首页
学习
活动
专区
圈层
工具
发布
    • 综合排序
    • 最热优先
    • 最新优先
    时间不限
  • 来自专栏单细胞天地

    流式分选后指定细胞亚群的表达量差异(无需单细胞)

    现在有了单细胞转录组数据的加持,细胞亚型会越来越清晰。如果要整合多组学数据,分类也会更加复杂。 但是呢,传统的bulk转录组测序,其实虽然说测序的样品仍然是肿瘤组织,但是它是一个复杂的生态系统,不仅仅是有恶性的肿瘤细胞,还有围绕它的各式各样的免疫细胞,以及以内皮细胞和成纤维细胞为代表的多种基质细胞 其实没有单细胞也是可以研究具体的细胞亚群的表达量差异,那就是流式分选指定细胞亚群,比如: Hepatic CD4+ or CD8+ T-cells of 12 months NASH-diet + 8 更多类似的先分选指定细胞亚群再进行差异表达量分析的研究 比如数据集:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi? significantly upregulated in LSEC from FFC-fed mice compared to Chow-fed mice (Log2FC: 0.925, p: 3.6x10E

    87110发布于 2021-03-24
  • 来自专栏流式抗体推文

    告别杂细胞干扰!Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒,精准富集人初始 T 细胞

    内容概要Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒凭借阴性分选技术,可从新鲜或冻存的人 PBMC 样本中快速分离高纯度人初始 T 细胞。 产品介绍Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒是一款操作快速简便的细胞分离产品,核心用于分离人初始 T 细胞。 支持 1 Assay 处理 1×10⁷个原始细胞,分离后细胞纯度可达 95.2%(分选前纯度仅 6.0%),能满足科研对高纯度细胞的需求。 检测原理Elabscience 人初始T细胞阴性分选试剂盒采用阴性分选技术,通过特异性去除样本中 CD3⁻非 T 细胞、CD45RO⁺记忆 T 细胞等非目标细胞,实现人初始 T 细胞(CD3⁺CD45RA 分选过程中,试剂盒中的特异性抗体与非目标细胞结合,再通过磁珠分离等步骤去除杂细胞,最终保留高纯度、高活性的目标细胞,确保下游实验的稳定性和重复性。

    18410编辑于 2025-11-13
  • 来自专栏技术文章

    告别分选困扰,Elabscience 让记忆 T 细胞分离快人一步~

    如何高效分离记忆T细胞?传统分选方法往往需要对细胞进行标记或刺激,可能影响其天然状态与后续功能。 为此,Elabscience®全新推出的人Memory CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒,采用磁珠阴性分选技术,通过去除非目的细胞,从而富集未被标记的目标细胞分选后可得到一种最接近天然状态、功能完整 产品速览Elabscience®人Memory CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒通过阴性分选法从新鲜人外周血PBMC细胞样本中分离出Memory CD4/CD8 T细胞。 它可以保持目的细胞未受刺激的原始状态,得到的细胞不带有任何抗体和磁珠标记,可直接进行下游应用。产品优势无刺激,分选目的细胞无抗体和磁珠标记,细胞状态不受影响。纯度高,分选细胞纯度大于85%。 结果展示以上就是Elabscience®人Memory CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒的相关介绍,更多细胞分选试剂盒持续上线中。

    11100编辑于 2025-12-31
  • 来自专栏yw的数据分析

    10X单细胞测序细胞分类

    介绍 文章对已知的多种细胞系混合后进行单细胞10X RNA测序,研究多克隆之间的互作模式。我们这里介绍里面的单细胞测序基因表达细胞分类操作。 & n_cls < 100+param_range) { clust_res <- 4 } else { stop('Not implemented') } 根据之前QC时的标记,选择过质控的细胞 = 'pca', dims = 1:n_pcs, k.param = 10 FindClusters(seuObj, resolution = clust_res, verbose = FALSE) 原文出处 http://www.thecodesearch.com/2021/02/04/10x 单细胞测序细胞分类/

