生信论文的套路 ONCOMINE从全景、亚型两个维度做表达差异分析; 临床标本从蛋白水平确认(或HPA数据库),很重要; Kaplan-Meier Plotter从临床意义的角度阐明其重要性; cBio-portal 数据库做基因组学的分析(机制一); STRING互作和GO/KEGG分析探讨可能的信号通路(机制二); TISIDB/TIMER分析肿瘤免疫特征(机制三)。 差异分析,无论是Oncomine,GEPIA,还是UALCAN、HPA数据库,都不需要R语言编写代码,容易上手,基本上一个星期甚至更短的时间就可以搞定,属于菜鸟级别生信操作。并没有想象中那么难。 生存分析是生信论文中经常出现的表型,也就是说基因在正常和肿瘤组织中表达的差异,与生存率的指标密切相关。如A基因在肿瘤中表达明显上调,生存率显著下降,这就是非常明确的相关性。 生存分析是非常重要的表型,诸多文章均有介绍。这里,我们对生存分析的纯生信数据库进行总结,果友们在选择时也可以作为参考。
生信论文的套路 ONCOMINE从全景、亚型两个维度做表达差异分析; 临床标本从蛋白水平确认(或HPA数据库),很重要; Kaplan-Meier Plotter从临床意义的角度阐明其重要性; cBio-portal 在差异分析的前提下,表型分析成为重点内容,也是可以玩出花样的地方。 生存分析是非常常见的表型分析。与生存分析相比,相关性分析是另外一个常见的表型分析。 免疫浸润分析比生存分析、差异分析和相关性分析难度更大,因为免疫学是不断延伸、拓展的学科,并不断从理论走向应用、临床,兼有科学性和技术性,比如实验中已经普遍应用的免疫印迹(WB),流式分析,免疫组化和免疫荧光等等 生信分析中,有一种算法叫反卷积分析,英文名叫Deconvolution。 生信开发人员可以先通过预设一个优秀的数据训练集(训练集主要包含了每种不同免疫细胞的基因表达特征),然后通过反卷积算法推算出这个整体样本中究竟有哪些免疫细胞。
在上文图形化开放式生信分析系统开发 - 4 生信分析流程的图形化设计 讨论了生信分析pipeline的图形化,如何用图形的方式显示生信pipeline,但是pipeline脚本按照变量的形式保存之后,如何运行 分析过程状态、服务器运行状态,需要由服务器端推送到用户端。 综合考虑,结合软件设计目标,这里选择远程模式 运行服务器节点: 服务器节点信息: 经常手动分析脚本的朋友大家的习惯可能是,ssh远程登录Linux服务器,在shell控制台输入各种脚本,软件。 服务器信息2.png 针对分析流程,按照约定定义了两个变量:${data}数据输入目录,${result}输出目录 考虑到并行运算,这里设置了该账户可以并行运行的任务数量,已经连续运行任务的最小时间间隔 运行完成后服务器端推送信息到控制端,判断是否符合要求,输出文件是否存在 运行失败后服务器端推送信息到控制端,显示错误信息,错误日志,便于生信开发人员查找错误 统计每一个分析步骤的运行时间,便于统计分析
生信分析,无论是Oncomine,GEPIA,还是KM Plotter数据库,都不需要R语言编写代码,容易上手,基本上一个星期甚至更短的时间就可以搞定,属于菜鸟级别生信操作。并没有想象中那么难。 p<0.05就是我们前期做分析想要的结果,即使用GEO数据库、TCGA数据库做分析,甚至做芯片或测序,没有差异也是枉然。 对于医生,个人建议是最好学会R语言,最起码掌握不用R语言的数据库分析。 最重要的是阅读过的文献和做过的生信分析,可以进一步促进对临床上疾病的认识,提升医生的诊治水平。 ? 接下来,我们将按照中心法则和生信论文分析的思路总结生信分析的网站。 这些网站均是纯生信数据库,不需要R语言基础,就像Excel、PPT一样容易上手,只要你愿意学,肯定能学会。 差异分析数据库 oncomine数据库(差异分析首选) https://www.oncomine.org/resource/main.html GEPIA数据库(共表达是特色) http://gepia.cancer-pku.cn
