人Th1极化套装技术原理与应用

Th1细胞也参与抗肿瘤免疫应答，通过活化CD8+细胞毒性T细胞和自然杀伤细胞，增强对肿瘤细胞的杀伤作用。三、T细胞发育与Th1分化调控（一）胸腺发育阶段T细胞发育的第一阶段发生于胸腺。 造血祖细胞在胸腺微环境中接受Notch信号和TCF1、GATA3、Bcl11b等转录因子的调控，向T细胞谱系定向分化。 其核心原理是在T细胞受体刺激的基础上，提供模拟体内Th1极化微环境的细胞因子组合，驱动初始T细胞向Th1谱系分化。 T细胞激活试剂：套装提供抗CD3和抗CD28抗体，模拟体内抗原提呈细胞提供的双信号刺激，确保初始T细胞的有效活化。抗体可采用可溶形式或固相包被形式，根据实验体系灵活选择。 五、总结人Th1极化套装基于对Th1分化调控机制的深入理解，通过优化的细胞因子组合和激活条件，为人Th1细胞的体外定向分化提供高效、可控的标准化工具。

高效检测 Th1Th2，Elabscience 人Th1Th2 流式细胞术染色试剂盒让免疫研究更高效

内容概要Elabscience 人Th1/Th2 流式细胞术染色试剂盒是一款专为辅助性 T 细胞亚群检测打造的四色荧光标记试剂盒，可一步法同时检测细胞表面与细胞内抗原，精准识别 Th1、Th2 细胞比例 人Th1/Th2 流式细胞术染色试剂盒介绍Th细胞，也称为辅助性T细胞，在静息状态下，Th0分化为Th1，Th2和Th17的能力非常弱，外周血中仅有极少量的Th1，Th2和Th17细胞，而当Th细胞受到外界因素刺激 本产品提供一种四色荧光标记抗体混合物，这些抗体能特异性结合人CD3，CD4，IFN-γ（检测Th1），IL-4（检测Th2），可通过多色流式检测Th1和Th2细胞。 检测原理Elabscience 人Th1/Th2 流式细胞术染色试剂盒利用特异性荧光标记抗体，分别结合 T 细胞表面抗原 CD3、CD4，以及细胞内特异性细胞因子 IFN-γ 和 IL-4；通过流式细胞术检测荧光信号 ，将CD3+CD4+IFN-γ+ 细胞定义为 Th1 细胞，CD3+CD4+IL-4+ 细胞定义为 Th2 细胞，进而实现对两种细胞亚群的精准分选与比例定量，反映机体 Th1/Th2 细胞的分化与平衡状态

解锁免疫机制：人Th1Th2 流式细胞术染色试剂盒助力科研突破

内容概要Elbabscience 人 Th1/Th2 流式细胞术染色试剂盒是专为免疫检测设计的工具，采用四色荧光标记抗体混合物，可特异性结合目标抗原，实现对人 Th1、Th2 细胞的快速精准检测。 检测原理人Th1/Th2 流式细胞术染色试剂盒通过特异性抗体与细胞表面抗原（CD3、CD4）和细胞内细胞因子（IFN-γ、IL-4）的结合，借助流式细胞仪捕获荧光信号，实现细胞亚群的精准区分。 其中，CD3+CD4+IFN-γ+ 细胞为 Th1 细胞，CD3+CD4+IL-4 + 细胞为 Th2 细胞，通过检测两种细胞的比例，可明确 Th0 细胞的分化趋向，进而反映样本的免疫状态。 设定检测参数，采集细胞信号，通过流式分析软件圈选 CD3+CD4 + 细胞群，进一步区分 IFN-γ+（Th1）和 IL-4+（Th2）细胞亚群。 统计 Th1、Th2 细胞在 CD3+CD4 + 细胞中的比例，生成检测报告。注意事项全程需避光操作，避免荧光淬灭影响检测结果。抗体孵育时间、温度需严格遵循说明书，避免过长或过短导致染色效果不佳。

单细胞Seurat - 细胞聚类(3)

