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流式分选后指定细胞亚群的表达量差异(无需单细胞)
但是呢，传统的bulk转录组测序，其实虽然说测序的样品仍然是肿瘤组织，但是它是一个复杂的生态系统，不仅仅是有恶性的肿瘤细胞，还有围绕它的各式各样的免疫细胞，以及以内皮细胞和成纤维细胞为代表的多种基质细胞 其实没有单细胞也是可以研究具体的细胞亚群的表达量差异，那就是流式分选指定细胞亚群，比如： Hepatic CD4+ or CD8+ T-cells of 12 months NASH-diet + 8 更多类似的先分选指定细胞亚群再进行差异表达量分析的研究 比如数据集：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi? 站,https://www.bilibili.com/video/BV1C7411C7ez 大家学习的时候记得发弹幕交流哈 同步查看视频配套代码 ：https://www.jianshu.com/p/5bce43a537fd ATAC-SEQ实战演练的素材 链接：https://share.weiyun.com/5rYmPT1 密码：dr3ub6 包括一些公司PPT，综述以及文献。
87110发布于 2021-03-24 - 来自专栏流式抗体推文
告别杂细胞干扰！Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒，精准富集人初始 T 细胞
内容概要Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒凭借阴性分选技术，可从新鲜或冻存的人 PBMC 样本中快速分离高纯度人初始 T 细胞。 产品介绍Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒是一款操作快速简便的细胞分离产品，核心用于分离人初始 T 细胞。 支持 1 Assay 处理 1×10⁷个原始细胞，分离后细胞纯度可达 95.2%（分选前纯度仅 6.0%），能满足科研对高纯度细胞的需求。 检测原理Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒采用阴性分选技术，通过特异性去除样本中 CD3⁻非 T 细胞、CD45RO⁺记忆 T 细胞等非目标细胞，实现人初始 T 细胞（CD3⁺CD45RA 分选过程中，试剂盒中的特异性抗体与非目标细胞结合，再通过磁珠分离等步骤去除杂细胞，最终保留高纯度、高活性的目标细胞，确保下游实验的稳定性和重复性。
18410编辑于 2025-11-13 - 来自专栏技术文章
告别分选困扰，Elabscience 让记忆 T 细胞分离快人一步～
如何高效分离记忆T细胞？传统分选方法往往需要对细胞进行标记或刺激，可能影响其天然状态与后续功能。 为此，Elabscience®全新推出的人Memory CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒，采用磁珠阴性分选技术，通过去除非目的细胞，从而富集未被标记的目标细胞，分选后可得到一种最接近天然状态、功能完整 产品速览Elabscience®人Memory CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒通过阴性分选法从新鲜人外周血PBMC细胞样本中分离出Memory CD4/CD8 T细胞。 它可以保持目的细胞未受刺激的原始状态，得到的细胞不带有任何抗体和磁珠标记，可直接进行下游应用。产品优势无刺激，分选目的细胞无抗体和磁珠标记，细胞状态不受影响。纯度高，分选后细胞纯度大于85%。 结果展示以上就是Elabscience®人Memory CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒的相关介绍，更多细胞分选试剂盒持续上线中。
11100编辑于 2025-12-31 - 来自专栏流式抗体推文
Elabscience 阴性分选技术！人初始 CD4⁺T 细胞分离一步到位，省时高效
内容概要Elabscience 人初始CD4+T细胞阴性分选试剂盒专为分离人初始 CD4⁺T 细胞设计，适配新鲜或冻存的人 PBMC 样本。 凭借高效阴性分选技术，可实现 96% 以上的高纯度分选，1 次实验能处理 1×10⁷个细胞，且细胞可直接用于下游研究，为免疫相关研究提供可靠工具支持。 传统分选方法存在操作复杂、分选纯度低、细胞活性受损等问题，难以满足高精度科研需求。而精准分离高纯度初始 CD4⁺T 细胞，是开展相关基础研究与临床转化研究的前提，市场对高效、可靠的分选工具需求迫切。 检测原理Elabscience 人初始CD4+T细胞阴性分选试剂盒采用阴性分选技术，通过特异性去除样本中 CD4⁺T 细胞以外的杂质细胞（如 CD8⁺T 细胞、B 细胞、单核细胞等），实现初始 CD4⁺ 药物研发：评估候选药物对初始 CD4⁺T 细胞功能的影响，筛选免疫调节类药物。产品优势高纯度分选：分选后细胞纯度可达 96% 以上，显著优于传统方法，减少杂质细胞干扰。
