作者对两者进行差异分析,发现TGFβ通路在CD105pos CAF中富集而TNFα,NF-κB通路,IL6通路,JAK2通路,STING通路在CD105neg CAF中富集。 (Fig4E,F)但是我们能看到这些因子显著的改变了其他CAF marker的表达,即CAF的表型发生了很大转变。 两种CAF对肿瘤生长的影响 Fig6 作者皮下构建了胰腺癌小鼠模型,之后分别注射带有荧光的CD105 pos和neg的正常成纤维细胞(为啥不注射CAF呢)。 首先,作者发现肠癌和胰腺癌的CAF聚在一起,而其他癌种分别聚类,体现了这两种癌种的相似性,其次,作者发现没有一种marker能标记所有的CAF。 这篇文献与他人最大的不同还是作者对”谱系“的思考与一个”好人“CAF的发现。而进来越来越多的文章以CAF亚群为突破点冲击顶刊,值得关注。
> caf::behavior msgHandle(caf::event_based_actor *self) { return{ [=](std::string &what) ); msgHandelActor = boost::shared_ptr<caf::actor>(new caf::actor(self->spawn<caf::detached>( ::atom_constant<caf::atom("actorOne")>; using actorTwo = caf::atom_constant<caf::atom("actorTwo")>; using actorDelay = caf::atom_constant<caf::atom("catorDelay")>; //函数声明 msgHandleFuntion caf::behavior msgHandleFuntion "); } 消息指针 spwan msgHandelLoopActor = boost::shared_ptr<caf::actor>(new caf::actor(self->spawn<caf::detached
什么是CAF效应: CAF,全称为导电性阳极丝(CAF:Conductive Anodic Filamentation), 指的是PCB内部铜离子从阳极(高电压)沿着玻纤丝间的微裂通道,向阴极(低电压) 如何防止或减少CAF的发生? 1. 提高板材在抗CAF方面的能力。对于电路板基材工艺,可以从提高材料中离子纯度、使用低吸湿性树脂、玻璃布被树脂充分浸泡结合良好等方面进行提高。 对于应用端的工程师,在板材选型时,可以考虑使用耐CAF板材。如下板材供应商生益的板材选型中,就有耐CAF的板材可供选型。 2. PCB设计时,增加通孔间距,另外,由于CAF通道几乎沿着同一玻璃纤维束产生,因此,将相邻的通孔交叉发布有助于降低CAF的发生; 4. /2014/12/caf/ 《电路板内微短路现象》 https://www.researchmfg.com/2015/08/caf-cause-solution/ 《CAF形成的原因及改善对策
cafCONVERTER for mac是一款简单好用的音乐格式转换器,可用于将各种音频、音乐和声音转换为 Apple 的 .caf 格式。它甚至可以用于从视频中提取音频。 软件介绍 一个小巧但方便的转换器,可用于将各种音频、音乐和声音转换为 Apple 的 .caf 格式。它甚至可以用于从视频中提取音频。 对于批量 .caf 转换,请升级到我们的“batchCAF”。 图片 软件下载地址:cafCONVERTER for mac(caf音乐格式转换器) 1.36中文版 windows软件安装:Sidify Apple Music Converter(Apple音乐格式转换工具
