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  • 来自专栏生命科学

    细胞凋亡通路 | MedChemExpress

    目前已经描述的细胞死亡方式有十几种,包括调节性细胞死亡如细胞凋亡、焦亡、坏死性凋亡、铁死亡、Entosis、NETosis、Parthanatos、溶酶体依赖性细胞死亡、自噬依赖性细胞死亡、Alkaliptosis 细胞凋亡 细胞凋亡是程序性细胞死亡的最佳表征形式,不会引起炎症反应,对器官发育、组织重塑、免疫反应和肿瘤抑制至关重要。 坏死性凋亡 是一种受调节的细胞死亡形式。它死亡的方式比较有“创意”,既以坏死的形态为特征,如细胞肿胀和破裂,又与细胞凋亡类似,由确定的信号通路控制。 Cell Res. 2019 May;29(5):347-364. 2. Bedoui S, et al. Nat Rev Cancer. 2016;16(8):539-548. 5. Banfalvi G. Methods to detect apoptotic cell death.

    68630编辑于 2023-03-08
  • 来自专栏生物信息云

    TUNEL 检测细胞凋亡(附视频)

    弃去甲醛,用 PBS 洗两次,每次 5min。 封闭 用滤纸擦去周围多余的 PBS, 滴加 3%过氧化氢甲醇, 室温孵育 10min, 消除内源性过氧化物酶干扰后, 弃去将载玻片用 PBS 洗 2 次,每次 5min细胞通透化去尽 PBS 后,滴加 于湿盒中室温孵育 5min。孵育结束后,弃去通透液, PBS 洗两次,每次 5min。 TUNEL 反应 按照试剂盒说明书根据实验实际用量配制好标记反应体系。 在光学显微镜下,结合 3 组结果分析,经过 DAB 和苏木素复染后,凋亡细胞 核被染成棕黄色,正常细胞核呈蓝色。可通过实验组凋亡细胞数判断凋亡水平。 目前流式细胞仪检测细胞凋亡已逐渐成为趋势,利用Annexin V-FITC和PI染色, 流式细胞仪检测早期凋亡率。Annexin V -FITC检测凋亡

    2.8K42发布于 2019-09-17
  • 来自专栏生命科学

    细胞凋亡检测方法有哪些?常用的细胞凋亡检测实验步骤 | MCE

    细胞凋亡的主要特征是:(1) 电子致密核 (早期边缘化);(2) 核碎裂;(3) 完整的细胞膜;(4) 杂乱无章的细胞质、 细胞器;(5) 大而透明的空泡;(6) 细胞表面有气泡。 透射电镜的主要缺点是成本高,一次只能检测一小块区域,难以及早发现凋亡细胞[1][5]。Figure 4. TEM 检测小檗碱 (BBR) (100 μΜ) 和顺铂 (DDP) (5 μg/mL) 诱导 OVCAR3 细胞 24 h 后的细胞凋亡形态[5]。 1.2 细胞核染色分析在凋亡细胞中,质膜通透性和染色质浓缩发生变化,可以使用 DAPI、Hoechst 以及碘化丙啶 (PI) 荧光染料, 通过流式细胞仪或荧光显微镜轻松检测到。Figure 5. 2.2 线粒体膜电位检测细胞凋亡被认为与线粒体通透性孔的开放和电化学梯度的丧失有关,线粒体跨膜电位 (∆ΨM) 的下降是细胞凋亡 的标志,可用于早期细胞凋亡检测。

    1.4K11编辑于 2025-05-19
  • 来自专栏生命科学

    细胞凋亡 VS 细胞焦亡 | MedChemExpress

    细胞坏死过程中发生的核溶解和细胞肿胀破裂不同,细胞凋亡的主要形态学特征为染色质固缩、DNA 片段化、细胞膜起泡、细胞皱缩、凋亡小体的形成等。 一旦 caspase-8 激活,细胞凋亡的执行阶段就被激活。细胞凋亡的内源性途径则是由线粒体事件启动的,由胞内的信号刺激产生,并直接作用于胞内的靶点。 LPS,会激活 caspase-4,5 的活性,从而导致细胞焦亡的发生。 活化后的caspase-1, 4, 5 可以将 GSDMD 的两个结构域切割开,被释放的 N 端结构域会在细胞膜的表面聚集起来,形成孔道。 而炎性 caspases 则主要在细胞焦亡过程中起作用,包括 caspase-1,4,5;此外,小鼠的 caspase-11 也被报道在细胞焦亡中发挥与人类 caspase-4,5 类似的作用。

