该团队揭示了 CD36 是介导 PROTAC 及 bRO5 化合物透膜的关键蛋白,通过结构优化增加PROTAC 分子与 CD36 的亲和力,可以明显提高 PROTAC 透膜性,显著增强 PROTAC 的抗肿瘤功效 这类分子通过同时结合靶蛋白和 E3 泛素连接酶,诱导蛋白质降解,从而实现对疾病关键蛋白的精准清除。 CD36 缺失会大幅降低这些药物的细胞摄取效率及靶蛋白降解能力;CD36 表达恢复可显著提升 PROTAC 的疗效。CD36 介导的摄取依赖于经典的内吞通路 (Rab5/EEA1 早期内体途径) 。 Section.03研究亮点:从机制到应用的系统性突破发现 CD36 可识别并内吞多种"大分子药物"通过生物素标记的 PROTAC 探针,结合细胞膜蛋白质组筛选,研究者发现 CD36 是多个 PROTAC 3.
MKN7 和 MKN28(两种胃癌细胞系)中 7 个预后因子的表达趋势与 RNA-seq 数据中的表达趋势一致,也比较了公共 HPA(人类蛋白质图谱)数据库中的蛋白质表达水平。 粉色模块内基因的通路富集分析表明,这些基因主要富集于癌症通路、PI3K-Akt信号通路、癌症蛋白聚糖、多细胞生物过程调控和定位调控。 RGS2、GNAI2、ANXA5、MARCKS、CD36、NRP1和PDE4A是STAD的预后指标,其中GNAI2和PDE4A是保护指标,RGS2、ANXA5、MARCKS、CD36和NRP1是危险指标 预后因素的表达图谱和突变图谱 分析RiskScore系统中预后因子和蛋白质产物的表达水平。 首先,在HPA数据库中查询RGS2、GNAI2、ANXA5、MARCKS、CD36、NRP1和PDE4A的蛋白产物表达水平。MARCKS基因编码的蛋白质在STAD组织中的表达低于正常胃组织(图4A)。
B,从B6小鼠中分离出原代肝细胞,用PBS、TNF-α或IFN-γ培养24小时,并收集Pcsk9 mRNA,用qPCR测定进行分析(n=3)。 研究人员还进行了体内研究,通过构建心脏转基因动物模型进行实验,实验结果显示,在HTR期间,Tnf或Ifn缺乏不仅能抑制受体肝脏SREBP2的表达,还可以降低肝脏Pcsk9 mRNA的表达和血清PCSK9水平(图3A 和3B),并得到TNF-α和IFN-γ能通过SREBP2协同促进肝细胞中PCSK9的表达(图3C)的结论。 图 3 A和B,在心脏移植后第6天收集受者的肝脏和血清。A, 肝脏中SREBP2的mRNA和蛋白水平通过qPCR(n=4)和WB测量。 pcsk9的靶点,包括ldlr、lrp1、lrp5、lrp8、vldlr和cd36,被标记出来。b,散点图显示排斥组和非排斥组之间cd36的表达。
Concanamycin A还能以0.1 μM的浓度在小鼠成骨细胞中抑制溶酶体酸化,降低组织蛋白酶B的活性[3]。 Concanamycin A(Con A,Folimycin,刀豆素A,AbMole,M7737) 在大鼠模型中,静脉注射(剂量为1 mg/kg)可用于研究V-ATP酶对CD36蛋白亚细胞循环的调控,并揭示其在心肌脂质代谢紊乱中的作用 Protein Synthesis IN-1作为蛋白质合成抑制剂,用于追踪FREE1蛋白的半衰期和降解过程。 General subjects 2018, 1862 (3), 684-691.[2] Bartaula-Brevik, S.; Leitch, C.; Hernandez-Valladares, M Journal of clinical medicine 2023, 12 (17).[3] Uhlman, A.; Folkers, K.; Liston, J.; et al.