本系列持续更新Seurat单细胞分析教程，欢迎关注！ 我们在这里选择了 10 个，但鼓励用户考虑以下事项： 树突状细胞和 NK 与 PC 12 和 13 密切相关的基因定义了罕见的免疫子集（即 MZB1 是浆细胞样 DC 的标记）。 我们发现，将此参数设置在 0.4-1.2 之间通常会为大约 3K 细胞的单细胞数据集带来良好的结果。对于较大的数据集，最佳分辨率通常会增加。可以使用 Idents() 函数找到簇。 AAACATACAACCAC-1 AAACATTGAGCTAC-1 AAACATTGATCAGC-1 AAACCGTGCTTCCG-1 ## 2 3 2 1 ## AAACCGTGTATGCG-1 ## 6 ## Levels: 0 1 2 3 4 5 6 7 8 未完待续，持续更新

解码辅助 T 细胞分化：Elabscience 人Th17 流式细胞术染色试剂盒实力护航

Th细胞，也称为辅助性T细胞，在静息状态下，Th0分化为Th1，Th2和Th17的能力非常弱，外周血中仅有极少量的Th1，Th2和Th17细胞，而当Th细胞受到外界因素刺激，Th0就会向Th1，Th2或 本产品提供一种三色荧光标记抗体混合物，这些抗体能特异性结合人CD3，CD4，IL-17A（检测Th17），可通过多色流式检测Th17细胞。 背景介绍辅助性 T 细胞（Th 细胞）在免疫调节中发挥关键作用，静息状态下的 Th0 细胞分化为 Th1、Th2、Th17 细胞的能力极弱，外周血中这类细胞数量极少。 检测原理Th17 细胞可表达特征性细胞因子 IL-17A，同时表达 CD3、CD4 表面抗原。 本试剂盒通过特异性结合这三种标志物的三色荧光标记抗体，与样本细胞反应后，借助多色流式细胞仪检测 CD3+CD4+IL-17A + 细胞群体，从而确定 Th17 细胞在活化 T 淋巴细胞中的比例。

细数免疫应答中重要的细胞因子

细胞 1)诱导Th1细胞分化;2)抑制Th2细胞合成IL-4、IL-5、IL-10;3)促进NK细胞、T细胞产生IFN-r，增强其细胞毒活性;4)选择性抑制IL-4诱导IgE合成; IL-15 巨噬细胞 、上皮细胞 1)促进NK细胞、记忆性CD8+T细胞增殖;2)诱导B细胞增殖分化;3)刺激肥大细胞增殖; IL-18 巨噬细胞 1)促进NK细胞、T细胞产生IFN-r;2)增强NK细胞杀伤活性;3)活化中性粒细胞 1)诱导Th1细胞分化;2)抑制Th17细胞;3)抑制外周血T细胞转变为Treg;4)限制中枢神经系统、眼睛、胎盘等部位炎症反应； 趋化因子 巨噬细胞、内皮细胞、T细胞、成纤维细胞、血小板 趋化白细胞进入组织局部 MHC II类分子；2)诱导B细胞抗体类别转换，产生IgE；3)促进Th2细胞分化，抑制Th1细胞分化；4)抑制IFN-r介导的巨噬细胞活化;5)促进肥大细胞增殖(体外);6)联合IL-13诱导M2型巨噬细胞分化 ; IFN-r T细胞(Th1、CD8+T)、NK细胞 1)促进巨噬细胞活化及杀菌功能;2)诱导B细胞抗体类别转换，产生IgG，抑制IgE产生;3)诱导Th1细胞分化，抑制Th2，Th17细胞分化;4)

