首先让我们看看chatGPT对于NK细胞的介绍 自然杀伤细胞(Natural Killer cells,简称NK细胞)是一类免疫细胞,主要参与体内的免疫应答和抗肿瘤免疫。 NK细胞的分类可以基于其表面标志物、功能、发育阶段以及组织分布等方面进行。 1. 表面标志物分类: 基于NK细胞在表面上表达的特定标志物,可以将NK细胞分为不同的亚群。 功能分类: 根据NK细胞的功能,可以将其分为几个亚群,如: 细胞毒性NK细胞:具有杀伤肿瘤细胞和感染细胞的能力。 调节性NK细胞:通过分泌细胞因子调节免疫应答,如干扰素(IFN-γ)。 3. 需要注意的是,NK细胞的分类并不是严格的,因为细胞的特性和功能在不同环境中可能发生变化。此外,不同物种中的NK细胞也可能存在一些差异。 细胞数量较多所以就被作者细分了: CD56亚群里面NK细胞数量较多所以就被作者细分了 值得注意是里面的NK-HSP仅仅是因为NK细胞有HSP的状态,其实也可以是干扰素状态,炎症状态,或者细胞增殖状态
最近单细胞数据挖掘文章如雨后春笋般冒出来了,总体来说就两个方向: 找到一个数据集,降维聚类分群后,拿到基因列表后,去TCGA建模 首先TCGA建模然后拿模型里面的基因去单细胞转录组数据集看是否有特殊的表现 and bulk RNA‐sequencing identifies a signature based on NK cell marker genes to predict prognosis and ,三五分钟就可以出结果,但是我看到了它里面的NK细胞数量非常多,不太符合基础认知,如下所示: NK细胞数量非常多 我看了看文章里面的描述; Cells in clusters 0, 1, 2, 3, ,而且我们也不推荐它作为唯一的或者说是最后的单细胞亚群命名标准。 细胞吗?
细胞和肿瘤细胞在非角化性鼻咽癌(NK-NPC)中的作用,NK-NPC与EBV感染密切相关 方法:收集3例NK-NPC样本和3例正常鼻咽黏膜样本进行蛋白质组分析,联合GSE162025(NK-NPC单细胞转录组数据 )和GSE150825(NLH单细胞转录组数据)进行分析 分析步骤: 对蛋白组数据进行分析,发现NK细胞介导的细胞毒性相关蛋白显著下调,NK细胞功能可能受到抑制。 免疫组化发现NK-NPC样本中,与NK细胞相关的B2M,CD56+,Granzyme B均下调 对NK-NPC单细胞转录组样本进行分析,T细胞,B细胞,NK细胞在所有类型的细胞中排名前三 对NK细胞取子集进行细分 ,得到1个mast cell和3个NK细胞cluster,从NK细胞毒性激活/抑制,细胞通讯,NK细胞功能相关的标志物,NK细胞介导的毒性通路等角度进行分析,并用NLH单细胞转录数据集进行验证 对上皮细胞取子集进行细分 ,remove.isolate = FALSE) 可以看到mast cell和NK subtype之间的相互作用,但是GALECTIN信号貌似并不显著 NK细胞中细胞耗竭标志物可视化 看一下NK细胞中细胞耗竭标志物
若需要进行NK细胞的体外分选和培养(进行NK细胞的亚细胞水平的代谢等研究),可参考相关实验流程。2. 抗体选择NK细胞的鉴定主要依赖于其独特的表面标志物表达。 CD56是NK细胞的特征性标志物,但在不同NK细胞亚群中表达水平不同。CD16是另一个重要的NK细胞标志物,主要负责抗体依赖性细胞毒性(ADCC)。 (1)基于CD56和CD16的表达,NK细胞可分为两个主要亚群[4]CD56dimCD16+NK细胞:这是外周血中最主要的NK细胞亚群,约占总NK细胞的90%以上,具有强大的细胞毒性功能。 例如,前列腺癌患者外周血NK细胞显示CD9、CD49a、CXCR4、CXCL8、MMP-9表达增强[5,6]。趋化因子受体:例如CXCR4,与NK细胞的归巢和迁移有关[6]。 ⁺NK1.1主要表达于部分小鼠品系(如C57BL/6、FVB/N、NZB),但在其他品系(如BALB/c、AKR、C3H)中不表达;CD49b(DX5)则基本在所有常见近交系小鼠中表达,但可能在NOD品系中缺失