EXProt :database for EXPerimentally verified Protein functions ps,写到这里,安利一个航母网址https://www.expasy.org/ 3 UniProtKB:不能再详细 Swiss-Prot 数据来源 核酸数据库翻译推导 蛋白质数据库PIR挑选 科学文献摘录 研究人员直接提交的蛋白序列 特点 每一条序列包括核心数据和注释两类,
写在前面 我们在进行基因的蛋白表达检测的时候,通常的方法是进行western blot以及免疫组化进行检测的。 对于某一个蛋白免疫组化的结果呈现,数据库是分成了四个分类来呈现的,分别是:没有检测到、低表达、中表达以及高表达。、 ? 数据库使用 数据库的使用和基因的检索数据库是一样的。 我们只需要输入我们想要检索的蛋白名即可。例如我们这里输入:CD36。 ? 对于每一个蛋白的数据结果,数据库提供了多个模块来展示结果。首先我们看到的是一个汇总的界面,这里我们能看到这个蛋白的基本信息。 组织表达情况 在组织表达情况当中,我们可以看到这个蛋白的不同在不同的正常组织当中mRNA和蛋白的表达情况。 蛋白表达定位情况 在 CELL部分,我们可以看到这个蛋白在细胞当中的什么部位表达,通过蛋白的表达位置来确定这个蛋白可能具有的功能。 ? 3.
三、 PreF3蛋白:稳定融合前构象的抗原设计突破PreF3蛋白并非病毒基因组直接编码的天然蛋白,而是基于F蛋白结构生物学研究而精心设计的重组蛋白工程产物,特指稳定在融合前构象(Prefusion conformation 技术特点与优势:PreF3蛋白作为科研试剂,其最大优势在于保持了天然PreF构象的抗原表位完整性。 与自发转变为PostF的野生型F蛋白或早期PreF设计相比,PreF3蛋白具有更高的蛋白稳定性和均一性,能更有效地诱导产生针对关键中和表位的高效抗体。 作为科研试剂的核心价值:PreF3蛋白是目前研究HRSV/BRSV F蛋白相关生物学和免疫学的“金标准”抗原。 虽然F蛋白相对保守,但G蛋白差异显著,而PreF3蛋白的设计也需针对不同亚型进行序列优化。
两蛋白间的分子对接3—使用AlphaFold进行据说AlphaFold进行分子对接比传统的蛋白分子工具如zdock、hdock的对接效果更好。 输出PDB格式文件3.pymol中进行可视化操作安装ppi.py脚本文件,Choose file选择ppi.py这个脚本,安装脚本ppi.py这段 Python 脚本是专门在 PyMOL 中执行的,用来分析和可视化蛋白质 -蛋白质相互作用(PPI),重点包括:π-π stacking(芳香环之间的堆叠)Salt bridge(盐桥)Hydrogen bonds(氢键)同时,脚本还设置了可视化参数,便于展示结果。 y1,y2,y3): import numpy as np #print(x1,x2,x3,y1,y2,y3) B1, B2, B3 = [x1[0] - x2[0], x1[1] - [1] - y3[1], y1[2] - y3[2]] n2 = [D2 * E3 - E2 * D3, D3 * E1 - E3 * D1, D1 * E2 - E1 * D2] dot_product
上周我们公布了,蛋白质组学习小组起飞啦! 短短几天就获得了250多小伙伴的支持,让我们也更有信心的带领大家掌握一个蛋白质组学数据处理的实战,前面两期我们分享的是: 蛋白质组学第1期-认识基础概念 蛋白质组学第2期-认识蛋白质组学原始数据 ?
