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芒果实验室，293细胞培养
细胞培养犹如带娃，什么时候喂奶（传代），什么时候尿尿（换液），什么时候拉臭臭（冻存），必须要规律。技巧就是，每隔两天，固定时间传代，传代的细胞量，培养基和条件要一致。 基本培养基需加入胎牛血清和抗生素制备成完全培养基，才能用于细胞培养。一般加10%小牛血清或胎牛血清。青/链霉素的浓度最终各为100单位/ml。 为避免污染胎牛血清、胰蛋白酶和完全培养基以及PBS需分装保存，并在细胞培养操作前做好准备工作。 细胞传代培养 （一）传代前准备： 1.超净工作台经紫外线照射，75％酒精消毒双手。 弃上清液，加入新培养液：吸出旧培养基，加2m新鲜培养基，用1000ul移液器吹打细胞，吸放5次制成细胞悬液。 2.吹打制悬：混合均匀后，依稀释比例转移至2-3个事先加入适量培养基（5-7ml）的新培养皿/瓶中（一般可以1：5传代，必要时计数后分装）。
1.1K30发布于 2020-06-28 - 来自专栏生命科学
基础细胞培养方法及步骤 | MedChemExpress (MCE)
大多数细胞培养生长为：悬浮培养和贴壁培养。然而，在某些情况下可能会观察到悬浮和贴壁的混合群体。 ，500 g 离心 5 min，温柔的倒出上清液 (也可以先保留下来以备不时之需)，管底细胞沉淀加入 10 mL 完全培养基吹打、重悬。 放入新的细胞培养瓶中培养过夜，根据细胞密度及生长情况分瓶传代。4. 吸弃培养瓶内旧培养液，5 mL PBS 润洗细胞，吸弃 PBS；4. Acta Biomater. 2011 Jun;7(6):2615-22.[5] Yee Y, et al.
38510编辑于 2024-06-11 - 来自专栏智药邦
AI+机器人自动化细胞培养平台揭示帕金森病的隐藏特征
纽约干细胞基金会(NYSCF)研究所的科学家们利用他们的自动化细胞培养平台，与谷歌研究部门合作，通过创建和分析来自91名患者和健康对照组的超过一百万张皮肤细胞的图像，成功地确定了帕金森病的新细胞标志。
34610编辑于 2022-04-13 - 来自专栏生命科学
细胞实验 | 细胞污染还是药物析出？-MedChemExpress
细菌污染 细菌污染是细胞培养中最常见的污染，常见的有枯草杆菌、大肠杆菌、分歧杆菌以及葡萄球菌污染等。 支原体是最小的独立生存生物，不能用可见光显微镜进行肉眼检查，因此可以在细胞培养物中长时间不被发现。 介绍完细胞培养常见污染种类之后，大家是不是有了一个初步概念了呢？ 青霉/链霉素双抗溶液已过滤除菌，可直接用于细胞培养的双抗溶液。产品添加到细胞培养液中， 可有 效抑制多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长，从而有效控制细胞污染。 [5] Cord C Uphoff , Hans G Drexler.
70530编辑于 2023-04-07 - 来自专栏DrugOne
伊维菌素在细胞培养物中显示出对COVID-19的活性
莫纳什大学生物医学发现研究所(BDI)和彼得·多尔蒂感染与免疫研究所的一项合作研究表明，伊维菌素可以通过消除两个基因中的所有遗传信息来阻止SARS-CoV-2在细胞培养中的生长。
50550发布于 2021-02-01 - 来自专栏量子位
仿和牛的3D打印肉，动物干细胞「生长」而成，你会吃么？
并不乐观的是，目前细胞培养加3D打印类型的人造肉产品面临商业化障碍有两重。 首先是接受度不高。 他们计划先将自己产品与植物肉产品混合，靠优化口感与肉味切入，再逐步推广纯细胞培养肉。 正如前文提及，对比干细胞培养人造肉，目前市面上更容易接触的是植物肉。 此种人造肉以大豆蛋白等素食材料为基础，改变其蛋白结构使之更接近日常肉类。 最后，问问大家，你会吃干细胞培养的3D打印人造肉么？ 参考链接： [1]https://s.weibo.com/weibo? q=%233D%E6%89%93%E5%8D%B0%E8%82%89%E5%B0%86%E6%8A%95%E5%85%A5%E5%95%86%E4%B8%9A%E9%A2%86%E5%9F%9F%23&
51050编辑于 2022-12-08 AbMole科研讲堂丨OK-432：如何成为优于K562饲养体系的NK细胞培养方案？
传统NK细胞培养方法主要依赖K562饲养细胞系统，其原理是K562细胞通过细胞间接触和旁分泌作用以支持NK细胞的扩增，但这种方法操作复杂且存在潜在的污染风险。 OK432是一种新型的NK细胞培养用试剂，在分子机制上，OK432的核心活性成分中的肽聚糖与脂磷壁酸可模拟细菌感染，通过结合NK细胞表面Toll样受体4（TLR4）启动相应信号通路。 与传统的NK细胞培养方法相比，OK-432的优势在于：1. 简化培养流程：OK-432（AbMole，M9414）无需依赖饲养细胞，仅需在培养初期添加即可有效提高NK细胞的扩增效率。2.