17610编辑于 2025-11-14 - 来自专栏技术文章
Elabscience 高纯度初始 T 细胞分选试剂盒来破局
Elabscience®全新推出的人naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒，采用磁珠阴性分选技术，无需直接标记人naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞，避免抗体结合导致的细胞激活或表位遮蔽 产品内容Elabscience®人naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒通过阴性分选法从新鲜人外周血PBMC细胞样本中分离出naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞 无刺激，分选目的细胞无抗体和磁珠标记，细胞状态不受影响。纯度高，分选后细胞纯度大于95%。无需分离柱进行分离。实验耗时短，最快15分钟可完成阴性细胞分选。可用于新鲜人PBMC样本或冻存PBMC样本。 图5. 分选人外周血CD3+T细胞后染色CFSE（E-CK-A345），使用Human CD3/CD28 T Cell Activation Bead激活培养3天，检测未激活组和激活组T 细胞的增殖。 KitE-CK-A345EasySort™ Human CD3+T Cell Isolation KitMIH001NEasySort™-5 MagnetEC001Foxp3/Transcription
51910编辑于 2025-11-03 - 来自专栏凋亡检测试剂盒推文
Elabscience 小鼠CD8 T细胞阴性分选试剂盒，助力成果突破
内容概要Elabscience 推出的 EasySort™小鼠 CD8+T 细胞阴性分选试剂盒（货号：MIM003N），凭借阴性分选技术实现小鼠脾脏和淋巴结中 CD8+T 细胞的快速高效分离，分选后细胞纯度高达 检测原理本试剂盒采用阴性分选技术实现 CD8+T 细胞的高效分离。 其核心原理是利用特异性抗体与样本中除 CD8+T 细胞外的其他细胞（如 CD4+T 细胞、B 细胞、单核细胞等）表面的标志分子结合，再通过磁珠（需搭配专用磁分离设备，如 EasySort™-5 Magnet 产品优势高纯度保障：分选后 CD8+T 细胞在 CD45 + 细胞群中占比达 93.4%，远高于分选前的 13.7%，满足高精度实验需求。 细胞活性优异：阴性分选技术不损伤目标细胞，分离后的细胞可直接用于下游培养、染色、功能检测等应用。适配性强：明确适用于小鼠脾脏和淋巴结样本，覆盖免疫研究常用组织来源。
32810编辑于 2025-09-22 - 来自专栏生信喵实验柴
单细胞测序原理
一、细胞捕获分选技术 1.1 细胞分选技术 单细胞测序主要包括以下四个步骤。其中非常关键的一点就是如何进行单细胞的捕获/分选，这是决定单细胞检测成本和通量的关键步骤。 单细胞测序分析流程图 不同单细胞测序平台主要差别也主要在于单细胞捕获分选的方法不同。在细胞分选的方法里，主要包括特异性分选和非特意性分选两类方法。 几种常见单细胞分选技术比较 技术 微吸管分离 激光捕获显微分离 荧光激活细胞分选 抗体磁珠分选 微流控分选 微液滴分选 微孔分选 选择类型 特异性选择 特异性选择 特异性选择 特异性选择 非特异性选择 而且因为检测的细胞数巨大，几乎保证每类细胞至少几十个甚至成百上千个重复。那么每个细胞检测的数据量大概只要 5 万条左右的 reads就足够了。 5.多态率低（Multiplet Rate） 多态率（同一个 GEM 包含 2 个及 2 个以上细胞）低于 0.9%/1000 细胞。
2.7K20编辑于 2022-10-25 - 来自专栏流式抗体推文
Elabscience 人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒，快速分离CD8+T 细胞，直接用于下游实验