    80610编辑于 2023-02-22
  • 来自专栏生命科学

    细胞凋亡——如何检测?| MedChemExpress

    细胞凋亡的检测细胞凋亡,我们该如何检测呢?目前至少有数十种检测细胞凋亡的方法,可以大致划分为基于细胞形态、生物学功能和生化标记三大类。 细胞凋亡的主要形态学特征包括:染色质固缩、DNA 片段化、细胞膜起泡、细胞皱缩、凋亡小体的形成等。 细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒采用碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 染色的方法检测细胞周期和细胞凋亡。 Int J Mol Sci. 2020, 21(5): 1612.7. Gu HZ, Lin RR, Wang HC, et al. Oncol Lett. 2017, 13(5): 3032-3038.8. Wei R, Cao J, Yao S.

    90930编辑于 2023-02-06
  • 来自专栏生命科学

    细胞凋亡抑制剂 | MedChemExpress

    AG825 能明显加速人中性粒细胞凋亡。AG-825 是一种潜在的克服锰诱导的神经毒性或阿尔茨海默病 (AD) 发展的药物。 ErbB2 是 ErbB 酪氨酸激酶受体 (RTK) 家族的成员。 在 SKBR3 和 MDCK 细胞中,AG-825 和 GroA 的联合使用显著降低细胞存活率,促使细胞死亡,且对细胞集落形成具有长期影响,显著减少了两个细胞系菌落的总面积,优于两者单一处理效果。 在三维立体培养中,GroA 和 AG-825 均能干扰 SKBR3 细胞非锚定依赖的生长能力,两者共处理干扰效果更好,还能显著减少通过 Cultrex 基底膜侵入的细胞数,但不影响细胞生长形态。 BAY 61-3606 降低神经母细胞细胞中的 ERK1/2 和 Akt 磷酸化。BAY 61-3606 降低 K-rn 细胞裂解物中 Syk 磷酸化。 Bay 61-3606 作用于乳腺癌细胞,通过下调 Mcl-1 促进 TRAIL 诱导的细胞凋亡。 Bay 61-3606 通过两种调节 Mcl-1 的机制使细胞对 TRAIL 敏感。

    52620编辑于 2023-03-02
  • 来自专栏生信菜鸟团

    细胞凋亡—流式细胞仪检测

    细胞凋亡之所以成为人们研究的一个热点,在很大程度上决定于细胞凋亡与临床病毒的密切关系。 因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。下面以检测海马神经元凋亡率为例简单介绍细胞凋亡检测的一般步骤及方法。 具体步骤: 1. 本实验中设有四个对照组,分别为:空白对照、FITC对照、PI对照、FITC and PI对照,其余待测样品均加入10μl Annexin V-FITC和5μl PI,轻轻混匀,避光室温反应15分钟(或37 检测条件:激发光光栅5nm,发射光光栅10nm,测定温度维持在(37±1℃),避光。取细胞悬液,以激发波长340nm和380nm,发射波长510nm进行扫描。 应用该法可降低晚期凋亡和坏死比例,增加早期凋亡细胞比例。 3.

    1.1K10发布于 2021-11-15
  • AbMole| 焦距细胞焦亡、铁死亡与坏死性凋亡

    大多数肿瘤对细胞凋亡具有先天抵抗力,所以诱导细胞死亡机制而非细胞凋亡已逐渐成为一种新的癌症治疗策略。最近,一些研究揭示了不同的细胞死亡机制和抗肿瘤免疫之间的相互影响。 诱导细胞焦亡、铁死亡和坏死性凋亡与免疫检查点抑制剂(ICIs)联合显示出协同增强的抗肿瘤活性,即使在 ICI 抗性肿瘤中也是如此。细胞焦亡、铁死亡和坏死性凋亡有何不同?其相应的ICI分别有哪些? 死亡细胞通过以下两种主要方法激活细胞焦亡:由 caspase 1/4/5/11 调节的 GSDMD(gasdermin D)依赖性激活和由 caspase 3 调节的 GSDME 依赖性激活。 坏死性凋亡和抗肿瘤免疫坏死性凋亡是一种发生在PRK3和RIPK1下游的程序性细胞死亡形式,它们组装成一个称为坏死体的低聚复合体。 尽管肿瘤细胞坏死性凋亡似乎是肿瘤清除的有利因素,但一些经历坏死性凋亡细胞无法解释坏死性凋亡诱导剂的整个抗肿瘤作用,表明坏死性凋亡与抗肿瘤免疫之间存在潜在联系。

