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  • 来自专栏单细胞天地

    流式分选后指定细胞亚群的表达量差异(无需单细胞)

    但是呢,传统的bulk转录组测序,其实虽然说测序的样品仍然是肿瘤组织,但是它是一个复杂的生态系统,不仅仅是有恶性的肿瘤细胞,还有围绕它的各式各样的免疫细胞,以及以内皮细胞和成纤维细胞为代表的多种基质细胞 其实没有单细胞也是可以研究具体的细胞亚群的表达量差异,那就是流式分选指定细胞亚群,比如: Hepatic CD4+ or CD8+ T-cells of 12 months NASH-diet + 8 gradient enrichment and subsequently single-cell sorted (sorted gate: L/D-,CD11b-,CD11c-,CD19-,CD45+,CD4+ IgG, α-PD-1 or α-CD8) strain: C57BL/6 organ: Liver selection marker: L/D-,CD11b-,CD11c-,CD19-,CD45+,CD4+ 更多类似的先分选指定细胞亚群再进行差异表达量分析的研究 比如数据集:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?

    89610发布于 2021-03-24
  • 来自专栏流式抗体推文

    Elabscience 阴性分选技术!人初始 CD4⁺T 细胞分离一步到位,省时高效

    内容概要Elabscience 人初始CD4+T细胞阴性分选试剂盒专为分离人初始 CD4⁺T 细胞设计,适配新鲜或冻存的人 PBMC 样本。 传统分选方法存在操作复杂、分选纯度低、细胞活性受损等问题,难以满足高精度科研需求。而精准分离高纯度初始 CD4⁺T 细胞,是开展相关基础研究与临床转化研究的前提,市场对高效、可靠的分选工具需求迫切。 检测原理Elabscience 人初始CD4+T细胞阴性分选试剂盒采用阴性分选技术,通过特异性去除样本中 CD4⁺T 细胞以外的杂质细胞(如 CD8⁺T 细胞、B 细胞、单核细胞等),实现初始 CD4⁺ 药物研发:评估候选药物对初始 CD4⁺T 细胞功能的影响,筛选免疫调节类药物。产品优势高纯度分选分选细胞纯度可达 96% 以上,显著优于传统方法,减少杂质细胞干扰。 总结Elabscience 人初始CD4+T细胞阴性分选试剂盒以高纯度、易操作、稳性能的核心优势,完美解决了科研中初始 CD4⁺T 细胞分离的关键痛点。

    19310编辑于 2025-11-14
  • 来自专栏流式抗体推文

    告别杂细胞干扰!Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒,精准富集人初始 T 细胞

    内容概要Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒凭借阴性分选技术,可从新鲜或冻存的人 PBMC 样本中快速分离高纯度人初始 T 细胞。 产品介绍Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒是一款操作快速简便的细胞分离产品,核心用于分离人初始 T 细胞。 支持 1 Assay 处理 1×10⁷个原始细胞,分离后细胞纯度可达 95.2%(分选前纯度仅 6.0%),能满足科研对高纯度细胞的需求。 检测原理Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒采用阴性分选技术,通过特异性去除样本中 CD3⁻非 T 细胞、CD45RO⁺记忆 T 细胞等非目标细胞,实现人初始 T 细胞(CD3⁺CD45RA 分选过程中,试剂盒中的特异性抗体与非目标细胞结合,再通过磁珠分离等步骤去除杂细胞,最终保留高纯度、高活性的目标细胞,确保下游实验的稳定性和重复性。

    20510编辑于 2025-11-13
  • 来自专栏技术文章

    告别分选困扰,Elabscience 让记忆 T 细胞分离快人一步~

    而记忆CD4+ T细胞,通常被称为“辅助性T细胞”,它们不直接杀伤敌人,而是免疫反应的“指挥官”和“协调员”。 它们通过分泌特定的细胞因子来激活和指导其他免疫细胞(如B细胞和CD8+ T细胞),是形成有效、持久免疫应答的关键。记忆CD4+ T细胞对维持长期免疫记忆至关重要。 为此,Elabscience®全新推出的人Memory CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒,采用磁珠阴性分选技术,通过去除非目的细胞,从而富集未被标记的目标细胞分选后可得到一种最接近天然状态、功能完整 产品速览Elabscience®人Memory CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒通过阴性分选法从新鲜人外周血PBMC细胞样本中分离出Memory CD4/CD8 T细胞。 结果展示以上就是Elabscience®人Memory CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒的相关介绍,更多细胞分选试剂盒持续上线中。