18010编辑于 2025-12-03- 来自专栏大数据文摘
在培养罐创造小鼠胚胎后，这家生物公司尝试用人类干细胞培养移植器官
大数据文摘作品 作者：Mickey 20多年前，一只通过现代工程创造出来的绵羊多莉（Dolly）引发了全人类的欢呼，这是世界之初第一个成功克隆的哺乳动物。人类由此意识到，我们可以通过一些外部生物工程技术，创造或者更改生命和器官。 虽然相关议题一直充满了道德争议，但是类似的科学研究仍然在继续。最近，一家以色列生物技术公司尝试在一个培养皿中，只用干细胞，制造出人类的器官。 这一培育人类器官的尝试并非“天方夜谭”，在同样一家实验室中，魏茨曼分子遗传学系的科学家们在没有使用精子、卵子或子宫的情况下，在一个罐子中培养
45310编辑于 2022-08-26 - 来自专栏智能传感
溶解氧传感器在一次性生物反应器培养系统中的应用
一次性生物反应器在实验室规模化培养动物细胞中的应用主要表现在细胞培养过程中的有效通气是实现高细胞密度和高产品浓度的一项要求。 一次性生物反应器可确保在1 升规模的动物细胞培养过程中提供充分的氧气供应和高生产率。 一次性生物反应器培养系统 在受控培养系统中，例如常见的搅拌罐生物反应器，气体供应自动化控制。 然而，这种控制在普通的实验室细胞培养设备中是不可用的，这些设备主要由易于使用和低成本的设备组成。这些设备中的大多数是表面充气的，因此受到水平液面的限制。 一次性生物反应器是一种一次性的独立培养装置，它是为快速细胞培养而开发的，通过确保充足的氧气供应而无需使用复杂的设备和高搅拌速率。 它易于使用，可实现具有成本效益的实验室规模细胞培养，建议的工作体积为 1 升。 一次性生物反应器的主要特点是集成的膜曝气和搅拌系统，可在细胞培养过程中实现气体传输。
43920编辑于 2022-05-19 - 来自专栏芒果先生聊生信
芒果实验室，细胞冻存不应该成为远行的沙粒
细胞培养绝对是个技术活，跟智商关系不大。如果细胞没养好，不管是细胞系还是原代细胞，都说明没有掌握技巧。 技术活，当然最好有师傅带入门，但是临床医生做科研，哪怕是最简单的细胞培养，也常常要自己摸索，或者是从不是那么专业、规范的师兄师姐那里学习。 细胞培养最好的老师，多是生物背景出身的专职科研人员，而不是医学背景的上级医师们。在细胞培养技术进阶到一定程度，支原体污染是一个难题，还有一个问题是细胞储存问题。
72330发布于 2020-06-24 - 来自专栏量子位
秃如其来的希望！Nature新研究：多能干细胞能形成近乎完整皮肤结构，移植小鼠后成功长出毛发
好消息、好消息，Nature发表的最新论文，带来了生发新希望： 由波士顿儿童医院和哈佛医学院主导的研究团队，成功让由干细胞培养成的人造皮肤，长出了毛发！ ? 这样的实验结果表明，这些由多能干细胞培养出的皮肤类器官，其毛囊经历了类似哺乳动物毛囊的形成过程。 研究人员还发现，这些皮肤类器官在基因表达上具有下巴、脸颊和耳朵皮肤的特征。 小鼠移植 在细胞培养的第140天，研究人员将皮肤类器官移植到了免疫缺陷小鼠背部。 采用免疫缺陷小鼠，是为了避免免疫排斥反应。 55%的移植中，类器官成功长出了2-5mm毛发。 ? 所以多能干细胞培养的人造皮肤方法，或许能让“秃如其来”的朋友，更加安心工作、熬夜和加班。（手动狗头） ?