生信技能树学习笔记 Anaconda 的官网是 https://www.anaconda.com/ 官网上介绍anaconda是所有语言的包、依赖和环境管理器。 Conda之间的关系如下 当我们使用服务器分析数据,我们使用miniconda,如果在自己的电脑上使用anaconda。 因为在数据分析过程中我们要使用很多种软件,软件安装中会遇到各种问题。 基因组、转录组、Chip-seq…… 具体步骤: # 创建名为rna的软件环境来安装转录组学分析的生物信息学软件 conda create -y -n rna python=3.7 这一步输入y或回车都可以 conda remove -n rna fastqc 不指定-n参数就得进入该环境之后才能进行删除操作,同样,-y能够跳过确认执行的步骤 Conda常用命令 补充 生信技能树学习笔记 前情提要:1.安装
生信论文的套路 ONCOMINE从全景、亚型两个维度做表达差异分析; 临床标本从蛋白水平确认(或HPA数据库),很重要; Kaplan-Meier Plotter从临床意义的角度阐明其重要性; cBio-portal 数据库做基因组学的分析(机制一); STRING互作和GO/KEGG分析探讨可能的信号通路(机制二); TISIDB/TIMER分析肿瘤免疫特征(机制三)。 在差异分析的前提下,表型分析成为重点内容,也是可以玩出花样的地方。生存分析是非常常见的表型分析。与生存分析相比,相关性分析是另外一个常见的表型分析。 严谨的生信论文还对分析结果做出ROC曲线,以提高数据的可信度和说服力。 ) http://www.oncolnc.org/ cBioPortal(组学分析神器也能做生存分析) https://www.cbioportal.org/ 差异分析数据库 oncomine数据库(差异分析首选
一.腾讯云服务器-构建生信分析环境 01.硬盘设置 挂载数据盘,我先买了200G的云数据盘,暂时够用,手动挂载后,需要进入服务器,再次进行挂载 df -h # 服务器原始的状态 ? 这里要特别感谢生信技能树群里的小伙伴,jimmy、skk、李东野、黯蓝、卖萌哥、小洁,在他们的热心帮助下,解决了这个问题!万分感谢!问题出在腾讯云的安全组设置! ? ? ? ? rstudio ? ♚ OK,到这里,生信配置就完成了!前前后后、反反复复,配置一个云服务器,花了3天的时间,设置自动挂载、寻找源,一个个的解决问题,这还是在有优质的教学视频的前提下,假如没有,学习成本还要高得多。 这里,真的要大力推荐 生信技能树团队 的教程, 感谢jimmy等一批无私分享者!对于我们这样的小白,实在是务必珍贵的资源,希望更多人能够看到,并从中学习到想要的技能、知识! 参考: 生信技能树公众号 - 所有的教程都值得仔仔细细的学习 R官网教程 https://cran.r-project.org/bin/linux/ubuntu/README.html#secure-apt
引言:上一期(这里可到达上一期)我们利用得到的肝癌的数据,进行了预处理,得到了最终的表达矩阵TCGA_LIHC_final.csv,今天我们的主要任务就是进行差异表达分析。 此外,还会顺带讲两个进行富集分析和聚类分析的函数。 基因差异表达分析 01 # 首先读入表达矩阵文件 dataFilt_LIHC_final <- read.csv("TCGA_LIHC_final.csv", header = T,check.names <- log(mat1+1) # 定义正常组织样本分组 mat2 <- dataFilt_LIHC_final[,341-390] mat2 <- log(mat2+1) # 然后就可以进行差异表达分析啦 Genelist) # 富集分析的结果 ?