    14700编辑于 2025-12-31
  • 来自专栏生信学习111

    细胞4

    GSM7306057_sample4_barcodes.tsv.gz"[11] "01_data/sample4/GSM7306057_sample4_features.tsv.gz"[12] "01_ 红细胞基因:在某些情况下,红细胞基因可能在特定类型的细胞(如红细胞)中高度表达,这可能会影响对其他细胞类型基因表达的分析。但是有些测量红细胞基因表达离群值太大或者太小那肯定不对,需要删除这样的。 sample5 sample6 687 622 683 686 677 674 画了核糖体,但是没有用这个,轻微的用了一下红细胞基因4 整合降维聚类分群整合 将高维数据映射到低维空间中聚类分群:聚类分群的目的是将相似的细胞聚集在一起,形成不同的细胞群体或亚群,这些群体可能代表不同的细胞类型或状态。 我理解的就是control中nk和其他细胞的差异基因,和treat和其他细胞之间的差异基因,他俩取交集就是无论在control和treat组中NK和其他细胞都有差异的基因,这个会叫NK和其他细胞的差异保守的基因

    1.2K10编辑于 2024-06-23
  • 来自专栏技术文章

    Elabscience 高纯度初始 T 细胞分选试剂盒来破局

    Elabscience®全新推出的人naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒,采用磁珠阴性分选技术,无需直接标记人naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞,避免抗体结合导致的细胞激活或表位遮蔽 产品内容Elabscience®人naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒通过阴性分选法从新鲜人外周血PBMC细胞样本中分离出naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞 如上图所示,人PBMC细胞使用EasySortTM Human Naïve CD4+ T Cell Isolation Kit(MIH007N)分选Naïve CD4+T细胞后用APC Anti-Human ,分选前后人初始CD4+T细胞CD3+CD4+CD45RA+CD45RO-的细胞纯度分别为18.49%和96.28%。 /CCR7G043H7PEE-AB-F1159D以上就是Elabscience®人naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒的相关介绍,如有问题,欢迎小伙伴们在评论区或后台留言,

    56810编辑于 2025-11-03
  • 来自专栏数据科学(冷冻工厂)

    细胞Seurat - 降维与细胞标记(4)

    这些算法的目标是学习数据集中的底层结构,以便将相似的细胞放在低维空间中。因此,在上面确定的基于图的簇内分组在一起的细胞应该在这些降维图上共同定位。 特别是,这些方法旨在保留数据集中的局部距离(即确保具有非常相似的基因表达谱的细胞共定位),但通常不会保留更多的全局关系。 默认情况下,与所有其他细胞相比,它识别单个簇的阳性和阴性标记(在 ident.1 中指定)。 = c("NKG7", "PF4"), slot = "counts", log = TRUE) FeaturePlot(pbmc, features = c("MS4A1", "GNLY", "CD3E 在此数据集的情况下,可以使用规范标记轻松地将无偏聚类与已知细胞类型进行匹配: new.cluster.ids <- c("Naive CD4 T", "CD14+ Mono", "Memory CD4

    79421编辑于 2024-03-12
  • 来自专栏单细胞天地

    细胞样CD4+ T细胞判定及分析

    ,进行了CIBERSORT分析,两种组织来源都表达了静息CD4+记忆T细胞和单核细胞的基因,而激活的CD4+记忆T细胞和记忆B细胞仅见于主动脉炎。 单细胞分析结果 对分离CD4+ T细胞进行单细胞RNA-seq (scRNA-seq)研究,经过严格的质量控制,保留了680个CD4+ T细胞。 + T细胞(簇0)、tfh样T细胞(簇1)、cycling(簇2和4)和细胞毒性CD4+ T细胞(簇3)。 细胞轨迹从TCF1hi CD4+ T细胞开始,随后分为三个分支,其中两个分支发展为两种不同的效应细胞群——tfh样细胞细胞毒性CD4+ T细胞,第三个分支产生cycling CD4+ T细胞 scTCR-seq CD4+ T细胞群具有干细胞样特征。

    62610编辑于 2024-05-20
  • 来自专栏微生态与微进化

    Nature新技术分享:自动化拉曼光谱仪用于活细胞功能分类

    鞘流技术使细胞集中http://mpvideo.qpic.cn/tjg_3873103208_50000_c4cb00a1015f429481da0bfbf1a66562.f10002.mp4? 4小鼠肠道微生物组中利用粘蛋白微生物的分选 为了展示RACS平台对复杂微生物群落的应用,选择小鼠肠道样品进行测试运行。 小鼠结肠微生物组细胞按照PC>1.1与PL>6.14标准的分选效率 最后,将小鼠结肠微生物组的细胞使用粘蛋白在有重水条件进行培养,使得代谢粘蛋白的细胞被氘标记,使用RACS平台分选了180个细胞(如图4a 4所示)。 在这些基因组中搜寻涉及粘蛋白降解有关的酶(如图4b所示),发现84%的基因组至少能够编码一种能够打破粘蛋白聚糖的酶(如图4c所示)。 图4.