    70210发布于 2021-02-22
  • 来自专栏流式抗体推文

    Elabscience 阴性分选技术!人初始 CD4⁺T 细胞分离一步到位,省时高效

    内容概要Elabscience 人初始CD4+T细胞阴性分选试剂盒专为分离人初始 CD4⁺T 细胞设计,适配新鲜或冻存的人 PBMC 样本。 凭借高效阴性分选技术,可实现 96% 以上的高纯度分选,1 次实验能处理 1×10⁷个细胞,且细胞可直接用于下游研究,为免疫相关研究提供可靠工具支持。 传统分选方法存在操作复杂、分选纯度低、细胞活性受损等问题,难以满足高精度科研需求。而精准分离高纯度初始 CD4⁺T 细胞,是开展相关基础研究与临床转化研究的前提,市场对高效、可靠的分选工具需求迫切。 检测原理Elabscience 人初始CD4+T细胞阴性分选试剂盒采用阴性分选技术,通过特异性去除样本中 CD4⁺T 细胞以外的杂质细胞(如 CD8⁺T 细胞、B 细胞、单核细胞等),实现初始 CD4⁺ 药物研发:评估候选药物对初始 CD4⁺T 细胞功能的影响,筛选免疫调节类药物。产品优势高纯度分选分选细胞纯度可达 96% 以上,显著优于传统方法,减少杂质细胞干扰。

    17610编辑于 2025-11-14
  • 来自专栏生物信息云

    细胞专题 | 10.细胞周期分析

    最重要的两个特点就是DNA复制、分裂成两个一样的子细胞。 在分析单细胞数据时,同一类型的细胞往往来自于不同的细胞周期阶段,这可能对下游聚类分析,细胞类型注释产生混淆;由于细胞周期也是通过cell cycle related protein 调控,即每个阶段有显著的 marker基因;通过分析细胞周期有关基因的表达情况,可以对细胞所处周期阶段进行注释;在单细胞周期分析时,通常只考虑三个阶段:G1、S、G2M。 下面文章中的:sce3 单细胞专题 | 9.如何人工注释单细胞类群? 具体参考文章【单细胞数据分析中scran包进行细胞周期分析时细胞周期marker基因的转换】 ###基因转换 library(clusterProfiler) library(org.Hs.eg.db)

    2.5K31编辑于 2022-11-24
  • 来自专栏技术文章

    Elabscience 高纯度初始 T 细胞分选试剂盒来破局

    产品内容Elabscience®人naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞阴性分选试剂盒通过阴性分选法从新鲜人外周血PBMC细胞样本中分离出naive Pan(CD3)/CD4/CD8 T细胞 该系列产品主要为以下内容:产品名称规格产品货号储存EasySortTM Human Naïve Pan T Cell Isolation Kit10/100/200 AssaysMIH006N2-8°CEasySortTM Human Naïve CD4+ T Cell Isolation Kit10/100/200 AssaysMIH007N2-8°CEasySortTM Human Naïve CD8+ T Cell Isolation Kit10/100/200 AssaysMIH008N2-8°C产品优势样本无需裂红处理,细胞活性更有保证。 无刺激,分选目的细胞无抗体和磁珠标记,细胞状态不受影响。纯度高,分选细胞纯度大于95%。无需分离柱进行分离。实验耗时短,最快15分钟可完成阴性细胞分选。可用于新鲜人PBMC样本或冻存PBMC样本。

    51910编辑于 2025-11-03
  • 来自专栏生信喵实验柴

    细胞测序原理

    一、细胞捕获分选技术 1.1 细胞分选技术 单细胞测序主要包括以下四个步骤。其中非常关键的一点就是如何进行单细胞的捕获/分选,这是决定单细胞检测成本和通量的关键步骤。 单细胞测序分析流程图 不同单细胞测序平台主要差别也主要在于单细胞捕获分选的方法不同。在细胞分选的方法里,主要包括特异性分选和非特意性分选两类方法。 几种常见单细胞分选技术比较 技术 微吸管分离 激光捕获显微分离 荧光激活细胞分选 抗体磁珠分选 微流控分选 微液滴分选 微孔分选 选择类型 特异性选择 特异性选择 特异性选择 特异性选择 非特异性选择 实际上,BDRhapsody 和 10genomics 的区别主要就在用不同的体系承载单细胞分选(前者是蜂窝板,后者是微液滴),其他后续的建库、测序、分析则几乎完全相同。 genomics 单细胞测序平台优势 1.真正单细胞测序 10x genomics技术原理类似于Drop-seq,平台利用微流体“双十字”交叉系统分选单个细胞,通过 barcode 磁珠

    2.7K20编辑于 2022-10-25
  • 来自专栏流式抗体推文

    Elabscience 人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒,快速分离CD8+T 细胞,直接用于下游实验

