- 综合排序
- 最热优先
- 最新优先
- 来自专栏生命科学
细胞转染小秘籍 | MedChemExpress
先前小 M 已经介绍过各种转染方法的优缺点了 (见 “六合心法” 有三式~)，在传统的转染方法 (如磷酸钙法、电穿孔法、病毒法等) 转染效率低、细胞毒性大、重复性差的情况下，以 Lipo3000 为主的阳离子脂质体转染试剂脱颖而出 想要高效又价美的转染试剂吗？ 但对于一些难转染细胞，建议刚开始转染前使用无血清培养基，至少转染一小时后再换成有血清培养基。小白: 那培养基中含有抗生素会对细胞转染有影响吗？小M: 可添加抗生素。 如有必要，可在 1:1-1:5 的范围内调整以优化转染效果。最佳转染条件因不同的细胞类型和培养条件而有所区别，转染前，可做预实验摸索最佳转染比例。 小M: 此外，除了转染质粒 DNA，我们的转染试剂也适用于 RNA 转染~小白: 那可以同时转染两个质粒吗？小M: 当然也可以啦！
47610编辑于 2023-02-15 ZETA life转染试剂助力揭示lncRNA Gm28309在RAW264.7和THP-1巨噬细胞中调控布鲁氏菌炎症反应的ceRNA机制
ZETA life转染试剂（AD600150）的应用 转染细胞及基因： • RAW264.7细胞（小鼠巨噬细胞系）： ◦ 转染基因：lncRNA Gm28309过表达质粒（Gm28309-pcDNA3.1 • THP-1细胞（人单核细胞系，经PMA诱导为巨噬细胞）： ◦ 转染基因：siRNA靶向候选lncRNAs（如P33714、P3852等）。 4. 转染实验数据及解读 具体实验数据： 1. ◦ 解读：ZETA life试剂高效递送Gm28309质粒，验证了其对炎症的负调控作用。 2. RAW264.7转染miR-3068-5p mimic（图5C, 5D）： ◦ 结果：miR-3068-5p过表达降低kB-Ras2（NF-κB抑制因子）的荧光素酶活性，激活炎症通路。 ◦ 解读：试剂高效转染miRNA，揭示ceRNA调控机制。 ZETA life试剂的贡献： • 高转染效率确保基因操作（过表达/敲低）的可靠性，支撑了全文分子机制验证。
33010编辑于 2025-05-23纳米快递员已上线! LNP 精准投递_MedChemExpress(MCE 中国)
细胞转染不顺利？基因递送总是失败？别担心！ MCE LNP 试剂盒：纳米级解决方案，细胞顺利签收• 精准投递，细胞无可拒签：LNP 特有的跨膜转运及逃逸机制，实现 RNA 的高效递送；• “零”暴力拆箱：温和转染，微量样品的包封率 > 80%，递送效率高 HY-K2018 OptiLNP RNA Transfection Reagent• mRNA 转染-转染性能更优异 (24 孔板, 0.5 μg eGFP mRNA 转染 24 h 后荧光拍摄)• siRNA 转染-基因沉默效率更优异 (30 nM CY3 标记的 siRNA，转染后 6 h 进行荧光拍摄)HY-K2022 In vivo OptiLNP RNA Transfection Reagent 未来，LNP 技术将帮助我们继续功课更多科学难题，迎接一个更加精准、高效的科研时代！
59310编辑于 2025-06-25- 来自专栏生命科学
细胞转染、重组蛋白、荧光素酶检测试剂盒实验 | MedChemExpress
(PolyFast Transfection Reagent) 细胞转染主要将 DNA/RNA 导入真核细胞；转染方法五花八门，常见的转染方法可分为化学法、物理法和生物法。 先了解一下常见的几项转染技术 不同转染技术都有各自明显的优缺点，是不是不知道该怎么选择啦？告诉你一个绝招吧！ 相关产品 PolyFast Transfection Reagent 高效低毒、操作简便、重复性好的转染试剂盒。可高效地对 DNA、RNA进行转染。 对多种常见细胞具有高水平转染效率，对原代细胞和难转染细胞也具有较好的效果 Anti-Flag Affinity Gel 是一种纯化的小鼠 IgG2b 单克隆抗体，共价连接琼脂糖 Sepharose 4B 可用于大肠杆菌、酵母、昆虫和哺乳动物表达系统中表达的Flag标记蛋白的高效纯化或免疫沉淀 (IP)。
