前些天我在生信技能树提出来了一个转录组数据分析的疑难杂症:RNA-seq的fastq文件里面为什么有gc含量的双峰,就是fastq测序数据质量控制的时候发现了GC含量的双峰,然后我简单分析了那些高重复的 可以看到,GC含量最后一个峰是由rRNA导致,因为8百万条reads被去除后,该峰就消失了。 最后剩下的问题,就是GC含量的另外一个峰。我们后续再谈它!
我们在对测序数据进行fastqc质控时,会比较关注样本的GC含量,较好的数据如下图所示 Normal data 事实上,我们的测序结果会受到建库方式、样本质量等很多因素的影响,其GC含量也会千差万别 下图是真实测序结果的fastqc报告,很明显其GC含量有多个峰值,相当的“红”。我们在进行后续分析之前,首先要对其进行一定处理,去掉杂峰的影响。 rawdata_qc 下图是双端测序结果的fastqc质控报告中的GC含量部分,我们可以看到有几个异常峰值。 read id do echo prefetch ${id} -O ./ done 参考资料: RNA-seq数据分析完全指北-03:去除奇怪的RNA RNA-seq的fastq文件里面为什么有gc 含量的双峰
对NGS测序得到的成千上万条reads的GC含量进行统计,并且与正态分布形式对比已经是常规操作了,一般用fastqc软件即可分析,如下: ? 但现实情况往往不是这样。 Statistics Per base sequence quality Per sequence quality scores Per base sequence content Per base GC content Per sequence GC content Per base N content Sequence Length Distribution Sequence Duplication Levels Overrepresented sequences Kmer Content 那么问题来了,不同物种的ngs组学的GC含量理想范围是什么?
fastq测序数据质控的时候 首先fastq测序数据质量控制表格就发现质量差的可怜,而且居然有GC含量的双峰,如下: ? 遇到这样的情况,就必须单独看具体的每个样本,上面的GC含量图表是项目里面全部的样本的multiqc汇总图表。 我随机抽一个样本的fastqc报告看了看,如下: ? 这个59%到67%的GC含量reads有点多啊,就是第一个GC峰值。 然后80%附近GC含量reads也有点多,就是第二个GC含量峰值。 这两个GC含量峰值就是需要解决的问题,正常的RNA-seq数据不会出现这样的情况。 我们有必要仔细看看具体那些动辄一两百万的同一个GC含量的reads是什么,看了看,如下所示: Sequence Count Percentage Possible Source CCGGCCCGGAGCGGACGAGCCGCCCCGGCGGTGAACGGGGAGGAGGCGGG
含量片段偏好性。 以下为分析过程: 首先,把全基因组的bam文件用 mpileup模式输出,根据 1000bp 的窗口滑动来统计每个窗口的测到的碱基数,GC碱基数,测序总深度! if $F[2]=~/[GC]/;$counts_sum{$key}+=$F[3];$number{$key}++;}END{print "$_\t$number{$_}\t$GC{$_}\t$counts_sum 我觉得我这次画的图还不错,很明显能看到这个趋势,GC含量比较高的窗口,有着相应比较高的测序深度! ? 至此,完美的证明了文章开头的结论! /tmp.txt') a$GC = a[,4]/a[,3] a$depth = a[,5]/a[,3] a = a[a$depth<100,] plot(a$GC,a$depth) library(ggplot2
含量片段偏好性。 以下为分析过程: 首先,把全基因组的bam文件用 mpileup模式输出,根据 1000bp 的窗口滑动来统计每个窗口的测到的碱基数,GC碱基数,测序总深度! if $F[2]=~/[GC]/;$counts_sum{$key}+=$F[3];$number{$key}++;}END{print "$_\t$number{$_}\t$GC{$_}\t$counts_sum 我觉得我这次画的图还不错,很明显能看到这个趋势,GC含量比较高的窗口,有着相应比较高的测序深度! ? 至此,完美的证明了文章开头的结论! /tmp.txt')a$GC = a[,4]/a[,3]a$depth = a[,5]/a[,3]a = a[a$depth<100,]plot(a$GC,a$depth)library(ggplot2