    内容概要Elabscience 人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒是一款专为生命科学与医学研究打造的高效细胞分离工具。 产品介绍人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒是 Elabscience 品牌推出的核心产品,专注于人初始 CD8+T 细胞的精准分离。 每 1 Assay 可处理 1×10⁷个原始材料细胞分选细胞纯度高达 95.4% 以上,远优于分选前 8.4% 的基础比例。 检测原理人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒采用阴性分选技术,通过特异性结合非目标细胞的抗体与磁珠复合物,在磁场作用下将 CD8+T 细胞以外的杂细胞(如 CD56+、CD57+、CD45RO + 细胞等 总结Elabscience 人初始CD8+T细胞阴性分选试剂盒凭借高纯度、便捷性、强兼容性等核心优势,成功解决了传统细胞分选的诸多痛点。

    19210编辑于 2025-11-14
  • 来自专栏单细胞天地

    细胞测序技术在循环肿瘤细胞检测中的应用

    细胞分选和测序分析 分选 传统的单细胞分选方法,如荧光激活细胞分选 (FACS),不适用于 CTC 单细胞分选。 用于CTC单细胞分选的方法主要有显微操作分选法、微流控技术分选法、DEPArray和Cell Celector分选系统 微量移液器分离(micropipette isolation)涉及使用微机械机械手或视觉镊子完成单细胞分选的高倍显微镜 这种方法已在单细胞水平上用于研究乳腺癌和结直肠癌中的 CTC Cell celector 分选系统是一种自动分选系统,可将稀有细胞从混合细胞群中分离出来。 其中Hydro-Seq利用基于大小的单细胞捕获来防止可能由分子 CTC 选择导致的偏差,实现了高细胞捕获效率,用于分析 10 ml 血液样本中的少量 CTC。 在主要病灶中发现了 10 个突变,称为“早期突变”,在转移病灶中发现了 56 个突变,称为“转移性突变”。然后,又选择了两名外周血中含有超过 20 个 CTC 的转移性前列腺癌患者。

    2.4K20编辑于 2022-03-14
  • 来自专栏抗体蛋白

    单B细胞筛选加速羊驼VHH发现:Hypercell高通量微流控系统在纳米抗体研发中的应用

    本文结合真实药企案例,对Hypercell高通量单细胞分选系统在羊驼VHH纳米抗体发现中的应用流程进行整理,包括羊驼PBMC处理、B细胞激活、单细胞液滴包裹、高通量功能分选、NGS测序以及AbFinder 关键词:单B细胞筛选、单细胞筛选、单B细胞分选、B细胞抗体发现、B细胞抗体筛选、羊驼纳米抗体、单B细胞分选、纳米抗体筛选、VHH抗体发现、抗体药物研发、涛烜Hypercell、纳米抗体快速筛选为什么纳米抗体发现越来越关注单 Hypercell系统:单日分选+一周获得VHH序列涛烜科学推出的Hypercell高通量单细胞分选系统,构建了从羊驼PBMC、B细胞激活、单细胞分选、建库测序到序列分析的完整工作流,可实现单日完成高通量单细胞功能分选 随后研究人员对2257个目标细胞完成Trizol保存,并交付客户开展后续建库测序。后续约10天内完成建库测序与序列验证,共获得抗体序列1020条。 此外,该系统还能够兼容:10xGenomics单细胞测序平台NGS建库分析AbFinder生信工具从而实现从单细胞到序列再到功能验证的一体化工作流。

    12910编辑于 2026-05-19
  • 来自专栏凋亡检测试剂盒推文

    Elabscience 小鼠CD8 T细胞阴性分选试剂盒,助力成果突破

    内容概要Elabscience 推出的 EasySort™小鼠 CD8+T 细胞阴性分选试剂盒(货号:MIM003N),凭借阴性分选技术实现小鼠脾脏和淋巴结中 CD8+T 细胞的快速高效分离,分选细胞纯度高达 检测原理本试剂盒采用阴性分选技术实现 CD8+T 细胞的高效分离。 产品优势高纯度保障:分选后 CD8+T 细胞在 CD45 + 细胞群中占比达 93.4%,远高于分选前的 13.7%,满足高精度实验需求。 细胞活性优异:阴性分选技术不损伤目标细胞,分离后的细胞可直接用于下游培养、染色、功能检测等应用。适配性强:明确适用于小鼠脾脏和淋巴结样本,覆盖免疫研究常用组织来源。 结合亲民的价格与完善的品质保障,无疑是实验室分选小鼠 CD8+T 细胞的优选之选,赶快入手解锁你的免疫研究新突破!