内容概要Elabscience 人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒是一款专为生命科学与医学研究打造的高效细胞分离工具。 产品介绍人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒是 Elabscience 品牌推出的核心产品，专注于人初始 CD8+T 细胞的精准分离。 每 1 Assay 可处理 1×10⁷个原始材料细胞，分选后细胞纯度高达 95.4% 以上，远优于分选前 8.4% 的基础比例。 检测原理人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒采用阴性分选技术，通过特异性结合非目标细胞的抗体与磁珠复合物，在磁场作用下将 CD8+T 细胞以外的杂细胞（如 CD56+、CD57+、CD45RO + 细胞等 总结Elabscience 人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒凭借高纯度、便捷性、强兼容性等核心优势，成功解决了传统细胞分选的诸多痛点。
19210编辑于 2025-11-14 - 来自专栏生信学习111
单细胞5 拟时序分析
1 拟时序分析拟时序分析是为了探索自己感兴趣的几种细胞之间的发育关系，一般不是用全部类型的细胞来做的。 "T_cells" "Monocyte" "Endothelial_cells" [5] "Smooth_muscle_cells" "NK_cell" 在做拟时序分析的时候，因为是采用差异基因进行排序的，所以要求是两类细胞或者两类以上（要选择的细胞亲缘关系要近一点，有分化的可能性，完全不挨着的细胞不太行）。 这个细胞发育轨迹图，plot_ordering_genes画的图纵坐标是基因表达量的变异性，,横坐标是每个基因在所有细胞种的平均表达量。 sc_cds <- orderCells(sc_cds)#细胞排序，拟时序分析假设细胞状态的变化是连续的，通过排序可以模拟细胞从一个状态逐渐发展到另一个状态的过程，这样才方便推算分化过程。
76810编辑于 2024-06-26 SEO 关键词优化全套实操技巧（落地版，分选词、布局、收录、排名、长尾 5 大块）
3）Keywords（关键词标签）3～5 个即可，现在搜索引擎权重变低，简单填写不用堆砌。2. 三、内容优化：关键词落地载体围绕长尾词写文章，一篇文章主攻 1 个长尾关键词，不要一篇堆 5 个词内容解决用户搜索疑问：用户搜 “空压机保养周期”，正文直接分月份 / 工况写保养细则原创优先，伪原创修改语序 、替换同义词、补充实测数据，降低重复度定期更新：资讯栏目每周 3～5 篇，稳定蜘蛛抓取四、URL、内链关键词优化URL：拼音 / 英文简写，包含关键词，简短、静态链接优先例：xxx.com/kongyaji
12800编辑于 2026-06-02- 来自专栏单细胞天地
单细胞测序技术在循环肿瘤细胞检测中的应用
单细胞分选和测序分析 分选 传统的单细胞分选方法，如荧光激活细胞分选 (FACS)，不适用于 CTC 单细胞分选。 用于CTC单细胞分选的方法主要有显微操作分选法、微流控技术分选法、DEPArray和Cell Celector分选系统 微量移液器分离（micropipette isolation）涉及使用微机械机械手或视觉镊子完成单细胞分选的高倍显微镜 这种方法已在单细胞水平上用于研究乳腺癌和结直肠癌中的 CTC Cell celector 分选系统是一种自动分选系统，可将稀有细胞从混合细胞群中分离出来。 通过多功能机器人系统自动检索单细胞和细胞克隆，实现单细胞分选，直接机械分离目标细胞或克隆，不影响细胞活力，实时、高精度观察细胞图像进行细胞分选；但是，这种方法很耗时 单细胞全基因组扩增 单个细胞的DNA MALBAC) ：一种线性扩增方法，由于所用 Taq DNA 聚合酶保真度低，该方法检测 SNV 的假阳性率较高（约为 MDA 的 40 倍） 转座子插入线性扩增（LIANTI）：引入了一个特殊设计的Tn5转座子
2.4K20编辑于 2022-03-14 - 来自专栏微生态与微进化
Nature新技术分享：自动化拉曼光谱仪用于活细胞功能分类
结果讨论 1微流体分选、3D聚焦与系统配置 RACS平台使用微流控装置来捕获与移动微生物细胞，用于后续的拉曼光谱测量与细胞分选。 如图3b所示，经过反复测量显示细胞拉曼光谱测量时间越长，PL与PC值越稳定，PC值需要2秒时间测量足以稳定，而PL值需要5秒时间。 根据这个参数，全自动化的RACS平台分选细胞的速度达到200细胞每小时（也即3.3细胞每分钟）。 图2. 微流控装置内的细胞分选操作（a. 接下来评估分选准确率，作者将没有氘标记的大肠杆菌细胞用DAPI染色，并与氘标记的细胞进行1比1混合（附件图2b所示），然后输入平台连续一小时的运行分选，然后检测收集的细胞中DAPI染色细胞（也即未标记细胞 然后将小鼠结肠微生物组的细胞使用葡萄糖在有重水条件下进行培养，也即所有细胞都做氘标记，根据PL>6.14作为判断标记的标准进行分选，如附件图3b所示37%捕获的细胞被成功分选，这个效率可以与人工分选媲美