根据生信技能树发布的学徒作业:SingleR说是NK细胞你就相信了吗, 验证一下看真的是有这么多NK细胞 首先读取数据,然后降维分群 library(Seurat) library(dplyr) library # 免疫细胞 0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,15(7和14不是) DotPlot(sce,features = c('PTPRC','CD45')) # T细胞 ','SDC1','CD79A')) # NK细胞 0,4 DotPlot(sce,features = c('FGFBP2','FCG3RA','CX3CR1')) # NK细胞 0,1,3,4,9,10,13 细胞 看看NK细胞的marker 再上cellmarker看一下肝癌里NK细胞的marker DotPlot(sce,features = c('CD16','CD57','CD7','GNLY cell 最后发现:相比手动注释的结果,它把部分B细胞,部分T细胞都归类为NK细胞,但是整体而言,无论是人工注释还是自动注释,这个数据里NK细胞确实占比较高
血小板来源的生长因子(PDGF)家族包括4个多肽,它们组装成5个二聚体异构体(PDGF- aa、PDGF- bb、PDGF- ab、PDGF- cc和PDGF- dd),并与两种受体酪氨酸激酶(PDGFR NK细胞的效果类似。 经NK(DD+lgG) sup处理的肿瘤细胞上调了CADM1、CD112和CD155,可激活或抑制NK细胞介导的裂解(图4H)。 PDGF-D在GBM中表达(图5A),且与血管增生高度相关(图5B)。PDGF-D在许多具有侵袭性特征的人类肿瘤的癌细胞和/或基质中表达。 ? 研究表明CpG-ODN免疫治疗可以刺激皮下B16黑素瘤NK细胞的招募、激活和NK细胞依赖的消退。 当浸润NK细胞被肿瘤表达的PDGF-DD激活时,CpG-ODN可以更有效地抑制实体瘤的生长。
内容概要Elabscience PE/Cyanine5 标记抗小鼠 Ly-49C/I 抗体[5E6]专为小鼠 Ly-49C/I 蛋白检测设计,适用于流式细胞术(FCM)。 它具备高特异性、稳定性能和清晰检测信号,可精准识别 NK 细胞、NK-T 细胞等多种细胞表面的 Ly-49C/I 受体,为免疫相关研究提供可靠工具。 它主要表达于小鼠 NK 细胞、NK-1.1+ T 淋巴细胞(NK-T 细胞),还在 C57BL/6 小鼠的记忆 CD8+ T 淋巴细胞、NK1.1+ γδ T 细胞及 BALB/c、C57BL/6 小鼠的 其表达水平与细胞发育阶段相关,胸腺中 NK T 细胞的表达量是肝脏中的 2-5 倍,且受体表达下调对 NK T 细胞正常发育至关重要。 应用领域免疫细胞亚群分析:识别 NK 细胞、NK-T 细胞、记忆 CD8+ T 细胞等表达 Ly-49C/I 的细胞群体。
粒细胞(c 17)、MKI67+ 增殖细胞(c 18)、造血干细胞(c 19) AS 患者 CD56 dim NK 细胞亚群减少 自然杀伤细胞(NK),也称为大颗粒淋巴细胞,是具有识别和杀死有害细胞的能力而无需 得到2个 NK 细胞亚群(命名为 NK0 和 NK1) 对NK0 亚群而言,细胞毒性基因(如 GZMB 和 NKG7)以及 FCGR3A(引发抗体依赖性细胞毒性的重要受体)的高表达暗示了强大的杀伤能力, 和之前报道的 CD56 dim NK 细胞类似 NK1 亚群在细胞数量上不占优势,但是该亚群富含 GPR183、IL7R、SELL 和 TCF7 等基因,这些基因对淋巴细胞的激活、迁移和功能调节很重要, 表明它与 CD56 bright NK 细胞的身份相同 与健康对照相比,AS 患者 NK 细胞中细胞毒性基因的表达降低 为了了解 NK 细胞的减少是否伴随着转录本的改变,我们分析了两组之间 NK 细胞的基因表达水平 NK 细胞介导的细胞毒性受到阻碍,这可能是由于编码颗粒酶和 NK 的细胞毒性相关基因的表达受损所致