    32810编辑于 2025-09-22
  • 来自专栏生信技能树

    你认为比较单一和纯粹的细胞亚群仍然是有异质性

    +,PTPRC), epithelial/cancer (EpCAM+,EPCAM), stromal (CD10+,MME,fibo or CD31+,PECAM1,endo) 绝大部分文章都是抓住免疫细胞亚群进行细分 其中中性粒细胞(属于髓系)在10x技术里面并不友好,首先10x很难测到 它,其次它也很难跟单核细胞区分开来,如果是单核细胞,目前比较确定的是cd14阳性的经典单核细胞和cd16阳性的单核细胞亚群。 其单细胞样品制备之前都经过了细胞分选哦: 4 mouse control samples: BM sorted by cKit+ Gr1+; BM, PB, SP sorted by Gr1+. 6 mouse 虽然是经过细胞分选,但是也不可能保证百分百数据都是自己想要的单核/中性粒细胞,可以看到全部的来源于 bone marrow (BM), peripheral blood (PB), and spleen 如果看图,就能发现,细胞分选是有效果的,至少保证了绝大部分都是作者想要的 neutrophils (Neu) (S100a8 and S100a9) 单细胞亚群(这里我 就很奇怪,为什么作者不选择S100a8

    83220编辑于 2022-03-03
  • 来自专栏微生态与微进化

    Nature新技术分享:自动化拉曼光谱仪用于活细胞功能分类

    结果讨论 1微流体分选、3D聚焦与系统配置 RACS平台使用微流控装置来捕获与移动微生物细胞,用于后续的拉曼光谱测量与细胞分选细胞的捕获、运输和释放过程通过CCD相机2来监测,拉曼显微镜的载物台可以移动从而实现盖玻片下方10μm处的聚焦点可以进行分选。 图1. RACS平台的设计与工作原理(a. 根据这个参数,全自动化的RACS平台分选细胞的速度达到200细胞每小时(也即3.3细胞每分钟)。 图2. 微流控装置内的细胞分选操作(a. 接下来评估分选准确率,作者将没有氘标记的大肠杆菌细胞用DAPI染色,并与氘标记的细胞进行1比1混合(附件图2b所示),然后输入平台连续一小时的运行分选,然后检测收集的细胞中DAPI染色细胞(也即未标记细胞 然后将小鼠结肠微生物组的细胞使用葡萄糖在有重水条件下进行培养,也即所有细胞都做氘标记,根据PL>6.14作为判断标记的标准进行分选,如附件图3b所示37%捕获的细胞被成功分选,这个效率可以与人工分选媲美

    1.4K30编辑于 2022-05-05
  • 来自专栏生物信息云

    细胞专题 | 1.单细胞测序(10×genomics技术)的原理

    细胞分离:主要包括荧光激活细胞分选法( flow- activated cell sorting ,FACS) 以及微流控分选法( microfluidics) 等。 市场上,较成熟的商业单细胞测序公司主要有 10X Genomis 公司 的Chromium( 液滴法) 及 BD 公司的Rhapsody( 微孔法)。 这里重点介绍 10×genomics技术。 10个碱基长的UMI,有100万种序列的变化(4^10 = 1,048,576),UMI的作用是为了区分哪些哪些reads是来自于一个原始cDNA分子,区分基因片段重复还是duplication及区分是真实的 3' 端文库的构建 通过10×genomics仪器将单个细胞与单个凝胶微珠通过油相混在一起,形成油包水的小微滴,接下来把细胞膜破掉,让细胞当中的mRNA游离出来。 10x Chromium是一种高通量方法,使用UMIs进行定量,适合研究高度异质组织和大量的细胞样本。 后面介绍数据怎么分析............

    47.3K31编辑于 2022-06-13
  • 来自专栏单细胞天地

    10x单细胞测序技术揭示肝脏细胞全景图

    然而人们对构成人体肝脏的细胞类型和免疫微环境知之甚少。作者使用10x单细胞RNA测序手段绘制了人类肝脏细胞全景图,从来自五个人新鲜肝脏组织中分离得到的8444个实质和非实质细胞转录谱。 10x样品处理和cDNA文库制备 将组织破碎获得悬浮细胞溶液后,用台盼蓝染色计数检测细胞活率,在49-90%范围,使用10x Genomics Single Cell 3′ v2 Reagent Kit 作者都是按10x官方推荐的条件进行操作的。测序平台采用的是Illumina HiSeq 2500。 ? 用10x官方的CellRanger产生表达矩阵,接着用R包进行过滤、归一化、聚类。 过滤器阈值通常设定为10%,但是肝细胞线粒体含量很高,因此作者选择了阈值为50%,以优化保留肝细胞而去除死亡和垂死的细胞。作者还过滤除去了双核细胞。 ?