干扰素-γ在肿瘤微环境中双重作用的细胞特异性机制

Th1细胞通过T-bet抑制RUNX1，阻止向Th17细胞极化。IFN-γ通过SOCS1及T-bet双重机制抑制Th2极化，分别阻断IL-4受体信号及GATA3功能。 TCR刺激下，IFNGR1与STAT1共定位于免疫突触，形成"Th1细胞准备"状态，这一过程可被Th2细胞的IL-4R表达所抑制。 值得注意的是，肿瘤浸润效应T细胞上PD-1的表达可抑制Th1分化，形成负反馈回路限制IFN-γ产生。 （三）调节性T细胞在TME中，IFN-γ可驱动调节性T细胞（Treg）向"脆弱型"表型转化，此类细胞虽维持FOXP3表达但失去抑制活性，从而削弱其促肿瘤功能。 三、IFN-γ对固有免疫细胞的调控（一）NK细胞IFN-γ可激活NK细胞的抗肿瘤功能。其肿瘤浸润依赖于IFN-γ诱导的CXCR3表达，IFNGR1或CXCR3基因敲除小鼠均表现为肿瘤浸润NK细胞减少。

单细胞day3

，同一个颜色的点被认为时一类细胞，那末到底是什么细胞呢，可以通过marker基因进行分析。 2marker 基因可以把marker基因理解为特征基因，特征基因在某一类细胞中表达量比较高，在其它类细胞中表达量低。 3可视化3.1 热图> library(ggplot2)> DoHeatmap(seu.obj, features = g) + NoLegend()++ scale_fill_gradientn( levels(scRNA)library(Seurat) #"RenameIdents"是Seurat里面的scRNA <- RenameIdents(scRNA,new.cluster.ids)p3 <- DimPlot(scRNA, reduction = "umap",label = T,pt.size = 0.5) + NoLegend()p3 #没操作手动注释的所以没有p2跟花花老师的不一样是因为我用了不同的参考数据集

单细胞day3

前一天 折腾安装包 花了一个晚上加整整一个早上加中午，搞得人很崩溃，怀疑自己是否要坚持下去

Science | 肿瘤浸润性T细胞的泛癌单细胞图谱

全局扩散图和RNA速度分析表明，CD4+T细胞可以从幼稚T细胞分别发育为Temra细胞、TFH/TH1细胞或TNFRSF9+Treg细胞(图3A)。 两个与TFH细胞相关的元簇显示出从经典IL21+TFH细胞到IFNG+TFH/TH1细胞的逐渐转变过程(图3A和B)。 通过将肿瘤分为TMB高组和TMB低组，作者发现只有CD4+TFH/TH1细胞的频率与TMB显示出强相关性(FDR26.3%)。 一个模块由三个ISG+元簇组成，而四个CD8+Tex细胞群、TFH/TH1细胞和TNFRSF9+Treg细胞形成另一个模块。 肿瘤中的T细胞状态和浸润受到多方面因素的影响，例如肿瘤内在和代谢因素。在作者的数据中，TMB与TFH/TH1细胞呈正相关，而BMI与TFH细胞呈正相关。

通过单细胞分析支气管肺泡灌洗液区分COVID-19轻症和危重症

(图3d)。 这表明轻度COVID-19的特征是TRM细胞在轨迹的末端进行活跃的(可能是抗原驱动的)TCR扩增。 图 3 轻度和危重型COVID-19 BAL中的CD8+ T细胞表型 3. 与非COVID-19相比，观察到COVID-19患者的CD4+ TH17细胞略少，但TH1样细胞更多。比较轻度和重度COVID-19，发现后者的TH1样细胞显著增加(图2d, e)。 COVID-19的TH1样细胞系中TCR的丰度和均匀度均降低，而非COVID-19的TH1样细胞系中TCR的丰度和均匀度均降低(图4h)。同时这种减少在关键的COVID-19病例中最为显著(图4i)。 相比之下，TH17细胞和TSCM细胞的特征是仅在其运动轨迹的末端TCR丰度略有下降，这表明主要是TH1样细胞被特异性选择为SARS-CoV-2 抗原。

Biomaterials：光控miR-148B纳米粒子治疗RAS诱导的小鼠表皮鳞状细胞癌

在这项研究中，作者开发了一种光诱导的纳米银核酸递送系统，它具有精确的时空调控、高细胞摄取、低细胞毒性、内涵体逃逸功能并可将治疗性miRNA释放到胞浆中。 本文将外源性miR-148B导入Ras表达的角质形成细胞和小鼠鳞状细胞癌细胞中诱导凋亡，避免了对未表达的角质形成细胞的细胞毒性。 Th1细胞，起到强大的免疫调节作用。 此外，该递送系统对辅助性T细胞具有特异性的免疫调节作用，导致SNP-DAmiR148b处理的小鼠肿瘤抑制和脾脏中Th1细胞的增加。 这一策略为肿瘤治疗提供了一种有效的方法，具有特异性，对健康组织的副作用最小，增强Th1为主的细胞免疫。

