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  • 来自专栏生命科学

    细胞转染、重组蛋白、荧光素酶检测试剂盒实验 | MedChemExpress

    “六合心法”第一式 ‍‍‍‍‍‍‍‍ ■ PolyFast 转染试剂 (PolyFast Transfection Reagent) 细胞转染主要将 DNA/RNA 导入真核细胞;转染方法五花八门,常见的转染方法可分为化学法、物理法和生物法。 先了解一下常见的几项转染技术 不同转染技术都有各自明显的优缺点,是不是不知道该怎么选择啦?告诉你一个绝招吧! “六合心法”第三式 ■ 双荧光素酶报告基因检测试剂盒 (Renilla-Firefly Luciferase Dual Assay Kit) 荧光素酶是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称,可催化荧光素氧化成氧化荧光素 相关产品 PolyFast Transfection Reagent 高效低毒、操作简便、重复性好的转染试剂盒。可高效地对 DNA、RNA进行转染

    47310编辑于 2023-03-03
  • 来自专栏生命科学

    细胞转染小秘籍 | MedChemExpress

    先前小 M 已经介绍过各种转染方法的优缺点了 (见 “六合心法” 有三式~),在传统的转染方法 (如磷酸钙法、电穿孔法、病毒法等) 转染效率低、细胞毒性大、重复性差的情况下,以 Lipo3000 为主的阳离子脂质体转染试剂脱颖而出 稍一不慎,人财两空,哦不,是细胞和试剂都没了,岂是一个惨字了得。想要高效又价美的转染试剂吗? 小白: PolyFast Transfection Reagent 也是属于阳离子脂质体转染试剂吗?小M: 不是哦! PolyFast Transfection Reagent 属于阳离子聚合物转染试剂,在确保高转染效率的同时,对细胞毒性更小!小白: 那可以使用有血清的培养基吗?小M: 可以使用有血清的培养基。 小M: 此外,除了转染质粒 DNA,我们的转染试剂也适用于 RNA 转染~小白: 那可以同时转染两个质粒吗?小M: 当然也可以啦!

    48310编辑于 2023-02-15
  • ZETA life转染试剂助力揭示lncRNA Gm28309在RAW264.7和THP-1巨噬细胞中调控布鲁氏菌炎症反应的ceRNA机制

    ZETA life转染试剂(AD600150)的应用 转染细胞及基因: • RAW264.7细胞(小鼠巨噬细胞系):   ◦ 转染基因:lncRNA Gm28309过表达质粒(Gm28309-pcDNA3.1 • THP-1细胞(人单核细胞系,经PMA诱导为巨噬细胞):   ◦ 转染基因:siRNA靶向候选lncRNAs(如P33714、P3852等)。 4. 转染实验数据及解读 具体实验数据: 1. ◦ 解读:ZETA life试剂高效递送Gm28309质粒,验证了其对炎症的负调控作用。 2. ◦ 解读:试剂成功递送siRNA,证明lncRNA在炎症中的关键角色。 3. ◦ 解读:试剂高效转染miRNA,揭示ceRNA调控机制。 ZETA life试剂的贡献: • 高转染效率确保基因操作(过表达/敲低)的可靠性,支撑了全文分子机制验证。

    33710编辑于 2025-05-23
  • circ-0008102过表达与敲低:ZETA life转染试剂在K562细胞中的应用

    ZETA life Advanced DNA RNA转染试剂(货号:AD600150)的应用   • 转染细胞:K562细胞(人慢性髓系白血病细胞系)。   • 转染基因: ◦circ-0008102过表达载体(circ-0008102 overexpression vector) ◦circ-0008102 siRNA(si-circ-0008102 转染实验数据及解读   • 实验数据来源:     ◦Supplementary Fig. S1:circ-0008102过表达或敲低对γ-珠蛋白mRNA表达的调控(P<0.05)。 • 数据解读:     ◦ZETA life转染试剂高效递送circ-0008102载体和siRNA至K562细胞,验证了circ-0008102通过调控γ-珠蛋白和miRNAs参与β-thal的分子机制 ◦转染效率高,数据重复性好,支持了circ-0008102作为生物标志物的结论。   • 主要贡献:     ◦为circ-0008102功能研究提供可靠的基因操作工具。    