46910编辑于 2023-03-03 NK+HEK293细胞双杀！AD600150玩转Trim28-Eomes互作实验
ZETA life转染试剂（AD600150）在实验中的应用转染试剂型号：Advanced DNA RNA Transfection Reagent（货号：AD600150）转染细胞及基因：• 原代小鼠 NK细胞：转染Eomes过表达质粒（用于验证Eomes对DX5表达的挽救效应）。 ◦ 转染HA-Trim28和Myc-Eomes（研究Trim28介导的Eomes泛素化降解）。 ◦ 转染siRNA靶向Trim28（验证Trim28对Eomes蛋白水平的调控）。4. 转染实验数据及贡献分析实验数据定位1. 原代NK细胞转染Eomes（Fig.5E）： ◦ 实验内容：通过转染Eomes过表达质粒，恢复gp96缺陷型NK细胞中DX5的表达。 5.转染试剂的核心贡献• 高效递送能力：成功转染难转染的原代NK细胞（转染效率>60%），为功能挽救实验提供技术保障。
20810编辑于 2025-05-27- 来自专栏转染
LONZA 4D核转技术--查找适合自己实验的程序
（RNPs）或蛋白质引入细胞以改变其基因组成或功能——这一过程称为转染——在许多生命科学应用中是必不可少的。 目前存在多种转染方法，选择合适的方法取决于其是否适合您的特定需求。之前使用过 电转和脂质体转染。 1.电转对细胞损伤大，也需要足够量的细胞基数，不适用于微量细胞；2.脂质体转染主要适用于贴壁细胞，原代悬浮细胞不适用。LONZA 4D核转技术相对而言更适用于原代悬浮细胞。 Nucleofector®技术是一种改进的电穿孔方法，能够高效转染原代细胞，干细胞，神经元和细胞系。 关于敲除程序的选择，可以在LONZA官网查找LONZA官网给出了很多转染技术以及不同细胞类型的转染具体信息，可参考下面的网址Knowledge Center | Lonza例如DC细胞的转染protocol
32910编辑于 2024-12-02 - 来自专栏生命科学
实验操作 | 质粒构建、转化、提取、鉴定、转染、测定（完整版）| MedChemExpress (MCE)
(2) 阴性对照组 (NC)：SH-SY5Y 细胞转染阴性对照质粒。 (3) 过表达组 (PC)：SH-SY5Y 细胞转染过表达质粒。 3转染细胞铺板 24 h 后，按照 Lipofectamine 说明书用其进行转染。 转染 48 h 后，荧光显微镜下观察其 GFP 的表达情况及统计其转染效率 (对明场及暗场荧光细胞计数，得：转染效率 = 暗场荧光细胞个数 / 明场细胞个数；也可通过流式等观察统计其转染情况)。 结果显示，阴性对照组和 Parkin 过表达组细胞内可观察到较多的绿色荧光蛋白表达，而正常组细胞没有观察到，则质粒成功转染至细胞内。图 5. 转染后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达[1]。A. 转染后 SH-SY5Y 细胞内 Parkin mRNA 表达情况：RT-PCR 结果显示，Parkin 过表达质粒转染后，正常对照组与阴性对照组的 Parkin-mRNA 水平没有明显差异 (P>0.05
1.8K10编辑于 2024-06-28 【辰辉创聚生物】科研人必知：293F与HEK293细胞在蛋白表达中的不同“超能力”
无论是基础研究所需的信号通路蛋白、结构生物学研究所需的膜蛋白，还是抗体、疫苗、酶类等应用型蛋白药物，背后都离不开一个高效、稳定的蛋白表达系统。 高转染效率：尤其是在脂质体转染、电转或PEI转染方法中，HEK293表现出显著优势。广泛的适用性：无论是瞬时表达还是稳定细胞系的构建，HEK293都能胜任。 瞬时高效表达：利用293F进行瞬时转染，可在数天内获得大量目标蛋白，非常适合快速实验验证与中试。293F在应用中的优势抗体生产：由于悬浮培养和人源修饰的双重优势，293F常用于小规模抗体制备。 转染方法选择：PEI转染在293F中常用，成本低且效率高。稳定细胞系构建：在需要长期表达的场景下，可考虑在HEK293中构建稳定株，再移植到悬浮培养体系。 HEK293与293F细胞，一个以简便、高效见长，一个以产量与应用为核心，各自拥有不同的“超能力”。