海量单细胞测序技术在CAR-T细胞治疗产品质量控制中的应用

如细胞治疗产品研究与评价技术指导原则（试行）中对细胞治疗产品在生产过程中的质量要求如下(2)： FDA 也是有一系列指导原则用于CAR-T细胞疗法的产品质量控制(3)。 Genomics Proteomics Bioinformatics的一篇名为Single-cell Analysis of CAR-T Cell Activation Reveals A Mixed TH1 /TH2 Response Independent of Differentiation的文章中，作者联合单细胞3’ mRNA高通量测序，多重细胞因子分析，活细胞成像细胞毒性分析等技术，系统的探讨了三代 一些转录因子基因TBX21(T-bet)和GATA3及细胞因子基因IFNG(IFNc)，TNF (TNFa)，IL5 (IL5)，和IL13(IL13)等，说明TH1/TH2响应在其中发生。 细胞治疗产品研究与评价技术指导原则（试行） 3.

单细胞实战之亚细胞分群之CD4+T细胞分群——从入门到进阶(中级篇2）

辅助性T细胞：主要通过信号传导支持其他免疫细胞的功能。根据它们分泌的细胞因子不同，可以分为多个亚型(Th1，Th2，Th9，Th17，Th22，Tfh)，每种亚型在免疫应答中发挥不同的作用。 (CCR7)；中央记忆T细胞，Tcm（ANXA1，TCF7）；效应记忆/效应T细胞，Temra/Teff（GNLY）；Treg细胞(FOXP3, CTLA4)；Th1细胞(IFNG，CXCL13)；Tem /Th1细胞（IFNG，GZMK，BHLHE40）；Th17细胞(IL23R)；Tfh细胞(CXCR5)；组织驻留记忆T细胞，Trm(CXCR6)；固有层Trm细胞,P.Trm(CD6)；CD4_markers_step3 `Temra/Teff`=c("GNLY"), Treg=c("FOXP3","CTLA4"), Th1 = c("IFNG","CXCL13"), `Th1/Th1`=c("GZMK","BHLHE40 簇可能是记忆性T细胞(Tcm)，第5簇可能是Th1细胞。

单细胞数据分析3（单细胞数据自动注释）

告别样本拆东补西！Elabscience Aptplex™多因子检测，一管血看清免疫全景

单点检测三大误区误区一：免疫方向只看一个标志容易“看走眼”检测到 IFN-γ 升高，就是Th1免疫激活了？但需要考虑：有没有IL-12配合，微环境支不支持？ 误区二：看到细胞趋化信号就稳了检测到CCL2 升高，说明它在召唤单核细胞。但需要考虑：这些细胞是来修复组织的，还是促进肿瘤生长的？检测到CXCL10 升高，代表它在吸引T细胞。 接下来，跟着小E一起看看多指标联检，能为你的研究带来哪些实实在在的不同：解析免疫应答主导类型，不再只是Th1/Th2二选一Ÿ Th1型：IFN-γ、IL-2、IL-12p70，主导抗病毒、抗肿瘤的细胞免疫 追踪免疫细胞迁移Ÿ CCL2：趋化单核/巨噬细胞，其在肿瘤中常促进展，在组织修复中可发挥有益作用。Ÿ CXCL10：趋化效应T细胞与NK细胞，其水平与肿瘤免疫治疗响应潜力相关。 Ÿ IL-8：主要趋化中性粒细胞，参与急性防御，也可介导慢性组织损伤。全景监测细胞因子风暴Ÿ 初始应答：IL-1β、TNF-α。Ÿ 级联放大：IL-6、G-CSF、GM-CSF。