    1.5K30编辑于 2022-05-05
  • 来自专栏流式抗体推文

    Elabscience 人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒,快速分离CD8+T 细胞,直接用于下游实验

    内容概要Elabscience 人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒是一款专为生命科学与医学研究打造的高效细胞分离工具。 产品介绍人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒是 Elabscience 品牌推出的核心产品,专注于人初始 CD8+T 细胞的精准分离。 每 1 Assay 可处理 1×10⁷个原始材料细胞分选细胞纯度高达 95.4% 以上,远优于分选前 8.4% 的基础比例。 检测原理人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒采用阴性分选技术,通过特异性结合非目标细胞的抗体与磁珠复合物,在磁场作用下将 CD8+T 细胞以外的杂细胞(如 CD56+、CD57+、CD45RO + 细胞等 总结Elabscience 人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒凭借高纯度、便捷性、强兼容性等核心优势,成功解决了传统细胞分选的诸多痛点。

    23110编辑于 2025-11-14
  • 来自专栏凋亡检测试剂盒推文

    Elabscience 小鼠CD8 T细胞阴性分选试剂盒,助力成果突破

    内容概要Elabscience 推出的 EasySort™小鼠 CD8+T 细胞阴性分选试剂盒(货号:MIM003N),凭借阴性分选技术实现小鼠脾脏和淋巴结中 CD8+T 细胞的快速高效分离,分选细胞纯度高达 检测原理本试剂盒采用阴性分选技术实现 CD8+T 细胞的高效分离。 其核心原理是利用特异性抗体与样本中除 CD8+T 细胞外的其他细胞(如 CD4+T 细胞、B 细胞、单核细胞等)表面的标志分子结合,再通过磁珠(需搭配专用磁分离设备,如 EasySort™-5 Magnet 产品优势高纯度保障:分选后 CD8+T 细胞在 CD45 + 细胞群中占比达 93.4%,远高于分选前的 13.7%,满足高精度实验需求。 细胞活性优异:阴性分选技术不损伤目标细胞,分离后的细胞可直接用于下游培养、染色、功能检测等应用。适配性强:明确适用于小鼠脾脏和淋巴结样本,覆盖免疫研究常用组织来源。

    35110编辑于 2025-09-22
  • 来自专栏生信喵实验柴

    细胞测序原理

    一、细胞捕获分选技术 1.1 细胞分选技术 单细胞测序主要包括以下四个步骤。其中非常关键的一点就是如何进行单细胞的捕获/分选,这是决定单细胞检测成本和通量的关键步骤。 单细胞测序分析流程图 不同单细胞测序平台主要差别也主要在于单细胞捕获分选的方法不同。在细胞分选的方法里,主要包括特异性分选和非特意性分选两类方法。 步骤 4:每个细胞的 cDNA 完成扩增,并携带这独一无二的接头,等待进行后续测序。 4.细胞可适性高 对细胞大小(直径超过 40um 细胞需要制备成细胞核)及类型无限制。 芯片的管道中可以成功捕获细胞,但也有 35%没有捕获细胞,称为空载; 4、空载的 GEM 并非没有任何结果。

    2.8K20编辑于 2022-10-25
  • 来自专栏单细胞天地

    细胞测序技术在循环肿瘤细胞检测中的应用

    细胞分选和测序分析 分选 传统的单细胞分选方法,如荧光激活细胞分选 (FACS),不适用于 CTC 单细胞分选。 用于CTC单细胞分选的方法主要有显微操作分选法、微流控技术分选法、DEPArray和Cell Celector分选系统 微量移液器分离(micropipette isolation)涉及使用微机械机械手或视觉镊子完成单细胞分选的高倍显微镜 ,一步完成单细胞分选、裂解、扩增,如Fluidigm的C1单细胞放大器,具有高通量(每个芯片可完成96个单细胞扩增)细胞分选),反应体积小(可提高扩增效率,减少试剂消耗),污染少,对测序影响小。 这种方法已在单细胞水平上用于研究乳腺癌和结直肠癌中的 CTC Cell celector 分选系统是一种自动分选系统,可将稀有细胞从混合细胞群中分离出来。 通过多功能机器人系统自动检索单细胞细胞克隆,实现单细胞分选,直接机械分离目标细胞或克隆,不影响细胞活力,实时、高精度观察细胞图像进行细胞分选;但是,这种方法很耗时 单细胞全基因组扩增 单个细胞的DNA

    2.4K20编辑于 2022-03-14
  • 细胞细胞注释要进入AI(GTP-4)时代了吗?