1.4K30编辑于 2022-05-05 - 来自专栏抗体蛋白
单B细胞筛选加速羊驼VHH发现：Hypercell高通量微流控系统在纳米抗体研发中的应用
本文结合真实药企案例，对Hypercell高通量单细胞分选系统在羊驼VHH纳米抗体发现中的应用流程进行整理，包括羊驼PBMC处理、B细胞激活、单细胞液滴包裹、高通量功能分选、NGS测序以及AbFinder 关键词：单B细胞筛选、单细胞筛选、单B细胞分选、B细胞抗体发现、B细胞抗体筛选、羊驼纳米抗体、单B细胞分选、纳米抗体筛选、VHH抗体发现、抗体药物研发、涛烜Hypercell、纳米抗体快速筛选为什么纳米抗体发现越来越关注单 Hypercell系统：单日分选+一周获得VHH序列涛烜科学推出的Hypercell高通量单细胞分选系统，构建了从羊驼PBMC、B细胞激活、单细胞分选、建库测序到序列分析的完整工作流，可实现单日完成高通量单细胞功能分选 首先，在workflow效率方面，该系统能够实现单日完成单细胞分选，包括：液滴包裹单细胞孵育信号检测高通量分选目标细胞回收整体流程约2周即可完成从PBMC到阳性VHH序列的发现，相比传统方案可明显缩短研发周期 更多关于Hypercell高通量单细胞分选系统、羊驼VHH抗体发现以及单细胞抗体筛选也可参考曼博生物相关技术资料关于技术来源本文基于Hypercell单B细胞分选系统、羊驼VHH抗体发现方案、单细胞抗体筛选系统
12910编辑于 2026-05-19 - 来自专栏单细胞天地
scRNA plus||单细胞结合传统测序技术之路
本文主要思想： bulk测序发现组织特异性，再用单细胞技术追踪到某个细胞亚群（从组织到细胞） 单细胞技术发现细胞亚群，分选后，用bulk测序技术来往下游走。 一般的实验设计是这样的：癌旁和癌组织各取5例，成对取样，建库测序，比对参考基因组，得到基因表达数据和结构信息。最终得到的是癌旁和癌组织有差异的基因（通路），然而并不能知道是哪个细胞类型带来的差异。 利用单细胞技术的分选功能 我们经常在单细胞转录组文章中看到Cell type–specific的XXX，也就是在图谱中找到了细胞类型特异的现象，如某细胞类型专门受某代谢通路的影响，这时候，我们知道了这个信号 ，可以把这类细胞分选出来用传统bulk代谢组学技术来进一步验证它。 这就需要有灵活的单细胞系统，分选成单个细胞后，可以测得到bulk才能测的生物信息。 ?
93421发布于 2021-03-25 - 来自专栏生信技能树
你认为比较单一和纯粹的细胞亚群仍然是有异质性
其单细胞样品制备之前都经过了细胞分选哦： 4 mouse control samples: BM sorted by cKit+ Gr1+; BM, PB, SP sorted by Gr1+. 6 mouse 因为我这方面背景知识不足，所以无法介绍为什么作者选择了 cKit+ Gr1+ 的流式分选。 虽然是经过细胞分选，但是也不可能保证百分百数据都是自己想要的单核/中性粒细胞，可以看到全部的来源于 bone marrow (BM), peripheral blood (PB), and spleen and Elane-) monocytes (Mono) (S100a4 and Ccl9/MIP-1γ) B cells (Cd79a and Cd79b) T cells (Cd3d and Ccl5) 如果看图，就能发现，细胞分选是有效果的，至少保证了绝大部分都是作者想要的 neutrophils (Neu) (S100a8 and S100a9) 单细胞亚群（这里我 就很奇怪，为什么作者不选择S100a8
83220编辑于 2022-03-03 - 来自专栏单细胞天地
单细胞RNA测序揭示了胶质母细胞瘤进展过程中免疫景观的演化
(h) hsEGFR+PDGFRA+和hsEGFR+GAL1+流式分选细胞的批量RNAseq的差异表达基因的热图。 对照组脑天0 n=5，GBM n=8、7和5，对侧n=8、5和5，分别对应于10-15、20-25和>30天。统计分析，相对于对照组脑小胶质细胞（天0）。 (e) EdU+和EdU–流式分选微胶质细胞的差异表达基因的热图。 (f) 流式分选小胶质细胞（EdU+、EdU–）、巨噬细胞和对侧微胶质细胞的转录组的Spearman相关性与指示的RNAseq数据集的相关性。 (g) EdU+和EdU–流式分选小胶质细胞群之间的差异表达基因和GO分析。 (h) 流式分选正常脑小胶质细胞和携带GBM的对侧微胶质细胞之间的差异表达基因和GO分析。
79510编辑于 2024-03-22 - 来自专栏用户7627119的专栏