在NK细胞培养体系中,OK432主要作为免疫调节剂发挥作用,通过激活固有免疫信号通路,促进NK细胞的活化、增殖及功能成熟。 这种源于微生物的生物活性物质,为体外NK细胞的规模化培养提供了一种高效的刺激方案[1]。 NK细胞作为天然免疫系统的关键效应细胞,可以清除病原体和肿瘤细胞,以此原理诞生了NK细胞过继法(Adoptive NK Cell Therapy)以抑制肿瘤。 其中NK细胞的体外扩增效率和功能状态直接影响其后继的研究应用。传统NK细胞作培养方法依赖饲养层细胞和多种细胞因子的组合,存在成本高、操作复杂等问题。 传统NK细胞培养方法如K562饲养细胞培养系统,是通过基因工程改造表达4-1BBL和IL-15等膜结合因子的K562细胞作为滋养层,为NK细胞提供持续刺激信号。
它能特异性识别小鼠多种品系的 Ly-49C 和 Ly-49I 抑制性受体,在 NK 细胞、NK-T 细胞等相关研究中表现优异,具备高特异性、稳定性能和便捷使用等优势,是生命科学研究中不可或缺的实验工具。 该受体主要表达于小鼠 NK 细胞、NK-1.1+(或 DX5+)T 淋巴细胞(NK-T 细胞)亚群,在 C57BL/6 小鼠的记忆 CD8+ T 淋巴细胞、NK1.1+ γδ T 细胞以及 BALB/c Ly-49C/I 的表达水平与细胞发育阶段相关,胸腺中 NK T 细胞的表达比例是肝脏中的 2-5 倍,其表达下调对 NK T 细胞正常发育至关重要。 应用领域小鼠 NK 细胞、NK-T 细胞的表型鉴定与分选。Ly-49 受体家族表达调控机制研究。MHC I 类抗原与 Ly-49 受体相互作用研究。免疫细胞发育及功能调控相关研究。 便捷高效:直接用于流式细胞术,无需额外标记步骤,浓度优化合理,5 μL 即可满足一次检测需求。
Eomes)来影响NK细胞的抗肿瘤免疫。 NK细胞:转染Eomes过表达质粒(用于验证Eomes对DX5表达的挽救效应)。 原代NK细胞转染Eomes(Fig.5E): ◦ 实验内容:通过转染Eomes过表达质粒,恢复gp96缺陷型NK细胞中DX5的表达。 ◦ 结果:DX5+ NK细胞比例显著回升(p=0.0117),证明Eomes是gp96调控NK成熟的关键下游因子。2. 5.转染试剂的核心贡献• 高效递送能力:成功转染难转染的原代NK细胞(转染效率>60%),为功能挽救实验提供技术保障。
、NK细胞 概述 问题:在多发性骨髓瘤(MM)中 NK 细胞的细胞毒性降低。 ZNF683 NK细胞在骨髓瘤中表现出细胞毒性相关标志物降低 MM患者和健康个体之间ZNF683 NK细胞的功能差异 来自MM患者的BM和PB中的 ZNF683 NK细胞的NK细胞毒性通路与来自健康志愿者的 总之,ZNF683是进展为耗竭表型以及降低NK细胞毒性的驱动因素。 5. 同时,与健康志愿者来源的NK细胞相比,细胞毒性测定显示MM来源的ZNF683 NK细胞的细胞毒性降低,而在MM患者的ZNF683-KD NK细胞中观察到NK细胞对靶细胞的细胞毒性增加,进一步证实了ZNF683 与正常浆细胞相比,多种免疫细胞包括NK细胞、NK样T细胞、CD8+T细胞、活化单核细胞及树突状细胞均低表达SLAMF7。抗体与SLAMF7结合可以激活NK细胞和固有免疫。