48410编辑于 2025-09-23【辰辉创聚生物】稳定细胞系构建｜蛋白表达细胞株｜高表达细胞株
在构建过程中，选择合适的宿主细胞、表达载体设计、转染方法、筛选单克隆细胞株及表达优化，是保证蛋白表达细胞系质量的关键步骤。 2. 表达载体通常设计为双基因表达系统，确保轻链与重链同步表达，搭配强启动子和筛选标记，提高转染效率及筛选成功率。 4. 转染与筛选技术 转染技术主要分为瞬时转染和稳定转染两类。 稳定转染通过抗性药物筛选，获得持续表达的细胞株。筛选阶段重点在于利用药物筛选结合单克隆挑选，确保获得单克隆细胞株。 现代技术结合自动化筛选平台，加速高效筛选高表达细胞株，显著提升筛选效率与表达水平。 通过科学的流程设计与先进技术手段，可高效获得符合需求的蛋白表达细胞系和高表达细胞株构建方案，助力生命科学研究和产业应用。 常见问题FAQ Q1：什么是稳定细胞系构建？ Q5：转染稳定细胞株有哪些常用方法？ A:常见方法包括脂质体转染、电穿孔及病毒介导转染等。
38510编辑于 2025-09-18circ-0008102过表达与敲低：ZETA life转染试剂在K562细胞中的应用
ZETA life Advanced DNA RNA转染试剂（货号：AD600150）的应用 • 转染细胞：K562细胞（人慢性髓系白血病细胞系）。 • 转染基因： ◦circ-0008102过表达载体（circ-0008102 overexpression vector） ◦circ-0008102 siRNA（si-circ-0008102 转染实验数据及解读 • 实验数据来源： ◦Supplementary Fig. S1：circ-0008102过表达或敲低对γ-珠蛋白mRNA表达的调控（P<0.05）。 • 数据解读： ◦ZETA life转染试剂高效递送circ-0008102载体和siRNA至K562细胞，验证了circ-0008102通过调控γ-珠蛋白和miRNAs参与β-thal的分子机制 ◦转染效率高，数据重复性好，支持了circ-0008102作为生物标志物的结论。 • 主要贡献： ◦为circ-0008102功能研究提供可靠的基因操作工具。
18500编辑于 2025-05-23【辰辉创聚生物】哺乳动物瞬时蛋白表达|CHO细胞蛋白表达|HEK293细胞蛋白表达
相比于稳定表达系统，TGE省略克隆筛选等冗长步骤，具备快速、高效的优点，尤其适用于早期药物研发、抗体表达、新型抗原生产等应用场景。 宿主细胞系HEK293 系列细胞蛋白表达系统：如 HEK293E、293T、293F 等，该细胞易于转染、增殖快、可适应无血清悬浮培养体系，转染效率高。 转染方法与试剂在 TGE 中，非病毒转染方法被广泛采用，其中聚乙烯亚胺（PEI）因价格低廉和操作简便而成为首选。脂质体试剂也能提供较高的转染效率，但成本相对较高。 对于难以转染的细胞，电穿孔和其他物理方法可以作为补充。在一些特定情况下，病毒载体（如腺病毒、杆状病毒）也被用于辅助转染，以提高转染效率和基因导入量。4. BacMam 系统利用杆状病毒作为载体，可以高效将基因导入哺乳动物细胞，并实现较高水平的瞬时表达。该系统具有对多种细胞类型高度兼容的特点，并能够实现多基因同时表达，适用于复杂蛋白或多亚基复合物的研究。
43410编辑于 2025-09-10【辰辉创聚生物】稳定细胞系构建 | 稳定株开发服务 | 高表达克隆筛选
构建稳定细胞系的核心环节包括外源基因载体构建、有效转染、筛选与克隆扩增、表达持续性验证等步骤。1. 外源基因载体的基本设计与核心元件稳定表达的实现，首先依赖于外源基因载体设计的合理性。 高效转染是构建的技术基础为了将上述构建好的载体引入宿主细胞，科研上广泛采用高效转染方法。 常用的转染技术包括：化学法：基于阳离子脂质体等试剂（如 Lipofectamine 系列）与DNA复合，从而被细胞摄取。 病毒载体：慢病毒、腺相关病毒等载体可实现基因的高效整合表达。转染效率直接影响稳定细胞系构建的效率和质量，因此在转染环节选择适合的方案、适宜的转染试剂是关键。3. 抗性筛选与单克隆挑选转染后细胞通常是多种状态混合群体，其中只有一部分细胞完成了外源基因的整合。为了获得高纯度的稳定表达群体，需要进行抗性筛选与单细胞克隆扩增。
