使用软件Pychopper:https://github.com/epi2me-labs/pychopper软件安装$ conda install -c nanoporetech -c conda-forge #实际样本$ mkdir 2_pychopper$ nohup pychopper -t 8 -r 2_pychopper/ERR3218373_report.pdf \ -u 2_pychopper 2_pychopper/ERR3218373_full_length.fq \ 1> 2_pychopper/ERR3218373.pychopper.log 2>&1 &$ nohup pychopper -t 8 -r 2_pychopper/ERR3218377_report.pdf \ -u 2_pychopper/ERR3218377_unclassified.fq \ -w 2_pychopper _pychopper/ERR3218377.pychopper.log 2>&1 -r report_pdf Report PDF (pychopper_report.pdf).#
ONT平台:Pychopper的精准识别 对于ONT纳米孔测序平台,全长转录本的鉴定则依赖于其特定的工具: Pychopper:基于引物和Poly(A)识别 “ONT平台可以使用官方的pychopper 李老师着重指出,“在对ONT原始数据进行质控时,务必保留其双端引物序列,否则pychopper将无法识别全长转录本。有些同学在质控阶段就把引物过滤掉了,导致后续无法进行全长鉴定。”
output output_dir 关于Full length全长序列,PacBio可通过isoseq软件获得,具体参考全长转录组 | Iso-Seq 三代测序数据分析流程 (PacBio) ;ONT可通过pychopper
如果下机数据来自 Oxford Nanopre(ONT)平台,建议对原始数据使用Pychopper后(目的是鉴定全长转录组本),再运行FLAIR。