    19200编辑于 2025-05-23
  • NK+HEK293细胞双杀!AD600150玩转Trim28-Eomes互作实验

    ZETA life转染试剂(AD600150)在实验中的应用转染试剂型号:Advanced DNA RNA Transfection Reagent(货号:AD600150)转染细胞及基因:• 原代小鼠 NK细胞:转染Eomes过表达质粒(用于验证Eomes对DX5表达的挽救效应)。 ◦ 转染HA-Trim28和Myc-Eomes(研究Trim28介导的Eomes泛素化降解)。  ◦ 转染siRNA靶向Trim28(验证Trim28对Eomes蛋白水平的调控)。4. 转染实验数据及贡献分析实验数据定位1. 原代NK细胞转染Eomes(Fig.5E): ◦ 实验内容:通过转染Eomes过表达质粒,恢复gp96缺陷型NK细胞中DX5的表达。  5.转染试剂的核心贡献• 高效递送能力:成功转染转染的原代NK细胞(转染效率>60%),为功能挽救实验提供技术保障。

    21210编辑于 2025-05-27
  • 【辰辉创聚生物】CHO/HEK293细胞重组蛋白表达|哺乳动物蛋白表达系统|蛋白表达技术指南

    技术上,CHO细胞系支持大规模悬浮培养和高细胞密度扩增,配合高效转染方法,可为科研用途提供毫克至克级别的蛋白产量,同时维持一致的翻译后修饰谱。 HEK293细胞系:快速表达与人源化修饰的优势相比之下,HEK293细胞系是源自人胚肾组织的宿主细胞,其高水平的瞬时转染效率和较短的表达周期使其在科研快速验证阶段非常受欢迎。 在瞬时转染模式下,HEK293细胞可在数天内表达大量重组蛋白,适合快速筛选表达构建体或评估功能。 表达体系的配套试剂还包括高效的转染试剂(如PEI、脂质体类转染介质)、无血清培养基、抗生素筛选剂等,它们共同构成了完整的哺乳动物蛋白表达工具包。 通过合理选择表达策略、表达载体及配套试剂,并结合现代蛋白纯化和定量分析技术,这些体系能够持续为科研提供高质量的重组蛋白试剂支持。

    19310编辑于 2026-01-29
  • 纳米快递员已上线! LNP 精准投递_MedChemExpress(MCE 中国)

    细胞转染不顺利?基因递送总是失败?别担心! Section.02LNP 试剂盒为何如此抢手? MCE LNP 试剂盒:纳米级解决方案,细胞顺利签收• 精准投递,细胞无可拒签:LNP 特有的跨膜转运及逃逸机制,实现 RNA 的高效递送;• “零”暴力拆箱:温和转染,微量样品的包封率 > 80%,递送效率高 传统转染 VS MCE LNP 试剂盒投递无忧:用数据说话精准投递不是说说而已——来看实测数据,带你直观感受我们 LNP 试剂盒是如何让细胞“签收率”一路飙升的! HY-K2018 OptiLNP RNA Transfection Reagent• mRNA 转染-转染性能更优异 (24 孔板, 0.5 μg eGFP mRNA 转染 24 h 后荧光拍摄)•

    59710编辑于 2025-06-25
  • 【辰辉创聚生物】稳定细胞系构建 | 稳定株开发服务 | 高表达克隆筛选

    构建稳定细胞系的核心环节包括外源基因载体构建、有效转染、筛选与克隆扩增、表达持续性验证等步骤。1. 外源基因载体的基本设计与核心元件稳定表达的实现,首先依赖于外源基因载体设计的合理性。 高效转染是构建的技术基础为了将上述构建好的载体引入宿主细胞,科研上广泛采用高效转染方法。 常用的转染技术包括:化学法:基于阳离子脂质体等试剂(如 Lipofectamine 系列)与DNA复合,从而被细胞摄取。 转染效率直接影响稳定细胞系构建的效率和质量,因此在转染环节选择适合的方案、适宜的转染试剂是关键。3. 抗性筛选与单克隆挑选转染后细胞通常是多种状态混合群体,其中只有一部分细胞完成了外源基因的整合。 实验中所用的抗体、qPCR 引物探针、Western blot试剂等科研试剂都直接影响数据的准确性,是表达验证的重要组成。5. 细胞培养环境与支持试剂稳定细胞系的建立与维护还依赖于良好的细胞培养环境。