Nature 子刊：生物信息挖掘单细胞数据金矿
转移至 T 细胞并降低其杀伤功能，为了证明该途径的可行性，我们反复通过流式分选、RNA 荧光原位杂交、免疫组化等验证实验，发现了表达 PSA/KLK3 的 T 细胞，进一步证实肿瘤细胞通过外泌体驯化 T 除了这一发现，我们还注意到 Batch2 样本采用 BD Rhapsody 平台进行单细胞分选时，我们分析存在一群中性粒细胞，而 Batch1 样本采用 10X Genomics 分选平台的数据中没有分析到中性粒细胞的存在 Fig.5 单细胞测序发现临床和影像学无法识别的微转移灶 （图片来源：Nature Cell Biology） 3. Fig.6 aEC 与上皮细胞有强作用关系 （图片来源：Nature Cell Biology） 于是，重新设计 11 例不同时期前列腺癌样本（Batch3），分选出内皮细胞进行单细胞测序，通过拟时序分析发现 我们利用流式分选，证明了大部分 aEC 细胞亚群来自于 CRPC 样本；通过共培养发现 aEC 细胞亚群能够提高前列腺癌细胞的侵袭能力，这些实验都证实了 aEC 这一细胞亚群在前列腺癌发生发展过程中起着重要的作用
56330编辑于 2022-09-21 - 来自专栏生信技能树
单细胞入门必读5篇cns综述
单细胞入门必读5篇cns综述，希望对大家有帮助！ 综述-单细胞转录组学分析细胞通讯 单细胞多组学在解析癌细胞可塑性和肿瘤异质性中的应用 综述：高维单细胞RNA测序数据分析工具（下） 综述：高维单细胞RNA测序数据分析工具（中） 综述：高维单细胞RNA测序数据分析工具 （上） 单细胞RNA-seq数据分析最佳实践（下） 单细胞RNA-seq数据分析最佳实践（中） 单细胞RNA-seq数据分析最佳实践（上） 回顾：单细胞入门-读一篇scRNA-seq综述 单细胞测序技术将彻底改变整个生物科学 一篇文章带你走进单细胞的天地 单细胞转录组分析综述 单细胞转录组方法篇——下 Single cell RNA-seq 方法篇-上 如果不自己亲自研读综述 你指望去哪里获得单细胞转录组技术以及数据分析的基础知识
79431编辑于 2023-09-04 - 来自专栏生信宝典
单细胞转录组基本概念（一）
既然是做单细胞，第一步就是把单个细胞分选出来。分选的方式也比较多，物理切割，酶消化，FACS分选等。假如已经分到了一个单细胞，跟常规的转录组步骤上是一样的。 早期单细胞的分选主要靠人工，用移液管，移液枪或者显微操作去把细胞单个单个的分出来，再放到微孔里一个一个进行反应，或者使用fluidigm的微流控设备或者操作机器人，之后就有了更自动化的设备，使得我们用更低的成本 极限稀释加移液枪分离单细胞；显微操作分选单细胞；流式分选带有表面Marker的单细胞；激光切割实体组织；微流控技术；磁珠捕获，主要用于CTC ? 它的一个优点是可以结合流式细胞荧光分选（FACS, fluorescent activated cell sorting）根据表面Marker分选细胞。因此特别适合分选细胞子集用于测序。 最终用于富集的微孔板是通过倾到5%的琼脂糖凝胶到PDMS微柱模具上生成的。细胞悬液加到凝胶微孔模具上，利用重力使细胞落入微孔，通常一个微孔只能容纳一个细胞，一块板子可以同时捕获约10000个单细胞。
2.5K41发布于 2021-05-27 - 来自专栏单细胞天地
人乳腺癌中成纤维细胞的异质性和免疫抑制微环境研究
结果 流式分选指标，CD45-, EPCAM-, CD31-，去除血细胞、上皮细胞、内皮细胞；成纤维细胞的分群指标： FAP, integrin b1/CD29, aSMA, S100-A4/ FSP1 也就是说 CAF-S1富集的TNBC T 细胞浸润程度更高，同时CD8+ T细胞的减少可能影响TN乳腺癌的预后。 CAF-S1,CAF-S4 的分子水平表征 流式分选出这两个细胞亚群，做RNA测序。 主要涉及到的细胞因子 CCL11, CXCL12, CXCL13, 和 CXCL14), 细胞粘附 (JAM2) 免疫调节功能(TNFSF4/OX40L, PDCD1LG2/PD-L2, DPP4, NT5E CD276/B7H3, NT5E/CD73, 和 DPP4在CAF-S1中高表达，在CAF-S4中没有（图C）。沉默了OX40L后对CD25+FOXP3+ T细胞没影响（图D-F）。 总结 主要用流式分选的方法分出四个细胞亚群。CAF-S1 在免疫抑制过程中有重要角色。CAF-S1能吸引CD4+CD25+ T细胞并促进其分化为CD25+FOXP3 细胞。
1.7K30编辑于 2022-03-14
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