序 本文主要研究一下java9 gc log参数的迁移。 统一JVM及GC的Logging java9引进了一个统一的日志框架,把gc相关的log输出及配置也给纳入进来了。 比如 -Xlog:gc:demoapp-gc-%p-%t.log 输出的文件名如下: demoapp-gc-1678-2018-03-01_21-44-18.log decorators time — 比如 [3.080s][info][gc,cpu ] GC(5) User=0.03s Sys=0.00s Real=0.01s 实例 -Xlog:gc=trace:file=gctrace.txt PrintGCDetails -Xlog:gc* Not Applicable PrintGCID Not Applicable GC ID is now always logged. 小结 java9把gc log的选型及输出也给统一到了Xlog中,可以按照官方给出的迁移表进行迁移。
在经过了几次跳票之后,Java 9终于在原计划日期的整整一年之后发布了正式版。 Java 9引入了很多新的特性,除了闪瞎眼的Module System和REPL,最重要的变化我认为是默认GC(Garbage Collector)修改为新一代更复杂、更全面、性能更好的G1(Garbage-First 本文将包含以下内容: GC的作用范围 GC负责的事情 JVM中的4种GC G1的一些细节 使用Java 9正式版对G1进行测试 一些简单的GC调优方法 一、GC的作用范围 要谈GC的作用范围,首先要谈JVM GC,Java 9中默认使用G1。 Parallel/Throughput Parallel在Java 9之前是服务器型宿主机中JVM的默认GC,其垃圾回收的算法和Serial基本相同,不同之处在与它使用多线程来执行。
Java 9引入了很多新的特性,除了闪瞎眼的Module System和REPL,最重要的变化我认为是默认GC(Garbage Collector)修改为新一代更复杂、更全面、性能更好的G1(Garbage-First 由于在这次写作过程中,恰逢Java 9正式版发布,之前都是依赖Java 8的文档写的,如果有不正确的地方还望指正。 本文将包含以下内容: GC的作用范围 GC负责的事情 JVM中的4种GC G1的一些细节 使用Java 9正式版对G1进行测试 一些简单的GC调优方法 一、GC的作用范围 要谈GC的作用范围,首先要谈JVM GC,Java 9中默认使用G1。 Parallel/Throughput Parallel在Java 9之前是服务器型宿主机中JVM的默认GC,其垃圾回收的算法和Serial基本相同,不同之处在与它使用多线程来执行。
以前是自己写脚本: 【直播】我的基因组47:测序深度和GC含量的关系 可能是太复杂,大多数读者表示看不懂,所以我重新使用已有的轮子来做这件事。 下载hg38参考基因组 直接谷歌搜索即可: ? 198295559 chr4 190214555 chr5 181538259 chr6 170805979 chr7 159345973 chr8 145138636 chr9 含量 因为使用的是bedtools这样成熟的轮子, 所以就是一行代码而已: bedtools nuc -fi hg38.fa -bed 200k.bed | cut -f 1-3,5 > 200k_gc.bed # 4_pct_at 5_pct_gc 6_num_A 7_num_C 8_num_G 9_num_T 10_num_N 文件如下: $head 200k_gc.bed #1_usercol 2_usercol 3_usercol 5_pct_gc chr1 0 200000 0.420110 chr1 200000 400000 0.220065 chr1
在经过了几次跳票之后,Java 9终于在原计划日期的整整一年之后发布了正式版。 Java 9引入了很多新的特性,除了闪瞎眼的Module System和REPL,最重要的变化我认为是默认GC(Garbage Collector)修改为新一代更复杂、更全面、性能更好的G1(Garbage-First 本文将包含以下内容: GC的作用范围 GC负责的事情 JVM中的4种GC G1的一些细节 使用Java 9正式版对G1进行测试 一些简单的GC调优方法 一、GC的作用范围 要谈GC的作用范围,首先要谈JVM GC,Java 9中默认使用G1。 Parallel/Throughput Parallel在Java 9之前是服务器型宿主机中JVM的默认GC,其垃圾回收的算法和Serial基本相同,不同之处在与它使用多线程来执行。
DNA 序列的 GC 含量是指序列中'G'和'C'所占的百分比。 一条 DNA 序列很容易表示,但是如果有多条 DNA 序列放在一起,则每条序列必须被标记,通常的做法是保存为 FASTA 格式文件。 需得:GC 含量最高的序列名称及其 GC 含量(各占一行行输出)。 ) def test(): item = max_gc_content('rosalind_gc_test.txt') return item[0] == 'Rosalind_0808 ("cout_gc_content:Failed") sys.exit(1) item = max_gc_content('rosalind_gc.txt') print ,特别是为其构造一个 key 函数并传入,这是解本题的关键,GC 含量本身是很容易理解的。