目前基于特定细胞表面标记物对CAF的研究不仅加深了人们对其表型异质性和功能多样性的认识,而且也将靶向CAF治疗癌症提上了议程,使CAF成为肿瘤研究的又一热点。 Pan-CAF亚型的鉴定和分子表征 作者首先整合了三种癌症类型的 CAF ,高分辨率聚类确定了Pan-CAF 1-7这7个 CAF 亚型,这些泛CAF亚型存在于三种癌症类型中,但各丰度不同。 CAF。 B,个别癌症类型中 CAF 亚型的比例。 C,显示泛 CAF 亚型的标记基因表达的点图。 D,泛 CAF 亚型的丰富基因集。 E, UMAP 描绘了泛 CAF 亚型的细胞周期状态。 2.瘤内和瘤间CAF异质性 为了解决泛 CAF 在肿瘤中的空间分布这个问题,作者使用 CIBERSORTx 和整合的 pan-CAF scRNA-seq 数据,发现通常估计的 pan-CAF 丰度显示肿瘤
CAF和TAM的信号最多最强 a UMAP visualization of the main cell clusters in the breast TME in human scRNA-seq data 但是研究者们根据细胞亚群的生物学注释后简单的跑一个CellChat方法的细胞通讯后,发现是CAF和TAM的信号最多最强,接下来的故事就主要是湿实验验证这个细胞通讯结果,就让我有点担忧! acc=GSE161529 大家可以试试看进行类似的基础的降维聚类分群后,人工给出来了一些常见的亚群的名字,然后跑CellChat方法的细胞通讯看看是不是CAF和TAM的信号最多最强? 其次,需要找类似的另外的十几个乳腺癌的单细胞转录组数据集,做同样的发现看看是不是CAF和TAM的信号最多最强? GSE225600-邵志敏-单细胞-空间单细胞-乳腺癌.pdf GSE202695-转移性乳腺癌 GSE206638-TNBC的髓系异质性 最后,延伸到其它常见的癌症, 也是做类似的数据分析,看看是不是CAF
CAF和TAM的信号最多最强 a UMAP visualization of the main cell clusters in the breast TME in human scRNA-seq data 但是研究者们根据细胞亚群的生物学注释后简单的跑一个CellChat方法的细胞通讯后,发现是CAF和TAM的信号最多最强,接下来的故事就主要是湿实验验证这个细胞通讯结果,就让我有点担忧! acc=GSE161529 大家可以试试看进行类似的基础的降维聚类分群后,人工给出来了一些常见的亚群的名字,然后跑CellChat方法的细胞通讯看看是不是CAF和TAM的信号最多最强? 其次,需要找类似的另外的十几个乳腺癌的单细胞转录组数据集,做同样的发现看看是不是CAF和TAM的信号最多最强? GSE225600-邵志敏-单细胞-空间单细胞-乳腺癌.pdf GSE202695-转移性乳腺癌 GSE206638-TNBC的髓系异质性 最后,延伸到其它常见的癌症, 也是做类似的数据分析,看看是不是CAF
CAF和TAM的信号最多最强 a UMAP visualization of the main cell clusters in the breast TME in human scRNA-seq data 但是研究者们根据细胞亚群的生物学注释后简单的跑一个CellChat方法的细胞通讯后,发现是CAF和TAM的信号最多最强,接下来的故事就主要是湿实验验证这个细胞通讯结果,就让我有点担忧! acc=GSE161529 大家可以试试看进行类似的基础的降维聚类分群后,人工给出来了一些常见的亚群的名字,然后跑CellChat方法的细胞通讯看看是不是CAF和TAM的信号最多最强? 其次,需要找类似的另外的十几个乳腺癌的单细胞转录组数据集,做同样的发现看看是不是CAF和TAM的信号最多最强? GSE225600-邵志敏-单细胞-空间单细胞-乳腺癌.pdf GSE202695-转移性乳腺癌 GSE206638-TNBC的髓系异质性 最后,延伸到其它常见的癌症, 也是做类似的数据分析,看看是不是CAF