56020发布于 2020-06-16 - 来自专栏芒果先生聊生信
芒果实验室，293细胞冻存
细胞培养绝对是个技术活，跟智商关系不大。如果细胞没养好，不管是细胞系还是原代细胞，都说明没有掌握技巧。 技术活，当然最好有师傅带入门，但是临床医生做科研，哪怕是最简单的细胞培养，也常常要自己摸索，或者是从不是那么专业、规范的师兄师姐那里学习。 细胞培养最好的老师，多是生物背景出身的专职科研人员，而不是医学背景的上级医师们。在细胞培养技术进阶到一定程度，支原体污染是一个难题，还有一个问题是细胞储存问题。
78720发布于 2020-06-28 - 来自专栏生物信息云
MTT法检测细胞增殖
2.试剂及耗材 CO2细胞培养箱、生物安全柜、倒置显微镜 、低速离心机、酶标仪、8道排枪、培养基 、胎牛血清 、MTT、 DMSO、96孔细胞培养板、胰酶、血细胞计数板等。 ，细胞计数后调整其浓度至5-10×10^4/ml。 （3）5%CO2，37℃培养箱继续培养，每24 h取出一块96孔板检测： a) 每孔加入10 μL MTT溶液（5mg/ml），继续细胞培养箱培养4-6h； b) 小心吸去孔内培养液（用移液器吸取孔内培养液 （4）按照药物作用时间点，每24 h取出一块96孔板检测： a) 每孔加入10 μL MTT溶液（5mg/ml），继续细胞培养箱培养4-6h； b) 小心吸去孔内培养液（用移液器吸取孔内培养液，吸取的时候要注意移液头要紧贴孔内侧壁吸取 /ml），继续细胞培养箱培养4h； b) 小心吸去孔内培养液（用移液器吸取孔内培养液，吸取的时候要注意移液头要紧贴孔内侧壁吸取，不要触碰底部的紫色结晶。
2.8K20发布于 2019-09-17 - 来自专栏LN生物笔记
细胞系、细胞株还在傻傻分不清？ | 这篇文章一次性就让你彻底弄清楚两者的区别
前言 细胞系（cell line）和细胞株（Cell Strain）想必是很多学同学学习细胞培养时所傻傻分不清的两个概念了。 细胞系（cell line）：指原代细胞传代成功后所繁殖形成的细胞群，从而可以继续进行细胞培养并且连续传代。 其实意思就是你做一个细胞培养，经过原代细胞培养成功之后，在你培养瓶里的所有细胞，统称为“细胞系”。
3.4K41编辑于 2023-02-23 - 来自专栏抗体蛋白
蛋白表达筛选｜ CFPS无细胞蛋白表达技术原理与实验流程
由于整个过程不依赖细胞培养，因此可以显著减少实验步骤。二、典型实验流程1 DNA模板准备将目标蛋白编码序列克隆至表达载体，并进行质粒扩增与纯化。 2 配置反应体系反应体系通常包含：细胞裂解液氨基酸混合物能量体系DNA 模板DNA 模板浓度通常控制在：5–20 ng/μL3 体外蛋白表达将反应体系置于恒温条件下孵育：温度：30°C 时间：2–6 四、技术优势与传统细胞表达方法相比，无细胞蛋白表达技术具有以下特点：无需细胞培养 实验周期更短 支持高通量表达筛选 适用于复杂蛋白表达 总结无细胞蛋白表达技术通过在体外体系中重建蛋白翻译机制，为蛋白工程研究提供了一种快速
15310编辑于 2026-03-10 AbMole科研讲堂丨OK-432：驱动NK细胞高效活化与功能成熟的无饲养细胞培养系统
在NK细胞培养体系中，OK432主要作为免疫调节剂发挥作用，通过激活固有免疫信号通路，促进NK细胞的活化、增殖及功能成熟。 传统NK细胞培养方法如K562饲养细胞培养系统，是通过基因工程改造表达4-1BBL和IL-15等膜结合因子的K562细胞作为滋养层，为NK细胞提供持续刺激信号。
19610编辑于 2025-12-02- 来自专栏磁珠分选
Elabscience小鼠骨髓来源树突状细胞培养和鉴定试剂盒精准诱导小鼠 BMDC，筑牢免疫研究基础