    GPT-4将有可能将手动细胞类型注释过程转换为全自动或半自动过程,人类专家可以提供可选的帮助,以微调GPT-4生成的注释。 通过评估GPT-4与手工注释的差异,发现GPT-4生成的细胞类型注释与人类专家生成的细胞类型注释之间存在高度的一致性。 首先,与其他细胞类型标注方法不同,GPT-4的训练库在很大程度上是未公开的,因此很难明确验证GPT-4生成标注的基础。对GPT-4生成的注释的质量和可靠性进行严格评估可能仍然需要一定的人力。 第三,scRNA-seq数据中的高水平噪声和不可靠的差异基因可能会对GPT-4细胞类型注释产生负面影响。最后,在人工智能的情况下,主要依赖GPT-4进行细胞类型注释可能存在风险。 建议人类专家在进行下游分析之前确认GPT-4生成的细胞类型注释的有效性。

    54710编辑于 2024-03-30
  • 来自专栏抗体蛋白

    单B细胞筛选加速羊驼VHH发现:Hypercell高通量微流控系统在纳米抗体研发中的应用

    本文结合真实药企案例,对Hypercell高通量单细胞分选系统在羊驼VHH纳米抗体发现中的应用流程进行整理,包括羊驼PBMC处理、B细胞激活、单细胞液滴包裹、高通量功能分选、NGS测序以及AbFinder 关键词:单B细胞筛选、单细胞筛选、单B细胞分选、B细胞抗体发现、B细胞抗体筛选、羊驼纳米抗体、单B细胞分选、纳米抗体筛选、VHH抗体发现、抗体药物研发、涛烜Hypercell、纳米抗体快速筛选为什么纳米抗体发现越来越关注单 Hypercell系统:单日分选+一周获得VHH序列涛烜科学推出的Hypercell高通量单细胞分选系统,构建了从羊驼PBMC、B细胞激活、单细胞分选、建库测序到序列分析的完整工作流,可实现单日完成高通量单细胞功能分选 首先,在workflow效率方面,该系统能够实现单日完成单细胞分选,包括:液滴包裹单细胞孵育信号检测高通量分选目标细胞回收整体流程约2周即可完成从PBMC到阳性VHH序列的发现,相比传统方案可明显缩短研发周期 更多关于Hypercell高通量单细胞分选系统、羊驼VHH抗体发现以及单细胞抗体筛选也可参考曼博生物相关技术资料关于技术来源本文基于Hypercell单B细胞分选系统、羊驼VHH抗体发现方案、单细胞抗体筛选系统

    17010编辑于 2026-05-19
  • 来自专栏生信技能树

    你认为比较单一和纯粹的细胞亚群仍然是有异质性

    其单细胞样品制备之前都经过了细胞分选哦: 4 mouse control samples: BM sorted by cKit+ Gr1+; BM, PB, SP sorted by Gr1+. 6 mouse 因为我这方面背景知识不足,所以无法介绍为什么作者选择了 cKit+ Gr1+ 的流式分选。 虽然是经过细胞分选,但是也不可能保证百分百数据都是自己想要的单核/中性粒细胞,可以看到全部的来源于 bone marrow (BM), peripheral blood (PB), and spleen hematopoietic stem progenitor cells (HSPC not including MP) (Cd34 Kit Mpo- and Elane-) monocytes (Mono) (S100a4 如果看图,就能发现,细胞分选是有效果的,至少保证了绝大部分都是作者想要的 neutrophils (Neu) (S100a8 and S100a9) 单细胞亚群(这里我 就很奇怪,为什么作者不选择S100a8