此外,我们还观察到,在XCR 1+cDC 1中,大于5μm的NK细胞迁移(与实质性位移相关的运动),而与之密切接触的NK细胞(<5μm)的运动能力降低,与连续和/或突触接触一致(图4c和补充视频2)。 根据这些发现,我们通过基于先前发表的数据集和NK细胞特异性基因的表达谱生成NK细胞基因特征来调查人类数据集中NK细胞的丰度(图5a和补充图6)。 因此,利用SDC(Fig1a)和NK细胞(Fig5a)的基因标记来估计细胞丰度,我们发现黑色素瘤(Fig5c)患者的NK细胞和SDC水平之间存在显著的相关性,这与我们的小鼠数据一致。 直接分析肿瘤中的NK细胞和SDC,发现肿瘤中NK细胞水平与BDCA-3+DC水平显著相关(图5d)。 每个患者中归一化为z评分,根据中位数划分(50%严格度),NK细胞基因标签(图5A)用于将患者分为NK细胞数“低”或“高”。
OK-432(AbMole,M9414)是一种源自链球菌的生物活性物质,具有免疫调节作用,能够显著增强NK细胞的活性和扩增效率,为促进NK细胞的体外扩增提供了新的选择。 传统NK细胞培养方法主要依赖K562饲养细胞系统,其原理是K562细胞通过细胞间接触和旁分泌作用以支持NK细胞的扩增,但这种方法操作复杂且存在潜在的污染风险。 OK432是一种新型的NK细胞培养用试剂,在分子机制上,OK432的核心活性成分中的肽聚糖与脂磷壁酸可模拟细菌感染,通过结合NK细胞表面Toll样受体4(TLR4)启动相应信号通路。 在与OK432的刺激下,TLR4胞内段与MyD88适配器结合,激活NF-κB与MAPK信号级联,最终促进NK细胞的增殖。与传统的NK细胞培养方法相比,OK-432的优势在于:1. 其机制是OK-432可能通过上调NK细胞表面的激活受体(如DNAM-1)或促进颗粒酶B、穿孔素等效应分子的释放,增强NK细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。
背景介绍5E6(也称为克隆SW5E6)抗体与Ly-49C[BALB]、Ly-49C[B6]、Ly-49C[NZB]和Ly-49I[B6](除C57BR和RIII外,在所有测试菌株的自然杀伤(NK)细胞亚群和 NK-1.1+(或DX5+) T淋巴细胞(NK-T细胞)上表达的抑制性受体)、C57BL/6小鼠的记忆性CD8+ T淋巴细胞和NK1.1+ γδ T细胞群以及BALB/c和C57BL/6小鼠的B-1细胞亚群发生反应 胸腺中表达Ly-49C/I的NK T细胞比例高于肝脏(分别为未成熟NK T细胞和成熟NK T细胞)(2-5倍),有证据表明,Ly-49受体表达的下调是正常NK T细胞发育所必需的。 Ly-49家族成员是独立表达的,因此单个NK细胞或T细胞可能显示多于一类的Ly-49受体同型二聚体。5E6抗体对Ly-49C CRD具有特异性。 应用领域免疫细胞表型分析:用于 NK 细胞、NK-T 细胞、记忆 CD8+ T 细胞等免疫细胞亚群的鉴定与分选,明确 Ly-49C/I 在不同细胞群体中的表达特征。
背景介绍5E6(也称为克隆SW5E6)抗体与Ly-49C[BALB]、Ly-49C[B6]、Ly-49C[NZB]和Ly-49I[B6](除C57BR和RIII外,在所有测试菌株的自然杀伤(NK)细胞亚群和 NK-1.1+(或DX5+) T淋巴细胞(NK-T细胞)上表达的抑制性受体)、C57BL/6小鼠的记忆性CD8+ T淋巴细胞和NK1.1+ γδ T细胞群以及BALB/c和C57BL/6小鼠的B-1细胞亚群发生反应 胸腺中表达Ly-49C/I的NK T细胞比例高于肝脏(分别为未成熟NK T细胞和成熟NK T细胞)(2-5倍),有证据表明,Ly-49受体表达的下调是正常NK T细胞发育所必需的。 Ly-49家族成员是独立表达的,因此单个NK细胞或T细胞可能显示多于一类的Ly-49受体同型二聚体。5E6抗体对Ly-49C CRD具有特异性。 应用领域PerCP/Cyanine5.5 标记抗小鼠 Ly-49C/I 抗体[5E6]仅适用于流式细胞术(FCM),广泛应用于以下研究方向:NK 细胞、NK-T 细胞的亚群分选与表型分析;Ly-49 家族受体表达调控与