在这里,我们表征了乳腺癌中具有不同特性和激活水平的四个 CAF 子集。两种肌成纤维细胞亚群(CAF-S1、CAF-S4)在三阴性乳腺癌(TNBC)中量的不同。 最后,与 CAF-S4 相比,CAF-S1 增强了调节性 T 细胞抑制 T 效应子增殖的能力。 结论是不同乳腺癌类型的CAF亚型数量、空间分布不一样 CAF-S1 主要和FOXP3 淋巴细胞的积累有关 分别研究不同亚群的功能。主要分析CAF 与免疫浸润的关系。 图A可以看到不同癌型的CAF-S1 聚类到一起了。通过对文献的综述CAF相关的信号通路分子,mapping到图D 。鉴定出CAF-S1高表达的基因,在免疫调节方面有作用。 CAF-S1 促进调节T细胞分化和活性,CAF-S4 没有这些功能 接着看到CAF-S1,CAF-S4 对 CD25+FOXP3+ T 分化的影响。
不同的CAF表型亚型,包括肌纤维母细胞性CAF(myCAF)、炎性CAF(iCAF)、抗原呈递CAF(apCAF)和其他不太常见的亚型已经使用先进的分子谱分析技术鉴定,例如单细胞RNA测序(scRNA-seq 计算每个CAF半径80 mm内的细胞组成,称为“相邻向量”,使用非负矩阵分解(NMF)进行空间模式提取,我们确定了四种空间上不同的CAF亚型:s1-CAF,s2-CAF,s3-CAF和s4-CAF。 每个CAF亚型表现出不同的空间组织模式,邻域细胞组成,和相互作用网络。四个空间上不同的CAF亚型,CAF在癌症中的空间组织异质性。 结果4、不同癌症类型CAF的保守空间亚型和细胞邻域使用NMF方法提取CAF空间模式,量化相关CAF邻域内的细胞类型和状态组成。 共定位分析揭示了一致的CAF空间分布模式,包括CAF与癌细胞的共定位,类似于s1-CAF的空间分布; CAF与巨噬细胞的共定位,类似于s3-CAF;以及CAF在LA/TLS内的共定位,类似于s4-CAF
背景介绍 CAF 是肿瘤微环境中的关键成分,能够通过细胞间相互作用影响免疫逃逸、药物耐受和转移。然而,CAF 的空间异质性与其生物功能尚未完全理解。 空间模式提取与亚型命名 以80 µm半径定义CAF邻域,构建“邻域向量”。采用非负矩阵分解(NMF)提取空间模式,识别出四个空间CAF亚型:s1-CAF、s2-CAF、s3-CAF、s4-CAF。 各亚型的空间分布特征 s1-CAF:紧邻癌细胞,44.8%邻域为癌细胞。 s2-CAF:位于基质区,33.9%邻域为基质细胞。 s3-CAF:靠近血管的髓系富集基质微环境,35.9%邻域为髓系细胞。 CAF空间亚型识别流程 步骤一:定义邻域构成向量 以 CAF 为中心,设定一定半径(如 80μm),统计其邻域细胞类型比例,构建 CAF × cell type 的矩阵 步骤二:使用非负矩阵分解(NMF caf_coords = coords[caf_mask] for i, idx in enumerate(caf_indices): center = coords
本文研究了CAF在肝内胆管癌(ICC)中的功能作用,通过遗传谱系追踪、单细胞RNA测序和配体-受体分析发现肝星状细胞(HSC)是CAF的主要来源,而HSC来源的CAF是与肿瘤细胞相互作用的主要亚群。 利用TdTom标记HSC,发现在四个ICC的模型中,85%–95%Col1a1-GFP+CAF和85%–93%aSMA+CAF被标记,表明了CAF的HSC来源。 HSC源性的CAF促进ICC增长 为了阐明CAF在ICC中的功能,在小鼠模型中耗竭HSC-CAF或aSMA+CAF,可使CAF降低多达85%,同时纤维化程度降低。结果发现耗竭CAF会抑制ICC的发展。 通过scRNA-seq分析了鼠CAF和人CAF,发现了富集炎症和生长因子的CAF(iCAF)、myCAF以及表达PF/间皮标记物的间皮CAF(mesCAF)亚群。 结 论 该研究确定了ICC中CAF的来源和功能,并发现了不同的CAF亚群,这些CAF亚群可通过不同的介质促进ICC的生长。因此,CAF及其介质可作为ICC的治疗靶点。 参考文献 1.
