描述性作图 - 其他 一、软件安装 使用conda安装 conda install deeptools 二、bamCoverage filterRNAstrand {forward, reverse}: 仅统计指定正链或负链 --region/-r CHR:START:END: 选取某个区域统计 #为了其他结果进行比较,还需要进行标准化,deeptools
deeptools可视化多样本分析使用multiBamSummary、plotCorrelation和plotPCA三个模块。 /deeptools/treat_results.npz -o . /deeptools/treat_results.npz -o . /deeptools/treat_results.npz -o . /deeptools/pca.pdfmultiBamSummary: 这是 deepTools 提供的一个工具,用于计算多个 BAM 文件的 reads 覆盖情况。
bigwigCompare是Deeptools组件中的一个,可以(通过比对上的reads)比较两个bigWig文件的差别。 工具说明:https://deeptools.readthedocs.io/en/develop/content/tools/bigwigCompare.html
我们可以通过使用 deeptools 将全基因组分成若干个 xx bin 长度的区间。 不合并样本,检测样本相关性 在 linux 环境下得到矩阵(也可以出图,但是我们一般是只要数据,图自己画) # https://deeptools.readthedocs.io/en/develop/content /tools/multiBigwigSummary.html # https://deeptools.readthedocs.io/en/develop/content/tools/plotCorrelation.html
【直播】我的基因组 35:bam格式转化为bw格式看测序深度分布 我这里会采用deeptools这个软件来探究测序数据关于各种genomic feature的profile和heatmap,安装deeptools
使用的工具包括bowtie2、samtools和deepTools。bowtie2的索引文件位于“../data/indx/bowtie2_whole_genome/”文件夹中,前缀为“hg38”。 Tools to use: bowtie2, samtools, and deepTools. The index for bowtie2 is in the folder “.. $FASTQ2 | samtools sort -@ $CPUS -o ENCFF000AVS_10m.bam # Convert BAM files to bigWig format using deepTools
Format :http://genome.ucsc.edu/goldenPath/help/bedgraph.html 这3种文件格式都是UCSC规定的,所以它提供了系列工具进行互相转换, 我这里用deeptools bamCoverage -b P_jmzeng.filter.rmdup.realgn.bam -o P_jmzeng.filter.rmdup.realgn.bw 关于这个软件的用法及安装方法,见我博客:deeptools
deeptools就是采用了上述策略,用法如下 ? 相比deeptools,在计算coverage的过程中进行了归一化,核心代码如下 ? 归一化之后,绘制的分布图曲线更加的平滑。
chip_seq通过抗体来富集基因组上的部分区域,抗体富集的效果直接绝对了实验的成败, 借助deeptools中的plotFringerprint命令,可以有效评估和查看抗体富集效果。 那么一个好的抗体处理结果应该是什么样子呢,在deeptools的官网上给了示例 ?
为此,将利用 deepTools 软件包中的 computeMatrix 和 plotHeatmap 函数来绘制热图。 先生成一个新的 bed 文件,把中点信息放在第六列,然后使用 deeptools 来进行热图可视化。
Tools to use: bowtie2, samtools, and deepTools. The index for bowtie2 is in the folder “.. Tools to use: bowtie2, samtools, and deepTools. The index for bowtie2 is in the folder “..
这个环境下面 conda install -y sra-tools conda install -y trim-galore samtools bedtools conda install -y deeptools 首先把bam文件转为bw文件,详情:http://www.bio-info-trainee.com/1815.html cd ~/project/atac/deeptools_result #source activate atac # 由于原本电脑存在deeptools所以就没必要激活了 #ls *.bam |xargs -i samtools index {} ls *last.bam |while 查看基因body的信号强度,创建07_deeptools_Body.sh #source activate atac mkdir Body cd ~/project/atac/Body computeMatrix scale-regions -p 15 \ -R ~/project/atac/mm10_Refgene/Refseq.bed \ -S ~/project/atac/deeptools_result
Tools to use: bowtie2, samtools, and deepTools. The index for bowtie2 is in the folder “.. Tools to use: bowtie2, samtools, and deepTools. The index for bowtie2 is in the folder “..
TCGA, ICGC) ICGC数据库使用 TCGA数据库在线使用 下面步入正题,这套流程从ChIP-实验、测序注意事项、测序深度,到分析整体流程,再到每一步如序列比对,富集效率评估、热图、峰图可视化,deeptools2
peak calling的核心是比较input和抗体处理样本基因组区域测序深度分布的差异,所以样本的测序深度分布可以作为质控的一个标准,本文介绍如何通过deeptools来绘制样本测序深度分布图。
可以参照如下网站: https://deeptools.readthedocs.io/en/develop/content/feature/effectiveGenomeSize.html 该网站上计算好了常见基因组的有效大小