安德森癌症研究中心梁晗老师实验室发表在Cencer Cell的Next-generation Analytics for Omics Data的评论文章,介绍了其团队基于自然语言和人工智能开发的组学数据分析平台 这是一个很宏大的设想,不需要编程,只需要输入自然语言,该工具就可以帮助实现所需的分析。而且还可以根据每次的分析经历进行自我学习和提高,不断完善其识别任务和盛微信分析的能力。 这么有意思的工具得实际体验一下,经测试可以轻松完成TCGA数据的统计、指定基因的关联分析和一套转录组数据的分析(从原始数据到表达矩阵)。其官方视频还提供了进行生存分析、突变分析等功能的演示。 1663759447&vid=wxv_1544970671129198595&format_id=10002&support_redirect=0&mmversion=false DrBioRight转录组分析 1663759446&vid=wxv_1544981306189643777&format_id=10002&support_redirect=0&mmversion=false DrBioRight生存分析
天意生信云 我们是市面上唯一一家使用公有云(华为云、移动云、火山云)作为算力底座的生信共享云服务器厂商! 生信初始化配置:默认搭载Rstudio(包含1000+常用包)及Jupyter,开箱即用。 ROOT权限:独享服务器、共享服务器拥有ROOT最高权限,可完全掌控服务器,随意安装软件。 信任背书: 政府基金投资单位: 荣誉资质:国家级科技型中小企业、广东省创新型中小企业 天意生信云产品 天意云服务器产品类型包括集成分析环境、共享服务器、独享服务器三种。服务器配置科学划分,按需部署。 1、注册并登录:进入我们的天意生信云(https://bio.dftianyi.com),简单注册后即可登录。 2、选择算力套餐:“天意生信云”,然后根据你的项目需求,自由选择算力套餐,无论是小规模的测试分析还是大规模的基因组测序,都能满足。
接上两篇内容,本文主要讲述工作中NGS从科研进入医学临床领域,工作中接触到生信流程,以及最终在实现的过程。 接触二代测序,生信分析,那真是打开了一个新世界的大门,各种名次术语满天飞,搞的头晕脑胀。 下面分阶段描述生信分析流程升级/进化的过程: ---- 1.手动命令行运行 经过几个月接触,自学、爬坑,慢慢搞清楚了部分内容,在似懂非懂之间开始了生信流程分析,终于有一天明白过来,这所谓的pipeline 比如其中一个步骤: 生信分析流程的进化_1.png QC 完成后,然后运行下一个步骤: 生信分析流程的进化_2.png 运行模式,一个输入或者多个输入文件,通过软件分析/计算得到一个或者多个输出文件 脚本连续运行 随着熟练程度提高,生信分析上用到的软件/工具也熟悉起来了,但是问题也暴露出来了,简单的一套 GATK Best Practice 肿瘤突变分析流程,加上CNV,SV 分析从 fastq 文件开始到最后得到过滤的 到这里,基本上就达到很多公司的生信自动化分析水平了 6. 然而到这里就足够了么?
生信论文的套路 ONCOMINE从全景、亚型两个维度做表达差异分析; 临床标本从蛋白水平确认(或HPA数据库),很重要; Kaplan-Meier Plotter从临床意义的角度阐明其重要性; cBio-portal 数据库做基因组学的分析(机制一); STRING互作和GO/KEGG分析探讨可能的信号通路(机制二); TISIDB/TIMER分析肿瘤免疫特征(机制三)。 根据我们的整理,差异分析是基础,生存分析和相关性分析是表型,免疫浸润分析是对表型的阐释,兼有表型和机制两种作用,但并不是真正意义上的机制探究。 / MethSurv(同时做甲基化分析和生存分析) https://biit.cs.ut.ee/methsurv/ SMART(专门用于甲基化分析数的据库) http://www.bioinfo-zs.com ) http://www.oncolnc.org/ cBioPortal(组学分析神器也能做生存分析) https://www.cbioportal.org/ 差异分析数据库 oncomine数据库(差异分析首选
生信开发人员最头疼的问题,可能就是平台搭建和软件安装了。部署和迁移上要费很大力气。本文讲述使用docker制作一个镜像,后续通过导入自己定制的镜像,复制文件完成分析流程的部署和迁移。 data目录, 保存待分析的文件。在docker里面挂载目录为:/opt/data result目录,保存分析中间文件和最终结果文件。 root@b8080a125313:/# # 为了我们后面使用该容器来运行分析流程,我们需要先安装ssh-server ssh服务 root@b8080a125313:/# apt-get update && apt-get install ssh-server # 安装ssh服务之后,需要修改几个地方,安装vim root@b8080a125313:/# apt-get 就可以在docker环境支持下快速完成生信分析环境的部署与迁移。 七、官方推荐使用docker-file来描述docker镜像创建过程,这里过程太过繁琐,就不继续折腾了。有兴趣的可以继续改进