哈哈,这个话题带点江湖气息:开发有时觉得“自己写代码是造房子”,而测试“就是来找茬的”,于是容易说出“测试没技术含量”这种欠扁的话。 面对“测试没技术含量”这类轻视言论,不需要情绪化“怼”,而是用理性、专业、有深度的回应让对方闭嘴甚至肃然起敬。 他们没技术含量?那你去应聘试试?”“微软的测试工程师要会写编译器插件做静态分析,Amazon的QA要会建分布式压测平台 —— 你觉得这是‘点点点’?” ✍️ 总结:你可以这样优雅回击“测试当然有技术含量 —— 它是在不确定性中寻找确定性,在混沌中建立秩序,在沉默的系统中听见即将爆炸的声音。undefined我们不生产代码,我们生产信心。 谁敢说显微镜没技术含量,那是眼界问题。
这个包主要是处理基因组的一些序列信息,包括:序列翻译、DNA/RNA互转、统计各个碱基的含量、三连字母的含量.....这些都是一行命令可以解决的。今天就先来教大家怎样计算GC/AT含量。 ? 安装完毕,只需敲几行代码,就可以实现GC/AT含量可视化。 /dell/Desktop/sequence.fasta"#读取文件(FASTA格式)x<-readDNAStringSet(filepath)chrom<-x[[1]]#每100个碱基为窗口计算AT含量
对于其他虚拟机(如BEA JRockit、IBM J9等)来说是不存在永久代的概念的。 GC:只收集young gen的GC: Old GC:只收集old gen的GC。 在Hotspot JVM实现的Serial GC, Parallel GC, CMS, G1 GC中大致可以对应到某个Young GC和Old GC算法组合; Major GC通常是跟full GC是等价的 Full GC for G1 GC算法(应对G1 GC算法某些时候的不赶趟,开销很大); 各类GC算法的触发条件。 他比我们在上面讨论过的任何一种GC都要快。但是在JDK 6中,他还只是一个早期试用版本。在JDK7之后才由官方正式发布。目前JDK9已经是默认收集器了。
序列名称
序列长度
GC 含量
计算gc含量 seqkit.exe fx2tab --name --only-id --gc output.fasta -o gc.txt ?
CMS:以获取最短回收停顿时间为目标,采用“标记-清除”算法,分 4 大步进行垃圾收集,其中初始标记和重新标记会 STW ,多数应用于互联网站或者 B/S 系统的服务器端上,JDK9 被标记弃用,JDK14 GC 问题判断 在做 GC 问题排查和优化之前,我们需要先来明确下到底是不是 GC 直接导致的问题,或者应用代码导致的 GC 异常,最终出现问题。 3.1 判断 GC 有没有问题? (大家可以先停下来,看看监控平台上面的 gc.meantime 分钟级别指标,如果超过了 6 ms 那单机 GC 吞吐量就达不到 4 个 9 了。) Explicit GC:显示执行 GC 问题,参见“场景二:显式 GC 的去与留”。 Partial GC:部分收集操作的 GC,只对某些分代/分区进行回收。 /home/index [8]《A Generational Mostly-concurrent Garbage Collector》 Tony Printezis / David Detlefs [9]
今天主要谈谈JVM GC的类型和策略,特别是大家经常混淆的Minor GC、Major GC、Full GC,年轻代GC、老年代GC,之间有什么区别和联系。 Major GC 老年代的垃圾收集叫做Major GC,Major GC通常是跟full GC是等价的,收集整个GC堆。 Minor GC和Major GC其实就是年轻代GC和年老年GC的俗称。 而在Hotspot VM具体实现的收集器:Serial GC, Parallel GC, CMS, G1 GC中,大致可以对应到某个Young GC和Old GC算法组合。 分代GC并不收集整个GC堆的模式,而是只专注分代收集 Young GC:只收集年轻代的GC Old GC:只收集年老代的GC(只有CMS的concurrent collection是这个模式) Mixed 以上就是Minor GC、Major GC、Full GC的一个介绍,后续我们再重点介绍JVM GC相关的垃圾回收算法以及底层的实现。
Low fetal fraction has been linked to very early gestations, high maternal BMI, maternal medications, smoking and factors which lead to a smaller placenta, such as trisomies 13 and 18 (Kuhlmann-Capek et al. 2019)