    11900编辑于 2026-01-26
  • 【辰辉创聚生物】哺乳动物瞬时蛋白表达|CHO细胞蛋白表达|HEK293细胞蛋白表达

    宿主细胞系HEK293 系列细胞蛋白表达系统:如 HEK293E、293T、293F 等,该细胞易于转染、增殖快、可适应无血清悬浮培养体系,转染效率高。 转染方法与试剂在 TGE 中,非病毒转染方法被广泛采用,其中聚乙烯亚胺(PEI)因价格低廉和操作简便而成为首选。脂质体试剂也能提供较高的转染效率,但成本相对较高。 对于难以转染的细胞,电穿孔和其他物理方法可以作为补充。在一些特定情况下,病毒载体(如腺病毒、杆状病毒)也被用于辅助转染,以提高转染效率和基因导入量。4. 细胞系工程改造利用 CRISPR/Cas9 工具敲除凋亡相关基因(如 Apaf1),可显著提高 CHO 细胞在转染后的存活率与表达量。 转染工艺和培养流程优化转染时的 DNA/试剂比例、细胞密度、培养基成分等因素均会影响表达效率。通过优化这些工艺参数,可以显著提高产量并改善细胞状态。

    43910编辑于 2025-09-10
  • 来自专栏生命科学

    实验操作 | 质粒构建、转化、提取、鉴定、转染、测定(完整版)| MedChemExpress (MCE)

    小 M 为大家整理了抽提的主要试剂及注意事项,可自行点赞收藏喔~表 2. 提取主要试剂、原理与注意事项。1细胞培养小M已做过细胞培养相关推文 (详见往期推文:实验操作 | 小白第一课! 3转染细胞铺板 24 h 后,按照 Lipofectamine 说明书用其进行转染转染 48 h 后,荧光显微镜下观察其 GFP 的表达情况及统计其转染效率 (对明场及暗场荧光细胞计数,得:转染效率 = 暗场荧光细胞个数 / 明场细胞个数;也可通过流式等观察统计其转染情况)。 MCE 转染1RT-PCR▐ 实时荧光定量 PCR(RT-PCR)检测 EGFP-Parkin mRNA 的表达水平大家可根据购买的试剂盒进行操作,小 M 在下方为大家整理了文献中的操作步骤,供大家参考 文献参考步骤[1]:(1) 蛋白提取、定量及变性:BCA 蛋白定量试剂盒提取蛋白并检测蛋白浓度。

    1.8K11编辑于 2024-06-28
  • 来自专栏芒果先生聊生信

    慢病毒:肿瘤研究的利器

    (来自吉满生物公众号) 常用的293T细胞转染效率就很高,但是大多数细胞转染效率通常比较低。据芒果本人经验,慢病毒在构建过表达、干扰和敲除方面都是效率极高的,甚至可以用于假病毒包装。 CAS9稳转细胞的构建 实验流程 制备慢病毒穿梭质粒及辅助包装质粒,用无内毒素的试剂盒抽提,共转染 293T 细胞,转染后 18小时后更换为完全培养基,培养 48 小时后,收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液 转染体系:pLenti-CAS9-puro,pSPAX2, pMD2G按照4:3:1的比例(2μg,1.5μg和0.5μg)混匀,再与转染试剂混匀加入前天准备好的293T细胞中,钙转或PEI转染,293T 转染18~24小时后,更换为新鲜培养基。 病毒收集:转染后 48 小时收集病毒上清,0.45 μm滤器过滤,2mL EP管中,4℃,3000g/min 离心 5分钟。 第四步,抽提基因组和PCR扩增 完成靶细胞的富集和扩大培养后,抽提细胞基因组,这个市面上有很多试剂盒。接下来实验的关键是要做PCR扩增。模板是抽提得到的基因组,引物是什么呢?