最近偶尔探索下GPU生信软件,虽然方兴未艾,发现多数软件已经是古董,比如GPU版本的Blast,使用CUDA7,10.1这样的版本已经是最新的,软件依赖复杂,编译较难成功(亲测失败)。 当然,服务器的软件版本一般是相对稳定的,可能用起来问题也不大。 BIOLOGY发表了使用多GPU分析的成果。 展望 相信随着大模型及Agent的发展,近期可以是生信分析员的agent可以解放许多烦索的工作,人更多地可以花时间进行监督已有流程的运行,错误的改正。 远期是类似AutoBA的全自动生信agent,自动流程构建和数据分析。当然不排除可以部分流程的一步到位,或许未来一段时间还是人和AI相互配合解决具体问题。
很多小伙伴手头有生信数据分析,但苦于没有服务器,没法完成自己需要的数据分析,特别是处于学习阶段的同学。这里,向大家推荐一下使用腾讯云CVM服务器,按量计费进行数据分析。 一般认为,除了公司,普通人难以负担高性能的服务器价格。 ,更加专注于数据分析。 下面我以自己的qiime2分析微生物16S数据分析经历,介绍一下相关使用经验。 1.开通云服务器 首先,估计一下自己的数据所需要的计算能力,对于我手上的16S V4测序数据,一般只需要8核心16G内存就足够了,于是我就开一个这样配置的云服务器。
ChatGPT出来几个月了,我安装也有一段时间了,没试过,今天试了一下,看看会不会在我们生信分析中提供帮助,哈哈,的确,是真的很智能的!! DESeq2 对象 dds <- DESeqDataSetFromMatrix(countData, colData=sampleTable, design=wcondition) # 运行差异表达分析 solver='arpack') # 进行聚类 sc.pp.neighbors(adata, n neighbors=10,n pcs=40)sc.tl.louvain(adata) #进行细胞通讯分析
本文目的:解决在不会编程的情况下用exel做差异分析 (1)首先准备一个数据框文件,每一列为一个样本(第一列为基因名),每一行为一个基因。 ?
生信论文的套路 ONCOMINE从全景、亚型两个维度做表达差异分析; 临床标本从蛋白水平确认(或HPA数据库),很重要; Kaplan-Meier Plotter从临床意义的角度阐明其重要性; cBio-portal 数据库做基因组学的分析(机制一); STRING互作和GO/KEGG分析探讨可能的信号通路(机制二); TISIDB/TIMER分析肿瘤免疫特征(机制三)。 生信论文36是单基因分析的生信论文,单纯生信数据库的数据分析,没有湿实验验证,但是可以发表在接近5分的期刊上,很多分析做得很棒,值得借鉴。我们对文章数据进行复现。 第一部分就是差异分析。 上述oncomine热图、三线表和TIMER散点图的差异分析结果,在PPT里面进行标注和整合即获得用于发表的图片。 差异分析就是如此简单。 当然,果友们最常见的疑惑是,如何获得可用于差异分析、生存分析和探究意义的基因。确实,这是生信分析的难点之一。个人也没有更好的办法,只有多读文献,多去做分析,多去尝试几个基因。
R语言R 语言是为数学研究工作者设计的一种数学编程语言,主要用于统计分析、绘图、数据挖掘。 这些数据包括基于单通道和双通道微阵列的实验,检测mRNA,基因组DNA和蛋白质丰度,以及非阵列技术,如基因表达系列分析(SAGE),质谱蛋白质组学数据和高通量测序数据。
在上文图形化开放式生信分析系统开发 - 3 生信分析流程的进化 讨论了生信分析pipeline的进化,从手动到自动,但仍然停留在终端命令行阶段,为了让更多非生信专业的人能够使用,就要想办法实现生信分析pipeline 变量的分类: 根据实际经验,pipeline变量用到根据用途可以分为以下几类: 分析数据目录${data} 分析过程输出目录${result} 分析用到的软件 bwa ${tools.bwa};samtools ${tools.samtools} 分析流程中用的reference文件以及数据库,如 hg19.fa ${ref.hg19} 分析流程中,用到的cutoff值. /节点设计:前文提到,生信分析pipeline其实就是基于文件输入输出的工作流,这里对工作流做了简化,归纳起来工作流中有4种节点。 Task节点,输入文件,运行分析过程,输出分析过程运行结果 task.png task_menu.png 4.