内容概要Elabscience 小鼠骨髓来源树突状细胞培养和鉴定试剂盒是一款专为小鼠 BMDC 体外分化、培养与鉴定打造的一站式解决方案，涵盖分化培养、促成熟全套试剂，7~8 天即可获得高纯度成熟 DC 小鼠骨髓来源树突状细胞培养和鉴定试剂盒介绍树突状细胞（DC）是一组不同类型的造血细胞，在先天免疫系统和后天免疫系统之间起着通道的作用。它们起源于淋巴-骨髓造血作用，来源于骨髓。 小鼠骨髓来源树突状细胞培养和鉴定试剂盒优势一站式解决方案：涵盖分化、成熟、鉴定全流程试剂，无需自行搭配，避免试剂兼容问题，降低实验门槛；短周期高效培养：7~8 天即可获得成熟 DC 细胞，较传统方法大幅缩短实验周期 总结Elabscience 小鼠骨髓来源树突状细胞培养和鉴定试剂盒是免疫研究领域的高效实验工具，以一站式、短周期、高稳定为核心优势，实现了 BMDC 从培养到鉴定的全流程覆盖，完美解决传统培养的各类痛点
9710编辑于 2026-02-28 - 来自专栏生物信息云
MTT法测细胞增殖和药物毒性实验protocol
2.试剂及耗材 CO2细胞培养箱、生物安全柜、倒置显微镜 、低速离心机、酶标仪、8道排枪、培养基 、胎牛血清 、MTT、 DMSO、96孔细胞培养板、胰酶、血细胞计数板等。 ，细胞计数后调整其浓度至5-10×10^4/ml。 （3）5%CO2，37℃培养箱继续培养，每24 h取出一块96孔板检测： a) 每孔加入10 μL MTT溶液（5mg/ml），继续细胞培养箱培养4-6h； b) 小心吸去孔内培养液（用移液器吸取孔内培养液 （4）按照药物作用时间点，每24 h取出一块96孔板检测： a) 每孔加入10 μL MTT溶液（5mg/ml），继续细胞培养箱培养4-6h； b) 小心吸去孔内培养液（用移液器吸取孔内培养液，吸取的时候要注意移液头要紧贴孔内侧壁吸取 /ml），继续细胞培养箱培养4h； b) 小心吸去孔内培养液（用移液器吸取孔内培养液，吸取的时候要注意移液头要紧贴孔内侧壁吸取，不要触碰底部的紫色结晶。
11.7K26发布于 2019-09-12 - 来自专栏Chris生命科学小站五年归档
【文献解读】 新型人源胶质母细胞瘤体外类癌模型建立与应用
简单的方法孕育着大大的文章 平时做的原代细胞培养更多的是把细胞做成单独的细胞去p培养，而随着大家认识到肿瘤微环境和间质免疫细胞重要作用后，单独的细胞培养对于研究真实环境来说并不是一个很好的模型。 按照之前，无论是原代细胞培养抑或PDX移植瘤都不能做到高效准确，而这个模型现在看来确实是可以实现的。文章Figure6、Figure7就是这么做的。 这里还要说一下全文给站长最深印象的实验结果。
25110编辑于 2023-02-28 - 来自专栏生命科学
H2DCFDA | ROS 荧光探针检测法
2、工作液的配制：用预热好的无血清细胞培养基或缓冲液 (如 PBS) 稀释储存液，配制终浓度为 5-10 μM 的 H2DCFDA 工作液 (1×)。 c) 阴性对照(选做): 用预热的 1 mL PBS 清洗细胞 2-3 次后，用新鲜制备的 5 mM NAC37℃ 处理 1 小时（或 0.1 mM H2O2 作为阴性对照，37℃ 处理 20-30 分钟 d) 去除培养细胞的培养基直至无残留，每孔添加 1 mL 1×H2DCFDA 工作液，37℃ 细胞培养箱内孵育 30 分钟。 e) 400 g，4℃ 离心 3-4 分钟，沉淀细胞。 g) 加入 1 mL 无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察，也可以用荧光酶标仪或流式细胞仪分析 (Ex/Em=488/525 nm)。 下面图 5a 就可以看出对 H2O2的高选择性。此外，用 H2O2处理细胞，HKPerox-2 的荧光 30 分钟内就可以到达高峰。染色效果看图5c，亮眼的绿色荧光。
1.5K10编辑于 2023-03-10
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