    84620编辑于 2022-03-03
  • 来自专栏单细胞天地

    细胞RNA测序揭示了胶质母细胞瘤进展过程中免疫景观的演化

    (h) hsEGFR+PDGFRA+和hsEGFR+GAL1+流式分选细胞的批量RNAseq的差异表达基因的热图。 统计分析,相对于对照组脑小胶质细胞(天0)。 (e) EdU+和EdU–流式分选微胶质细胞的差异表达基因的热图。 (f) 流式分选小胶质细胞(EdU+、EdU–)、巨噬细胞和对侧微胶质细胞的转录组的Spearman相关性与指示的RNAseq数据集的相关性。 (g) EdU+和EdU–流式分选小胶质细胞群之间的差异表达基因和GO分析。 (h) 流式分选正常脑小胶质细胞和携带GBM的对侧微胶质细胞之间的差异表达基因和GO分析。 图4 GBM中细胞因子、检查点受体及其配体主要在CD45+区域中表达。 (a) 来自GBM流式分选的CD45+和CD45–细胞细胞周期基因的RT-PCR log2FC。

    83010编辑于 2024-03-22
  • 来自专栏单细胞天地

    细胞测序揭示阿尔兹海默症的B细胞相关标志物

    genes (2)结合流式分选结果,分析AD病人外周血细胞比例 AD与Nomral的B细胞比例具有显著差异; AD病人的CDR评分与B细胞比例呈负相关 LpgWIQ.png (3)在AD造模小鼠( (4)进一步缩小B细胞的特征差异基因范围 还是结合scRNA-seq数据:取late-normal,early-normal,late-early的差异分析的上(18)、下(7)调基因交集 Lpz7Pt.png 然后验证其中部分基因在不同样本、不同细胞类型的差异表达情况 4、小结 我目前对于文章的理解是:作者从单细胞测序结果开始,然后重点关注B细胞类型的特征变化。 之后结合流式分选与动物实验进一步说明了B细胞在AD进程中的关键性作用。感觉思路是非常清楚的,而且也很完整。 但也存在一点疑惑:从文章展示的样本scRNAseq细胞类型比例来看,我觉得AD/Normal的B细胞类型比例差异并不明显。可能这也是为什么补充了流式分选的另一个意义吗?

    1.5K60编辑于 2022-03-14
  • 来自专栏用户7627119的专栏

    Nature 子刊:生物信息挖掘单细胞数据金矿

    转移至 T 细胞并降低其杀伤功能,为了证明该途径的可行性,我们反复通过流式分选、RNA 荧光原位杂交、免疫组化等验证实验,发现了表达 PSA/KLK3 的 T 细胞,进一步证实肿瘤细胞通过外泌体驯化 T Fig.4 T 细胞表达前列腺癌特异性抗原 PSA (图片来源:Nature Cell Biology) 那 EV 转移是否会影响附近淋巴结(LNs)以及影响程度如何呢? 除了这一发现,我们还注意到 Batch2 样本采用 BD Rhapsody 平台进行单细胞分选时,我们分析存在一群中性粒细胞,而 Batch1 样本采用 10X Genomics 分选平台的数据中没有分析到中性粒细胞的存在 Fig.6 aEC 与上皮细胞有强作用关系 (图片来源:Nature Cell Biology) 于是,重新设计 11 例不同时期前列腺癌样本(Batch3),分选出内皮细胞进行单细胞测序,通过拟时序分析发现 我们利用流式分选,证明了大部分 aEC 细胞亚群来自于 CRPC 样本;通过共培养发现 aEC 细胞亚群能够提高前列腺癌细胞的侵袭能力,这些实验都证实了 aEC 这一细胞亚群在前列腺癌发生发展过程中起着重要的作用

    58730编辑于 2022-09-21
  • 来自专栏单细胞天地

    人乳腺癌中成纤维细胞的异质性和免疫抑制微环境研究

    结果 流式分选指标,CD45-, EPCAM-, CD31-,去除血细胞、上皮细胞、内皮细胞;成纤维细胞的分群指标: FAP, integrin b1/CD29, aSMA, S100-A4/ FSP1 下图是流式分选和鉴定的结果(图A-C)。图D是CytoSPADE分析流式数据来进一步证明这个分群的合理性。 也就是说 CAF-S1富集的TNBC T 细胞浸润程度更高,同时CD8+ T细胞的减少可能影响TN乳腺癌的预后。 CAF-S1,CAF-S4 的分子水平表征 流式分选出这两个细胞亚群,做RNA测序。 CD25HighCD127lowCD45RAlow T细胞核CAF-S1 共培养后,提高了其对CD4+CD25- 细胞增殖的抑制。CAF-S4则没有这样的效果。 总结 主要用流式分选的方法分出四个细胞亚群。CAF-S1 在免疫抑制过程中有重要角色。CAF-S1能吸引CD4+CD25+ T细胞并促进其分化为CD25+FOXP3 细胞

    1.7K30编辑于 2022-03-14
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