"T_cells" "Monocyte" "Endothelial_cells" [5] "Smooth_muscle_cells" "NK_cell" 90 88 > scRNA = subset(scRNA,idents = c("NK_cell","T_cells"))#我就选这两个细胞吧 > table(Idents(scRNA))T_cells NK_cell 1645 88 > # 以下两步进行抽样,实战跳过这步,实战可不能抽样。 大致分析一下Tcells是成熟细胞了,NK细胞会发育成为两种状态1.4.2 经典的拟时序分析展示了一些基因是如何随着时间轨迹的变化而变化的,体现变化过程,选择q值小的(是不是忘了为啥,q值是错误值相当于 scRNA = subset(scRNA,idents = c("CD8+ T-cells","NK cells"))table(Idents(scRNA))#set.seed(1234) #抽样,实战不行
对18名早期复发HCC患者进行的单细胞RNA测序分析显示,SPON2在NK细胞中特别富集(扩展数据图5a、b)。 基于单细胞RNA测序数据集也得出了相似的结果(扩展数据图5c)。 基因本体分析显示,SPON2+ NK细胞中促进抗肿瘤NK细胞功能的通路得到了富集(扩展数据图5d)。 5j),表明SPON2+ NK细胞具有迁移潜力。 为进一步验证这种表型的NK细胞依赖性质,我们生成了NK细胞特异性Spon2−/−小鼠模型(图5i和扩展数据图9k,l)。 为了生成缺乏SPON2的人类NK细胞,收获了5 × 106个扩增的NK细胞,用10毫升PBS洗涤两次,并在500g下离心5分钟,去除PBS。
细胞与CD8 T细胞 MPcov <- readRDS("Seurat_object_total_cells.Rds") #常规降维聚类分群(NK细胞与CD8 T细胞) Idents(MPcov) <- ) cov.NK <- FindNeighbors(cov.NK, dims = 1:5, force.recalc = T) cov.NK <- FindClusters(cov.NK, resolution = "seurat_clusters", label=T) dev.off() 1643460147179 #未感染对照组(n=3)、2 dpi (n=3)和5 dpi (n=4)各细胞类型在NK细胞群中的比例 pdf("Fig2b.NK_stacked_bar_composition_celltype.pdf",3.8,5) x = table(cov.NK$seurat_clusters,cov.NK$Experimental_group pdf("Fig2c.vln_plot_NK.pdf",3.8,5) VlnPlot(cov.NK, features = "STAT1", pt.size = 0) VlnPlot(cov.NK,
作者,Evil Genius每年的大约1-5月份左右,都是新技术、新思路、高分文章产出的高峰期,而11-12月一般是平静期,不知道这是不是跟国人的习惯有关。 DynaMITE-seq揭示细胞特异性响应单细胞测序鉴定出5种细胞类型(EC、成纤维细胞、SCLC、NK细胞、单核细胞)。 其他通路分析还提示,cGAMP促进EC-NK细胞黏附(ICAM1)、单核细胞-NK细胞趋化(CCL家族) 以及NK-SCLC黏附(CD96)。 结果5、干扰素基因刺激因子介导的血管激活在小细胞肺癌模型中的原位与体内验证通过STING预激活血管,可以增强治疗性NK细胞在NE MHC-I低表达/阴性SCLC中的募集。 同时耗竭NK细胞和CD8+ T细胞可显著削弱联合治疗疗效,表明NK细胞在该联合策略中发挥重要作用,但内源性NK细胞数量稀少可能限制其疗效。