11400编辑于 2026-01-26【辰辉创聚生物】CHOHEK293抗体表达平台｜高效哺乳动物细胞表达｜快速重组抗体生产
瞬时转染技术的优势瞬时转染是快速表达重组抗体的常用方法。通过把抗体基因片段导入细胞，不用建立稳定株，就能在几天内获得大量蛋白。这对于抗体快速表达和功能验证很有帮助。 尽管表达时间短，但如果优化转染条件，依然可以获得不错的产量。稳定细胞株构建相比瞬时转染，稳定细胞株构建更适合长期抗体生产。过程包括载体整合、筛选单克隆细胞、表达验证等。 抗体开发平台通常把筛选、表达、纯化整合起来，让抗体从基因到成品的过程更高效。 抗体表达平台依托CHO和HEK293等哺乳动物细胞表达系统，结合瞬时转染和稳定细胞株构建技术，可以满足从抗体快速表达到大规模生产的不同需求。 Q2: 瞬时转染技术如何保证抗体快速表达的效率？A: 瞬时转染通过优化转染试剂、质粒载体设计及细胞状态，最大化表达效率。虽然表达时间短（通常数天），但可快速获得高水平抗体，适合筛选和早期实验。
38800编辑于 2025-08-06【辰辉创聚生物】基因过表达细胞系 | 稳定过表达开发 | 高表达克隆筛选
外源基因引入与高效转染将构建完成的过表达系统引入宿主细胞，是实现基因过表达的首要步骤。科研实验中，高效转染是确保足够比例细胞获得外源基因的技术前提。 常见的转染方式包括：脂质体介导转染：通过阳离子脂质体与核酸形成复合物，被细胞吞噬后释放至胞内；电穿孔法：利用短暂电脉冲在细胞膜上形成可逆孔洞，使DNA直接进入细胞；病毒介导转导：借助病毒载体将目的基因高效导入细胞并实现基因组整合 在这些技术中，转染试剂的选择和使用对转染效率、细胞状态以及后续筛选效果具有直接影响，是过表达细胞系构建中不可忽视的技术环节。3. 其基本原理是：外源表达单元中包含抗性基因；转染后向培养体系中加入对应抗生素；未成功整合外源序列的细胞因缺乏抗性而被淘汰；存活细胞群体即为候选过表达细胞群。
10110编辑于 2026-02-03稳定细胞系构建原理与流程解析
一、稳定细胞系的基本原理稳定细胞系的核心是基因的基因组整合：基因组整合目标基因通过各种方法插入宿主细胞的染色体中，而不是停留在细胞质内（如瞬时转染）。 避免了瞬时转染中蛋白表达随时间衰减的问题。二、稳定细胞系构建的流程稳定细胞系的开发一般包括以下几个核心环节：1. 设计与载体构建目标基因优化：提高翻译效率，添加信号肽和标签。 基因递送与整合转染/转导方法：化学转染：适用于多数易转染细胞电穿孔：适合难转染或悬浮细胞病毒载体（慢病毒、腺病毒等）：高效率，适合非分裂细胞整合方式：随机整合：快速，但表达水平受染色体位置影响位点特异性整合
11910编辑于 2026-01-14- 来自专栏芒果先生聊生信
HEK293细胞系，最全总结
293T细胞容易转染，用磷酸钙、PEI或脂质体转染，效率均可达90%以上。除用于基因表达及蛋白生产外，还用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。 ? 293T/17细胞是293T细胞中共转染pBND和pZAP质粒而获得的具有G418耐受的细胞系。该细胞系仍保留高转染效率的特点。 293H细胞是293细胞驯化后得到的、能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。该细胞系贴附牢固，主要用于噬菌斑检测等。 293SG是293S细胞用甲基磺酸乙酯诱变处理，蓖麻毒素选择后再转染pcDNA6/TR质粒得到耐受蓖麻毒素的细胞系。 293SGGD细胞系是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系，其主要用于糖基化工程研究中。
7.4K20发布于 2020-08-28 【辰辉创聚生物】CHO/HEK293细胞重组蛋白表达｜哺乳动物蛋白表达系统｜蛋白表达技术指南
技术上，CHO细胞系支持大规模悬浮培养和高细胞密度扩增，配合高效转染方法，可为科研用途提供毫克至克级别的蛋白产量，同时维持一致的翻译后修饰谱。 在瞬时转染模式下，HEK293细胞可在数天内表达大量重组蛋白，适合快速筛选表达构建体或评估功能。 表达载体需包含强启动子、适合宿主细胞的调控序列以确保高效转录与翻译。 表达体系的配套试剂还包括高效的转染试剂（如PEI、脂质体类转染介质）、无血清培养基、抗生素筛选剂等，它们共同构成了完整的哺乳动物蛋白表达工具包。 科研实验中，结合高效表达策略与可靠的表达载体设计，可显著提升目的蛋白的表达水平和可重复性，从而为下游蛋白纯化和定量分析奠定基础。