单细胞技术应用——免疫性疾病篇

单细胞技术可用于分析免疫细胞亚群和细胞间网络（图 2-2），探索免疫系统作用机制以及不同个体、物种的差异。 1）利用单细胞技术探索不同组织免疫细胞的特征。 Immunol. 2016]，细胞可分为 ILC1、ILC2、ILC3 和 NK 四类，而 ILC3 细胞亚群可以被继 续分为三个亚群。Villani 等人[Villani A.-C et al. Science. 2017]对健康人细胞的 scRNA-seq 发 现，占比 2-3%的树突细胞亚群可以进一步区分为浆细胞样树突细胞和 CD1C+传统树突细胞。 ? Lonnberg 基于 scRNA-seq 重建了疟疾模 型小鼠 Th1 和 Tfh 细胞的发育轨迹[Lonnberg T et al. Sci. Immunol. 2017]，并证明了 Galectin-1 （半乳糖凝集素 1）在支持 Th1 分化中的 T 细胞内在作用。

单细胞分析揭示结肠癌髓系靶向治疗机制

这些数据表明，CD40激动剂可能能够进一步增强肿瘤相关bhlhe40 + th1样细胞和cDC1细胞的存活。 进一步分析人类CRC患者中ofifng表达bhlhe40 + th1样细胞与cDC细胞的相关性，发现th1样细胞的基因标记与成熟和未成熟cDC1细胞优先呈正相关。 我们的人类细胞-细胞相互作用分析预测了batf3 +cDC1群体与耗尽的CD8+T细胞以及bhlhe40 + th1样细胞的不同群体之间的未被预测的相互作用。 + th1样CD4+T细胞快速扩增。 考虑到cd40介导的acti-通过观察cd40介导的cDC1激活、Bhlhe40+ th1样CD4+T细胞扩增和记忆CD8+T细胞浸润等体内不同免疫细胞的激活动力学，我们推测Bhlhe40+ th1样CD4

乳腺癌患者抗PD1治疗期间肿瘤内变化的单细胞图谱

和耗竭标志物（HAVCR2、LAG3）的 CD8+ T 细胞，以及以 T-helper-1 表达为特征的 CD4+ T 细胞（IFNG)和滤泡辅助 (BCL6, CXCR5) 标志物。 相反，未分化的前效应/记忆 T 细胞TCF7+、GZMK+）或抑制性巨噬细胞（CX3CR1+、C3+）与 T 细胞扩增呈负相关。 经验丰富的TEX细胞分裂为1型辅助细胞(TH1)和滤泡辅助细胞(TFH) T细胞扩增过程中基因表达的变化 作者沿着 CD8+ TEX 轨迹确定了五组差异表达基因 (DEG)。 沿着 CD4+ TH1 轨迹，作者在比较 Es 与 NE时类似地确定了五个基因集（图e）和 499 个 DEG，包括潜在的 TH1 标记，如 ZEB2（图f）。 与 CD8+ T 细胞类似，NEs 中 RUNX3 和 CBFB 减少，而 Es 中 IFN-α/γ 反应增加（图 f-h）。

乳腺癌患者抗PD1治疗期间肿瘤内变化的单细胞图谱

和耗竭标志物（HAVCR2、LAG3）的 CD8+ T 细胞，以及以 T-helper-1 表达为特征的 CD4+ T 细胞（IFNG)和滤泡辅助 (BCL6, CXCR5) 标志物。 相反，未分化的前效应/记忆 T 细胞TCF7+、GZMK+）或抑制性巨噬细胞（CX3CR1+、C3+）与 T 细胞扩增呈负相关。 经验丰富的TEX细胞分裂为1型辅助细胞(TH1)和滤泡辅助细胞(TFH) T细胞扩增过程中基因表达的变化 作者沿着 CD8+ TEX 轨迹确定了五组差异表达基因 (DEG)。 沿着 CD4+ TH1 轨迹，作者在比较 Es 与 NE时类似地确定了五个基因集（图e）和 499 个 DEG，包括潜在的 TH1 标记，如 ZEB2（图f）。 与 CD8+ T 细胞类似，NEs 中 RUNX3 和 CBFB 减少，而 Es 中 IFN-α/γ 反应增加（图 f-h）。