    2K10发布于 2020-08-04
  • 来自专栏转染

    LONZA 4D核转技术--查找适合自己实验的程序

    (RNPs)或蛋白质引入细胞以改变其基因组成或功能——这一过程称为转染——在许多生命科学应用中是必不可少的。 目前存在多种转染方法,选择合适的方法取决于其是否适合您的特定需求。之前使用过 电转和脂质体转染。 Nucleofector®技术是一种改进的电穿孔方法,能够高效转染原代细胞,干细胞,神经元和细胞系。 关于敲除程序的选择,可以在LONZA官网查找LONZA官网给出了很多转染技术以及不同细胞类型的转染具体信息,可参考下面的网址Knowledge Center | Lonza例如DC细胞的转染protocol 此外具体实验的操作步骤,还需要结合自己具体的试剂 和 substrate说明书进行调整或改善。

    34210编辑于 2024-12-02
  • 【辰辉创聚生物】基因过表达细胞系 | 稳定过表达开发 | 高表达克隆筛选

    外源基因引入与高效转染将构建完成的过表达系统引入宿主细胞,是实现基因过表达的首要步骤。科研实验中,高效转染是确保足够比例细胞获得外源基因的技术前提。 常见的转染方式包括:脂质体介导转染:通过阳离子脂质体与核酸形成复合物,被细胞吞噬后释放至胞内;电穿孔法:利用短暂电脉冲在细胞膜上形成可逆孔洞,使DNA直接进入细胞;病毒介导转导:借助病毒载体将目的基因高效导入细胞并实现基因组整合 在这些技术中,转染试剂的选择和使用对转染效率、细胞状态以及后续筛选效果具有直接影响,是过表达细胞系构建中不可忽视的技术环节。3. 其基本原理是:外源表达单元中包含抗性基因;转染后向培养体系中加入对应抗生素;未成功整合外源序列的细胞因缺乏抗性而被淘汰;存活细胞群体即为候选过表达细胞群。 这些检测方法依赖于高质量的抗体、引物、标准品等科研试剂,其性能直接影响数据的重复性与可靠性。6. 细胞培养与支持条件基因过表达细胞系的稳定维持还依赖于适宜的细胞培养环境。

    10710编辑于 2026-02-03
  • ZETA life介导THP-1细胞BAMBI基因调控巨噬细胞极化研究

    ZETA life转染试剂应用: ●    转染细胞:Huh7(肝癌细胞)、THP-1(单核细胞,分化为M0/M1/M2巨噬细胞)。 ●   转染基因:     ◦ Huh7细胞:过表达BAMBI(BAMBI质粒)、敲低BAMBI(shR-BAMBI)。     实验数据与解读:   ● Huh7细胞转染(图4A): ◦ 过表达BAMBI显著上调SLC2A1、PIGQ、PKM、LDHA(糖酵解基因)及SIRT1、ACACA(脂代谢基因);     ◦ 敲低

    27110编辑于 2025-06-16
  • 基于荧光素酶报告基因系统的信号通路与基因转录活性检测

    三、UA-Glo®Bio-lucLuciferaseAssaySystem的技术优势为了确保检测结果的准确性、灵敏度与可重复性,选择合适的检测试剂盒至关重要。 2.稳定性与均一性:试剂设计确保了发光信号的稳定性,有效减少因信号衰减带来的读数误差,并保障了多孔板检测中孔间信号的均一性,提高了数据的可靠性。 3.兼容性与便捷性:该系统与多种细胞裂解方法兼容,操作步骤简便,试剂即用即取,适合自动化工作站操作,能显著提升实验效率。 4.专为双报告基因系统优化:系统设计能够很好地支持双报告基因实验(例如,同时使用萤火虫荧光素酶作为实验报告基因,海肾荧光素酶作为内参对照),便于通过比率法归一化处理,有效校正转染效率差异和细胞活性变化带来的变异 2.细胞转染与处理:将构建好的SCD1启动子报告质粒与作为内参的海肾荧光素酶报告质粒共转染至合适的细胞系(如HepG2细胞)。转染后,用目标化合物(如黄连素)处理细胞。