18610编辑于 2026-01-29【辰辉创聚生物】一文读懂基因过表达细胞系基因 | 过表达细胞系构建全流程解析 | 稳定转染技术 | 载体设计优化
转染前24小时将细胞以适宜密度接种，确保转染时细胞处于对数生长期，达到最佳转染效率。基因导入与筛选流程转染技术选择与优化根据细胞类型和研究需求，可选择脂质体转染、电穿孔或病毒转导等方法。 脂质体转染适用于大多数贴壁细胞，操作简便但转染效率因细胞类型而异。电穿孔技术对悬浮细胞和难转染细胞系效果显著，但需优化电压、脉冲时间等参数。 对于需要高转染效率的应用，慢病毒转导系统提供了一种高效的选择。选择性筛选策略转染48-72小时后开始添加选择压力，抗生素浓度需通过预实验确定。 表达验证与稳定性评估蛋白表达验证采用Western blot技术检测目标蛋白表达，需设立未转染细胞和空载体转染细胞作为阴性对照。对于分泌型蛋白，可使用ELISA法检测培养上清中的蛋白浓度。 通过优化载体设计、改进转染方法和完善筛选策略，该技术的成功率和效率得到显著提升。
20510编辑于 2026-01-16基因过表达细胞系构建与应用全攻略 | 稳定转染技术 | 功能验证方法 | 细胞模型构建 | 蛋白表达优化
相较于瞬时转染，稳定过表达细胞系具有表达稳定性高、细胞群体均质性好、实验结果可重复性强等技术优势，已成为基因功能研究、信号通路解析和药物靶点验证等领域的标准化研究工具。 该技术体系通常包含以下基本元件：表达载体设计要素：启动子系统：CMV、EF-1α等强启动子可驱动目标基因高效转录筛选标记：新霉素抗性（neo）、嘌呤霉素抗性（puro）等基因，用于稳定整合细胞的筛选多克隆位点 第二阶段：细胞转染与筛选选取适宜宿主细胞（如HEK293、CHO或特定细胞系），采用脂质体转染、电穿孔或慢病毒转导等方法导入表达载体。转染48-72小时后，添加相应抗生素进行筛选。 细胞表型分析：增殖速率检测：CCK-8或MTT法细胞周期分析：流式细胞术PI染色凋亡检测：Annexin V/PI双染迁移侵袭能力：Transwell实验技术要点与优化细胞选择考虑因素：转染效率：HEK293 细胞转染效率通常高于其他细胞系蛋白加工能力：CHO细胞适合复杂蛋白的正确折叠和修饰研究背景相关性：选择与研究领域匹配的细胞模型表达水平优化策略：启动子优化：不同细胞系对启动子响应存在差异基因密码子优化：
31110编辑于 2026-01-13【辰辉创聚生物】昆虫蛋白表达|昆虫杆状病毒表达系统|真核蛋白表达|Bac-to-Bac 系统
Bac-to-Bac 系统是该体系中的一种常用工具，通过将目的基因整合入含有整套 AcMNPV 基因组的 Bacmid，在大肠杆菌中构建重组病毒，然后转染昆虫细胞获得重组病毒粒子，最后进行昆虫蛋白表达。 昆虫杆状病毒表达系统类型杆状病毒-昆虫细胞表达系统（BEVS）是最广泛使用的系统，利用重组杆状病毒感染昆虫细胞进行高效表达。 2）转染昆虫细胞（如 Sf9），获得 P1 病毒。3）放大病毒至 P2/P3，用于大规模感染。病毒自由系统直接将重组质粒转染昆虫细胞，无需制备病毒，几天内即可检测蛋白。 6、蛋白表达1）小规模表达测试在 Sf9/Sf21 或 High Five 细胞中感染/转染，检测表达水平。通过 SDS-PAGE / Western blot 确认条带位置和表达量。 随着生命科学和生物制药的发展，对复杂蛋白（尤其是真核蛋白和跨膜蛋白）的高效表达需求不断增加。昆虫细胞因其能够实现复杂翻译后修饰（如糖基化）和较高表达量而成为重要的真核蛋白表达系统。
42310编辑于 2025-08-26
腾讯云开发者
Copyright © 2013 - 2026 Tencent Cloud. All Rights Reserved. 腾讯云 版权所有
深圳市腾讯计算机系统有限公司 ICP备案/许可证号：粤B2-20090059 
粤公网安备44030502008569号
腾讯云计算（北京）有限责任公司 京ICP证150476号 | 京ICP备11018762号