The results showed that the ratio of tumor cells was over 50% in all 4 patients and over 75% in 3 of acc=GSE190811,可以看到; GSM5732357 PT_3 LNM ST GSM5732358 PT_6 LNM ST GSM5732359 PT_7 LNM ST GSM5732360 PT 里面的空间单细胞转录组数据文件,走空间单细胞流程,详见:10x的空间单细胞文件格式详解 需要完成上面的4个样品的空间切片的上皮细胞的打分以及可视化,然后随便也看看下面的基因列表的地方吧; Fibroblast: CD36 GPR17, PMP22, MPZL1, TRF, RAP1, GAL3ST1, MYO1D Neurons: NCAM1,MAP2,RBFOX3,TUBB3,GRIN1 如果做到了的话可以发邮件给我 蛋白质组学分析:通过蛋白质质谱分析样品中蛋白质的组成,寻找与乳腺癌相关的蛋白质标志物。
数据库能够把基因及表达信息作为一个整体的网络进行研究,通俗点讲就是通过基因寻找通路 GO全称为gene ontology,由基因本体联合会(Gene Ontology Consortium)建立的数据库,数据库对基因和蛋白功能进行限定和描述 toType = c( "ENTREZID"), OrgDb = org.Hs.eg.db) head(df) ## SYMBOL ENTREZID ## 1 CD36 DEG=deg head(DEG) ## logFC AveExpr t P.Value adj.P.Val B g ## CD36 UP ## ETV4 -3.843247 9.667077 -46.99899 4.224762e-14 1.325237e-10 22.56297 DOWN ## symbol ## CD36 CD36 ## DUSP6 DUSP6 ## DCT DCT ## SPRY2 SPRY2 ## MOXD1 MOXD1 ## ETV4 ETV4 # 通过基因名将转换后的
原核蛋白表达宿主菌株与表达载体的选择1. 宿主菌株的选择BL21 系列菌株:最常用的表达宿主,如 BL21(DE3),因缺乏 Lon 与 OmpT 蛋白酶,可减少重组蛋白降解,配合 T7 表达系统可实现高水平表达。 C41、C43 等突变株:对有毒或难表达蛋白更为耐受,常用于膜蛋白或代谢负担较大的蛋白。2. 3. 小规模表达测试与优化在大规模表达前,需进行小规模试表达检测表达溶解性、条件优化(诱导温度、宿主菌株、表达载体等)。 目标蛋白及修饰/标签设计:根据实验需求确定是否添加His-tag、GST等融合标签,是否加入酶切位点;2. 基因合成与密码子优化:针对E. coli 系统进行优化,提升表达效率;3.
在人类乳腺中,这种导管结构会嵌入富含胶原蛋白的特殊基质中,其中含有不同类型的间充质和免疫 (IM) 细胞。 然后进行聚类分群, NMC主要是5个群,其中有3个是完全属于NMC:a single MY cluster and two luminal clusters (LCs)。 markers:主要是 keratin 18 (KRT18) and EPCAM (EPCAM);其中HR cluster marker是ESR1, PGR, PRLR;LP的maker是ELF5,ALDH1A3, CSN318) and other secretory genes integral to milk fat secretion such as xanthine hydrogenase (XDH), CD36 (CD36) and mucin-1 (MUC1) 然后对LC1和LC2进行差异分析, 其中1640 个基因在 LC1 中高表达,发现 1782 个基因在 LC2 中高表达;富集分析结果显示:LC1
多参数优化的采样系统 为平衡构象质量与计算效率,AFsample3建立了多参数优化的采样体系: 采样规模:针对238个靶标蛋白的测试表明,多数蛋白仅需生成300个模型即可获得高质量交替构象,较AFsample2 构象预测质量显著提升 交替构象优化:28%的靶标蛋白(67/238)的交替构象预测质量实现显著改善(ΔTM>0.1),仅3%(8/238)的目标性能轻微下降,与AF2vanilla、AF3vanilla 跨场景鲁棒性优异 AFsample3在不同构象差异和序列长度的目标蛋白中均表现稳定: 针对构象相似度较高(TM>0.5)的目标蛋白,其交替构象预测准确率提升最为显著; 对于长序列蛋白(序列长度>1000 该协议可直接应用于未知构象蛋白的研究,为孤儿蛋白、新发现蛋白的构象解析提供了可行方案,显著拓展了多构象建模的应用场景。 3. 五、总结 AFsample3作为基于AlphaFold3的增强采样框架,通过创新的MSA随机掩码策略、DiSco无参考筛选协议和多参数优化系统,在多构象蛋白质建模领域实现了技术突破。