    20810编辑于 2026-01-30
  • 【辰辉创聚生物】CHO/HEK293抗体表达平台|高效哺乳动物细胞表达|快速重组抗体生产

    HEK293表达系统则更灵活,转染效率高,适合做抗体快速表达和初期筛选。不同细胞系有各自的特点和适用场景,选择合适的哺乳动物细胞表达平台对后续的抗体质量和产量都有重要影响。 瞬时转染技术的优势瞬时转染是快速表达重组抗体的常用方法。通过把抗体基因片段导入细胞,不用建立稳定株,就能在几天内获得大量蛋白。这对于抗体快速表达和功能验证很有帮助。 尽管表达时间短,但如果优化转染条件,依然可以获得不错的产量。稳定细胞株构建相比瞬时转染,稳定细胞株构建更适合长期抗体生产。过程包括载体整合、筛选单克隆细胞、表达验证等。 抗体表达平台依托CHO和HEK293等哺乳动物细胞表达系统,结合瞬时转染和稳定细胞株构建技术,可以满足从抗体快速表达到大规模生产的不同需求。 Q2: 瞬时转染技术如何保证抗体快速表达的效率?A: 瞬时转染通过优化转染试剂、质粒载体设计及细胞状态,最大化表达效率。虽然表达时间短(通常数天),但可快速获得高水平抗体,适合筛选和早期实验。

    39300编辑于 2025-08-06
  • 来自专栏全栈程序员必看

    jasypt 原理_litmp试剂

    引入了jasypt-spring-boot-starter的jar包之后,项目启动的时候,是如何加载jasypt的呢? 这利用的是项目启动类上的一个注解@SpringBootApplication,这个注解中引用了@EnableAutoConfiguration注解。

    67810编辑于 2022-11-09
  • 来自专栏生命科学

    细胞活力检测方法大盘点,CTG 法放大招?- MedChemExpress

    CTG 法检测原理 ■ 案例 1:细胞增殖测定如图 3 所示,为了探究 SIPL1 对 TNBC 细胞增殖的影响,将 SIPL1 表达载体转染至 BT-549 与 MDA-MB-231 细胞, 并使用 CCK-8 检测:TNBC 细胞瞬时转染 shRNA 或过表达质粒并培养 24 h 后检测。CTG 发光细胞活力测定:TNBC 细胞在 37°C 下培养过夜。 结果显示,转染靶向 SIPL1 shRNAs 的 BT-549 和 MDA-MB-231 细胞系的细胞增殖显著降低 (图 3)。 由于整个发光反应非常迅速,建议加入 CTG 试剂孵育 10 分钟后,立即检测荧光。 相关产品Cell Counting Kit-8Cell Counting Kit-8,简称 CCK-8 试剂盒或 CCK8 试剂盒,是一种基于 WST-8 而广泛应用于细胞活性和细胞毒性检测的快速、高灵敏度试剂

    1.4K10编辑于 2023-03-29
  • AbMole细胞实验必备:G-418--构建稳定转染细胞株的关键分子

    G-418(遗传霉素,AbMole,M2719)一种在分子生物学和细胞生物研究中常用且重要的工具分子,多用于细胞转染后的筛选、转基因动植物研究等实验。 AbMole为全球科研客户提供高纯度、高生物活性的抑制剂、细胞因子、人源单抗、天然产物、荧光染料、多肽、靶点蛋白、化合物库、抗生素等科研试剂,全球大量文献专利引用。 在真核细胞转染或者原核转化中,实验人员可以选择Neo基因(编码氨基糖苷磷酸转移酶,APH)作为筛选标记,与目的基因串联一起进行转染/转化。 成功转染的细胞即可获得对 G-418 的抗性。 G418结构式二、G-418用于稳定转染细胞筛选在细胞生物学研究中,稳定转染细胞系的建立是深入研究基因功能、信号通路等的重要手段。

    21410编辑于 2025-12-01
  • 来自专栏生命科学

    Corn oil试剂 玉米油介绍|Corn oil试剂文献参考|MCE

    Corn oil试剂 玉米介绍Corn oil 是从玉米胚芽中提取出来的一种油,可作为活性分子分子的载体;CAS:8001-30-7作为生化试剂,其最主要用途是作为脂溶性化合物的载体。 其多功能性使其横跨生命科学、生物制药、兽医研发等多个领域,成为连接脂 类基础研究与应用开发的关键试剂。 Corn oil 更推荐用于灌胃[4]腹腔内涂抹 Corn oil 会导致局部炎症,同时消耗常驻腹腔巨噬细胞[5]Corn oil试剂文献参考1、Liver-targeted degradation of

    13910编辑于 2025-11-18
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