s2/s3-CAF邻域:Tstr细胞比例分别增加2.1倍和2.9倍,其中s3-CAF邻域占比最高。 巨噬细胞的表达谱在不同CAF邻域中同样呈现差异:s1-CAF邻域:巨噬细胞高表达IL15RA和IL32s3-CAF邻域:显著上调CCR1、CCL18、CCL3L3、CCL3等趋化因子),以及CD163、 其空间分布特征包括:s1-CAF邻域:CAFs形成致密"屏障"阻隔浆细胞与肿瘤细胞接触s2-CAF邻域:浆细胞与CAFs在基质微环境中紧密共定位s4-CAF邻域:浆细胞与CAFs共定位于TLSs外层,可能介导浆细胞向肿瘤组织的迁移这些发现揭示了 结果7、基于COMET技术的空间CAF亚型及组织结构模式验证COMET检测结果在LUAD和PDAC中均验证了四种空间CAF亚型及其邻域细胞组织模式的存在。 结果8、基于CODEX与IMC技术的空间CAF亚型验证及临床关联性分析为探究空间CAF亚型的临床意义,分析了CODEX和IMC两个公共数据集。
CAF/SPP1+Macrphage细胞相互作用 A: 对Fibroblast进行细胞亚群注释; B: CAF在Tumor中的比例显著高高于Normal; C: 在TCGA-LIHC数据集中,CAF在Tumor SPP1/CAF中显著高; G/H: 根据scRNA-seq数据,用SPP1+Macrophage top20的基因作为基因集,对每个spot进行打分,,发现在SPP1/CAF中显著高; L: 病人1的 ST数据中,CAF和SPP1+Macrophage 对应的spots中,CAF和SPP1+Macrophage得分的相关性。 M: CAF/SPP1+Macrophage spot的差异基因的代谢通路,与细胞外基质重塑相关; 利用NicheNet做CAF/SPP1+Macrphage之间的细胞通讯分析 附图 A: SPP1+ 将CAF top20的受体的平均表达量,映射到ST切片中。 Q: SPP1+Macrophage top20的配体基因,和 CAF top20的受体基因的平均表达量,在ST分组中的热图展示。
结果4、来自HGIN期的侵袭性上皮细胞和临近CAF的CAF-Epi niche形成NF(normal fibroblasts)密度在LGIN、HGIN和ESCC中保持稳定,广泛分布于肌肉层中,在NOR 比较了在离上皮细胞每10 mm的距离处总成纤维细胞中CAF的比例,并揭示了当离上皮细胞的距离从91-100 mm缩小到1-10 mm时,CAF的比例显著增加。 使用scRNA-seq数据的细胞间通讯分析揭示了从侵袭性上皮细胞到CAF的相互作用比从分化细胞到CAF的相互作用显著更强。这些结果表明,在HGIN出现的侵袭性上皮细胞已经可以将NF激活为CAFs。 侵袭性上皮细胞和CAF的空间共定位在促进和维持CAF-Epi niche的形成中起着关键作用,早在HGIN就开始了。 结果6、CAF-Epi niche在肿瘤区域形成免疫隔离微环境在肿瘤边缘处的CAF-Epi niche周围形成了致密的纤维化ECM此外,分析鉴定了类似的CAF-Epi niche,并且其在HNSC中诱导
CAF-Epi微环境形成机制研究团队进一步探讨了CAF-Epi微环境的形成机制。他们发现,侵袭性上皮细胞通过JAG1-NOTCH1信号通路招募和激活成纤维细胞,形成CAF-Epi微环境。 JAG1-NOTCH1信号通路作用JAG1-NOTCH1信号通路在CAF-Epi微环境形成过程中发挥了关键作用。 这些趋化因子能够招募和激活成纤维细胞,形成CAF-Epi微环境。CAF激活与微环境重塑在CAF-Epi微环境中,CAFs表现出高度的激活状态,并分泌大量的ECM成分和生长因子等分子。 CAF-Epi微环境的临床潜力研究团队还探讨了CAF-Epi微环境在临床上的应用潜力。他们发现,CAF-Epi微环境相关分子的表达水平与食管癌患者的预后密切相关。 CAF-Epi生态位的发现,为开发靶向JAG1-NOTCH1通路的新型疗法奠定了基石。未来,结合人工智能与多模态数据,有望实现从图谱到疗法的跨越,真正迈向个体化抗癌新时代。