多参数优化的采样系统 为平衡构象质量与计算效率,AFsample3建立了多参数优化的采样体系: 采样规模:针对238个靶标蛋白的测试表明,多数蛋白仅需生成300个模型即可获得高质量交替构象,较AFsample2 构象预测质量显著提升 交替构象优化:28%的靶标蛋白(67/238)的交替构象预测质量实现显著改善(ΔTM>0.1),仅3%(8/238)的目标性能轻微下降,与AF2vanilla、AF3vanilla 跨场景鲁棒性优异 AFsample3在不同构象差异和序列长度的目标蛋白中均表现稳定: 针对构象相似度较高(TM>0.5)的目标蛋白,其交替构象预测准确率提升最为显著; 对于长序列蛋白(序列长度>1000 该协议可直接应用于未知构象蛋白的研究,为孤儿蛋白、新发现蛋白的构象解析提供了可行方案,显著拓展了多构象建模的应用场景。 3. 五、总结 AFsample3作为基于AlphaFold3的增强采样框架,通过创新的MSA随机掩码策略、DiSco无参考筛选协议和多参数优化系统,在多构象蛋白质建模领域实现了技术突破。
序列比对和序列特征分析总目录 卷曲螺旋是蛋白质中的结构motif,其中2-7个α-螺旋像绳索一样缠绕在一起,其中最常见的类型是二聚体和三聚体。 许多卷曲螺旋型蛋白质参与重要的生物学功能,例如基因表达的调节的转录因子。 比如c-Fos和c-jun。
优点:容错率极高,能整合量纲完全不同的数据(如转录组+蛋白质组+甲基化)。 缺点:丢失了具体的“倍数变化”信息,无法量化差异幅度。 16.56112 DOWN H2-K1 ## Gm10260 16.45028 UP Gm10260 ## Rps18 15.48881 DOWN Rps18 ## Cd36 15.39094 UP Cd36 head(deg2) ## logFC AveExpr t P.Value 3.剔除基因名NA、重复以及无穷值,防止因异常数据而报错。 4.两个差异分析结果数据取交集。 (结果会强烈向更靠谱的 dat1 倾斜,而不是简单的中间值 3)。
cholangiocarcinoma 一种新的多mRNA标志物预测胆管癌复发的预后价值 术语 CCA:胆管癌 DEGs:差异表达基因 mRNA:由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息的能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸 利用127个AUC≥0.55的mRNA构建LASSO-COX回归模型(图3A)。 在平均交叉验证误差最小的λ值下,选择了7个非零系数的mRNA,包括CD36、GGCX、UBASH3B、DBN1、PTTG1、CCNA2和SPATS2(图3B)。 根据这7个mRNA的表达情况,构建了RFS的风险评分公式:风险评分=(-0.96873×CD36表达状态)+-0.03944×GGCX表达状态)+(0.01064×UBASH3B表达状态)+(0.04955 图3 3. TCGA样本复发风险评分公式的评估 计算TCGA数据集中每个患者的复发风险得分。如图4A所示,当风险评分增加时,患者更容易复发。
在生物技术与分子生物学中,原核蛋白表达体系(尤其是大肠杆菌蛋白表达)因操作简便、生长速度快、成本低廉,是获取重组蛋白的重要途径。 因此,在工程过程中,提升可溶性蛋白表达与完善包涵体蛋白的纯化与复性策略,是实现高效、活性蛋白回收的关键。可溶性蛋白表达策略避免目标蛋白形成沉淀、提高可溶性表达是首选路径。 3、使用融合标签(如 MBP、GST、His-tag):这些标签可增强表达稳定性、促进折叠并便于后续纯化。 通过上述策略,可显著在原核蛋白表达 / 大肠杆菌蛋白表达系统中提升可溶性蛋白表达比率,从而降低进入包涵体途径的蛋白量。包涵体蛋白纯化流程当可溶性表达不足时,包涵体表达成为高产获取目标蛋白的重要替代。 (3)复性(Refolding)溶解后需进行复性,将蛋白恢复至天然构象。缓慢稀释、梯度透析、加入辅因子、氧化还原系统、辅侣蛋白等方式可降低聚集,提升折叠质量。
我们在遇到一些新的蛋白的时候,经常需要去了解这个蛋白的功能。如果是一个新的还没有功能注释的蛋白,一般数据库就用不了了。这个时候就可以使用 NetGo 来对蛋白的序列进行功能注释了。 ? NetGo基于三重信息来对蛋白序列进行功能预测: 基于已知的功能信息信息(GO数据库) 基于STRING蛋白相互作用数据库进行注释 如果没有互作蛋白的可以进行同源转换进行注释。 数据库评价 对于蛋白功能预测的话,已知的蛋白基本上都已经基于GO预测好了。如果我们研究的是已知常规蛋白的话,其实可以去类似Genecards或NCBI的gene数据库直接看的。 这个数据库更多的可以用于新发现的蛋白的预测,或者说一个基因不同转录本之间的研究,看有没有功能的区别。