    5K31发布于 2020-03-30
  • 来自专栏生信宝典

    细胞转录组基本概念(一)

    既然是做单细胞,第一步就是把单个细胞分选出来。分选的方式也比较多,物理切割,酶消化,FACS分选等。假如已经分到了一个单细胞,跟常规的转录组步骤上是一样的。 极限稀释加移液枪分离单细胞;显微操作分选细胞;流式分选带有表面Marker的单细胞;激光切割实体组织;微流控技术;磁珠捕获,主要用于CTC ? 它的一个优点是可以结合流式细胞荧光分选(FACS, fluorescent activated cell sorting)根据表面Marker分选细胞。因此特别适合分选细胞子集用于测序。 微流型平台,比如Fluidigm’s C1,提供了一个更加整合的系统,同时可以捕获细胞和完成文库构建的准备过程。比微孔型平台通量更高,但只能捕获10%的细胞,不适合处理稀有细胞细胞量量很少的情况。 根据细胞条码测序错误估计,7-10%的10 bp长度的UMI中至少有一个碱基替换。如果错误没有纠正,将会过高估计转录本的数目。

    2.5K41发布于 2021-05-27
  • 来自专栏单细胞天地

    细胞RNA测序揭示了胶质母细胞瘤进展过程中免疫景观的演化

    (c) 小鼠中早期(10天)和晚期(>30天)Cre病毒注射后的荧光细胞(A和B)或细胞群(C和D)。 (d) EGFR+细胞群上的Monocle3轨迹推断。 (e) EdU+和EdU–流式分选微胶质细胞的差异表达基因的热图。 (f) 流式分选小胶质细胞(EdU+、EdU–)、巨噬细胞和对侧微胶质细胞的转录组的Spearman相关性与指示的RNAseq数据集的相关性。 (g) EdU+和EdU–流式分选小胶质细胞群之间的差异表达基因和GO分析。 (h) 流式分选正常脑小胶质细胞和携带GBM的对侧微胶质细胞之间的差异表达基因和GO分析。 EB,n=3、5、4、5和4,分别对应于天0、10、20、25和30+,NaF,n=2、5、4和3,分别对应于天0、10、20和30+。

    79510编辑于 2024-03-22
  • 来自专栏生信技能树

    细胞分析的10个基础问题

    细胞数据质量控制的核心诉求是什么? 答:去掉各种各样的低质量的细胞 。 单细胞数据质量控制的主要做了什么? 一般是指细胞的过滤,其实是从一个barcode X gene矩阵中过滤掉一部分不是细胞的barcode,如细胞碎片,双细胞,死细胞等。 percent_hb(红细胞基因表达比例):表明红细胞这个单细胞亚群的比例,一般来说不研究红细胞,所以过滤它没有问题。 percent_mito(线粒体基因表达比例):表明细胞状态,值过高可能是濒临死亡的细胞,同样,不能一概而论,有些组织样本的细胞处于高代谢过程,该值会高于正常组织。 关于整不整合数据,时要根据实验设计和单细胞数据本身决定的,其中,在整合数据是为了更好的注释细胞亚群,而不用纠结为什么相同的细胞亚群在UMAP展示的时候相隔千里,当然这可能是因为样本特异性导致的离群细胞亚群

    4.7K32编辑于 2022-07-26
  • 来自专栏用户7627119的专栏

    Nature 子刊:生物信息挖掘单细胞数据金矿

    文章概览 研究结果展示 通过对 Batch1 进行单细胞转录组测序,注释细胞类型主要包括上皮细胞、单核-巨噬细胞系、T 细胞、内皮细胞、成纤维细胞、肥大细胞等主要群体。 转移至 T 细胞并降低其杀伤功能,为了证明该途径的可行性,我们反复通过流式分选、RNA 荧光原位杂交、免疫组化等验证实验,发现了表达 PSA/KLK3 的 T 细胞,进一步证实肿瘤细胞通过外泌体驯化 T 除了这一发现,我们还注意到 Batch2 样本采用 BD Rhapsody 平台进行单细胞分选时,我们分析存在一群中性粒细胞,而 Batch1 样本采用 10X Genomics 分选平台的数据中没有分析到中性粒细胞的存在 Fig.6 aEC 与上皮细胞有强作用关系 (图片来源:Nature Cell Biology) 于是,重新设计 11 例不同时期前列腺癌样本(Batch3),分选出内皮细胞进行单细胞测序,通过拟时序分析发现 我们利用流式分选,证明了大部分 aEC 细胞亚群来自于 CRPC 样本;通过共培养发现 aEC 细胞亚群能够提高前列腺癌细胞的侵袭能力,这些实验都证实了 aEC 这一细胞亚群在前列腺癌发生发展过程中起着重要的作用

    56330编辑于 2022-09-21
领券