Flye软件简介 Flye是针对三代测序数据开发的基因组de novo组装的生信软件。同时也可拼接质粒和宏基因组。 Flye官网 https://github.com/fenderglass/Flye Flye软件安装 #1、conda安装flye conda install -y flye #2、编译安装flye wget \ https://github.com/fenderglass/Flye/archive/refs/heads/flye.zip # 解压文件 unzip flye.zip # 安装软件 cd Flye-flye make # 将软件添加到环境变量 vim ~/.bashrc PATH=/opt/biosoft/GENOME/Flye-flye 使用案例 flye \ --pacbio-raw pacbio.fastq.gz \ --genome-size 5.4m \ --out-dir pacbio_flye_out Flye主要结果输出文件
这里,Mikhail Kolmogorov 提出了一种名为 Flye 的长读长组装算法。 将 Flye 与五种最先进的组装工具进行了对比测试,结果表明 Flye 生成的组装结果优于或相当于其他工具,并且运行速度快了一个数量级。 此外,Flye 还提供了专门用于宏基因组组装的模式。 目前,Flye 对二倍体基因组的组装会输出合并(collapsed)的组装结果。 二、软件安装 Flye: https://github.com/mikolmogorov/Flye 版本:v2.9.6 (2025.05) #conda一键安装部署 $ conda install -c bioconda flye # v2.9.6 #安装完毕后,调用主程序查看帮助 $ flye -h 三、软件使用 输入的测序数据可以是 FASTA 或 FASTQ 格式,支持未压缩或以 .gz 格式压缩的文件
拼接基因组 flye 原来叫做 abruijn,是一款适合单分子测序的拼接软件,那么显然就是适合 Pacbio 与nanopore。 flye 适合拼接多种数据集,从小的细菌基因组到很大的哺乳动物基因组。 flye 其实也是一个完整的拼接流程,首先原始测序数据作为输入,最后就可以直接输出经过纠错校正的基因组序列,同时,flye 也有一个独立的模块可以用来拼接宏基因组。 #利用 bioconda 安装 conda install -y flye 使用案例 就像它的名字一样,flye 使用起来也非常简单。 -t 12 -o flye_clean > flye_clean.log" > flye_clean.sh 常用选项参数: --pacbio-raw :输入原始 pacbio 数据
flye 适合拼接多种数据集,从小的细菌基因组到很大的哺乳动物基因组。flye 其实也是一个完整的拼接流程,首先原始测序数据作为输入,最后就可以直接输出经过纠错校正的基因组序列,同时给出拼接结果统计。 flye 也有一个独立的模块 metaFlye 可以用来拼接宏基因组。 使用案例 就像它简介的名字一样,flye 使用起来也非常简单。 conda install -y flye echo "time flye --nano-raw ERR3994080_1.fastq.gz --genome-size 200M --out-dir flye --meta --threads 24 1>flye.log 2>flye.err" >flye.sh bsub -q fat -n 24 -o %J.log -e %J.err sh flye.sh
3 拼接基因组 echo "flye --nano-raw nanopore/ont.fq.gz --out-dir flye --genome-size 120m --threads 12 --iterations 3 --scaffold " >flye.sh #运行脚本 nohup sh flye.sh & #监控进程 jobs top 写在最后:有时间我们会努力更新的。
src sudo make export PATH=$PATH:/用户路径/biosoft/canu 设置路径进环境变量 source ~/.bashrc 刷新环境变量 canu 检查是否安装完成 5 flye git clone https://github.com/fenderglass/Flye cd Flye sudo make export PATH=$PATH:/用户路径/biosoft/Flye 设置路径进环境变量 source ~/.bashrc 刷新环境变量 Flye 检查是否安装完成
为了解决这个问题,作者还应用了Flye组装工具。DeChat+Flye 的组合显着提高了基因组组装的连续性 (N50/NGA50),同时在其他指标上保持与原始 Flye 组装相当的性能。
illumina.sra \ https://sra-pub-run-odp.s3.amazonaws.com/sra/SRR8482586/SRR8482586 Tips: 本期需要纠错的基因组选择上期推文中Flye Pilon使用案例 Tips: 示例使用的是conda安装的Pilon # 对拼接结果建立索引(如何获得assembly.fasta详见Flye三代基因组推文) bwa index assembly.fasta
从网站上下载解压之后,可 以直接调用 #-------------------------------------------------------------------------------- #(76)flye 已安装 conda install -c bioconda flye -y #------------------------------------------------------------
手头有数据的可以试试 这个流程首先使用minimap2将ont数据比对到参考的叶绿体基因组,然后生成paf文件,然后根据paf文件去过滤比对上的reads,然后选取50X的reads去组装,组装用到的软件是flye
nanoporetech/medaka 软件安装运行 #创建文件夹 mkdir 41.polish;cd 41.polish cp /share/home/xiehs/05.assembly/40.nanopore/flye ;(2G) 第三步测序方案:至少要测(2x30倍=60G或者200倍=400G);3代测序+2代纠错,nanopore+illumina; 第四步质控过滤; 第五步flye
./2/nanopore/flye/assembly.fasta mg.fasta echo "time prokka mg.fasta --outdir prokka --prefix mg --metagenome
等数值化评估工具形成互补,Chromeister的图形化输出特别适合检测: • 组装连续性(Contiguity) • 染色体方向错误 • 大规模结构变异 在酿酒酵母基因组组装案例中,研究者通过比较Hifiasm和Flye
等数值化评估工具形成互补,Chromeister的图形化输出特别适合检测: • 组装连续性(Contiguity) • 染色体方向错误 • 大规模结构变异 在酿酒酵母基因组组装案例中,研究者通过比较Hifiasm和Flye
本期需要纠错的基因组选择上期推文中Flye组装的nanopore数据进行演示,即下文assembly.fasta racon示例数据处理(sra转fastq) # nanopore原始数据处理(sra转
y fastp mamba create -n nanoplot -y nanoplot #安装基因组拼接相关工具 mamba install -y velvet mamba install -y flye
基因组组装:使用Flye进行从头组装,使用Minimap2和Racon进行抛光,使用SAMtools depth评估组装覆盖度,使用Pathogenwatch进行物种复杂分析和核心基因组多位点序列分型。
相应地,资源消耗较多,较其它组装工具而言运行会稍慢(如Flye)。 Canu对原始数据的组装分为三个阶段和四个步骤 (图3): 1.
-y fastp mamba create -n nanoplot -y nanoplot 安装基因组拼接相关工具 mamba install -y velvet mamba install -y flye
常用的基因组组装工具有SPAdes、 Unicycler、Shovill和Flye等。 SPAdes SPAdes是一款专为测序数据组装和分析而设计的多功能工具包。