CAF细胞之间的互作。。。) -3)和mCherry CAF细胞系(CAF-1)来分离每种细胞;以不同比例(50:50,30:70和10:90 PDAC:CAF)共培养PDAC细胞和CAF 72h后,进行scRNA-seq测序;作者发现一组 (2) CAF条件培养基(CAF-CM)(其实就是CAF分泌的因子)对不同的PDAC细胞系的PRO和EMT表型的影响;作者发现在三种不同的CAF-CM中均发现了相对较高的PRO和EMT表型的细胞,并且作者在免疫缺陷小鼠中注射入不同比例 PDAC-3和CAF细胞组成的胰腺原位肿瘤,并使用体内荧光素酶成像进行体内观察,发现10:90 PDAC:CAF肿瘤中原发肿瘤生长明显更快(4周时与对照组相比大7.9 3),但在30:70 PDAC:CAF (4)CAF分泌的转化生长因子b(TGF-β)驱动PDAC细胞系中的DP表型;作者对无血清CAF-CM和无血清PDAC-CM进行了质谱分析并比较了CAF和PDAC分泌蛋白组学,发现TGF-β1是PDAC
CAF 2、CAF 3 和 CAF 4 表达与上皮相关的标志物,尤其是表达KRT8和KRT18(图 6B)。这些 CAF 可能是上皮间质转化 (EMT) 并保留上皮特征。 在 ccRCC 中发现了两个表达 CAF 标志物ACTA2 和TAGLN的 CAF亚群(图 6E)。 CAF 1 高表达ACTA2和TAGLN,而CAF 2 特异表达SFRP2、MMP2、TGFBI和TNC。TGFBI编码转化生长因子-β,它是 CAF 的重要分泌物。 肿瘤细胞与 CAF 和免疫细胞中的配体受体的相互作用发现了 2 型 pRCC 和 CAF 之间密切关系的特征 作者计算肿瘤细胞和 CAF/免疫细胞之间的配体-受体相互作用评分。 使用免疫染色对 CAF 进行可视化,以了解 CAF 在 2 型 pRCC 中的空间位置。它们位于肿瘤细胞周围(图 9D)。CAF 的空间位置可能有助于它们与肿瘤细胞的相互作用。
CAF1在转录模式和空间分布上与pEMT相似,但与CAF2存在显著差异,这表明CAF1代表了C2中经历EMT并获得成纤维细胞(间充质)样表型的肿瘤细胞亚群,而CAF2是由OSCC细胞诱导和募集的邻近非癌组织中的 CAF2。 为了进一步验证这一假设,我们对具有ppt、CAF1和CAF2特征的点进行了无监督主成分分析(PCA)。PCA结果显示,pEMT细胞更接近CAF1细胞,而CAF2则表现出显著的转录差异。 利用配体受体分析算法CellPhoneDB,对四种类型的细胞(上皮细胞、免疫细胞、CAF1细胞和CAF2细胞)进行了配体-受体相互作用分析。 然而,尽管在肿瘤细胞、CAF1和CAF2细胞中存在显著表达的配体受体对(如GRN/SORT1、PLA2G2A/a5b1复合体),但CAF1和CAF2细胞之间缺乏空间接近性。
CAF从myCAF到iCAF表型的过渡状态。 含有repeat RNAs的EVs诱导PDAC和CAF细胞的细胞状态失调EVs提供了在TME中不同细胞类型之间传递repeat RNA的载体,驱动PDAC-CAF细胞串扰,调节细胞可塑性和肿瘤内异质性。 为了研究重复RNA对CAF亚型的动态变化,对转染了IVT HSATII ssRNA的三种CAF细胞系进行了scRNA测序。 数据表明,在单细胞空间转录组学中观察到,repeat RNA species之间CAF细胞状态从myCAF到iCAF的共同改变。 repeat RNAs足以改变CAF细胞身份,并提供细胞外部信号,促进PDAC EMT。