    24210编辑于 2025-12-24
  • 来自专栏生命科学

    细胞凋亡的流式检测?实验步骤+结果解读,速戳! | MCE

    案例二为了评估不同浓度的 1,25(OH)2D3 对头肾巨噬细胞 (HKMs) 细胞活力的影响,作者利用 Annexin V-iFluor 488/PI (HY-K1080) 检测细胞凋亡[5]。 流式细胞术检测 1,25-(OH)2D3 对 HKMs 细胞凋亡的影响[5]。a. 1,25(OH)2D3 未处理组活细胞百分比为 24.8%。b. 1 nM 处理组肝细胞百分比为 36.1%。 细胞与 Annexin V-FITC 和 PI 孵育1.1 收集细胞:收集 1-5 × 105 个细胞。悬浮细胞:1000 g 离心 5 min,弃去上清。 注意:进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过 1×106/mL,也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。2. 取 0.5 mL 细胞悬液至无菌的离心管内。3. 400 g 离心 3-5 min;弃上清。 用 1 mL JC-1 工作液重悬细胞,于 37℃,5% CO2 培养箱孵育 15-30 min。5. 室温条件 400 g 离心 5 min;吸掉上清。6.

    1.4K11编辑于 2025-04-16
  • 流式细胞凋亡检测指南 | 实验原理、步骤与结果分析详解

    (避免过度消化损伤细胞膜)-方法二:用预冷的PBS洗涤后,直接用预冷的细胞刮刀轻柔刮下细胞,收集到离心管中。(物理方法可能增加机械损伤)悬浮细胞:直接离心收集细胞(通常300g,5分钟),弃上清。 洗涤:用预冷的PBS轻柔重悬细胞。离心(300g,5分钟),弃上清。重复洗涤一次。 AnnexinV染色:根据试剂说明书推荐量(通常每10⁵-10⁶个细胞加1-5μL),加入FITC-AnnexinV(或其他荧光素标记的AnnexinV)。注意避光操作。轻柔混匀。 (低温减少细胞状态变化,避光防止荧光淬灭)PI染色(可选,但强烈推荐双染):孵育结束前5分钟或孵育结束时,加入PI溶液(终浓度通常1-5μg/mL)。注意避光操作。轻柔混匀。 (活细胞)占绝大多数,Q3(早期凋亡)和Q2(晚期凋亡)比例很低(通常<5-10%),Q1(坏死)非常低。

    80610编辑于 2025-11-13
  • Elabscience一步法TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒:抗淬灭强,长效观察凋亡信号不发愁

    产品介绍一步法 TUNEL 原位细胞凋亡检测试剂盒(红色,Elab Fluor® 594/绿色,Elab Fluor® 488)是 Elabscience 推出的高效凋亡检测工具,专为晚期凋亡细胞的 DNA DNA 片段化作为晚期凋亡的标志性特征 —— 凋亡细胞内激活的特异性 DNA 内切酶会将基因组 DNA 切割为 180~200bp 的阶梯状片段,成为判断细胞凋亡状态的核心依据。 信号检测:标记后的凋亡细胞会发出红色荧光,通过荧光显微镜观察红色荧光信号,即可实现对晚期凋亡细胞的原位定位与检测,常搭配 DAPI(蓝色荧光)进行细胞核复染以辅助判断。 应用领域一步法TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒适配多种样本类型,广泛应用于基础科研与病理研究场景:基础细胞生物学:体外培养细胞(如 Hela 细胞凋亡诱导效率检测、基因敲除 / 过表达对细胞凋亡的影响研究 病理组织分析:石蜡切片(如大鼠心脏、脑、小鼠肺组织)、冰冻切片的凋亡细胞定位,助力疾病相关病理机制探索。毒理学研究:重金属、药物等外源物质诱导的细胞凋亡评估,如福寿螺幼螺毒理实验中的凋亡检测。

    28310编辑于 2025-09-17
  • Annexin V-FITC7-AAD细胞凋亡检测试剂盒原理及应用

    一、细胞凋亡检测的生物学意义细胞凋亡是生物体内一种高度保守的程序性细胞死亡方式,在胚胎发育、组织稳态维持、免疫系统功能调节以及疾病发生发展等众多生理病理过程中发挥关键作用。 二、AnnexinV-FITC/7-AAD检测法的核心原理该检测方法基于细胞凋亡过程中发生的早期关键事件------磷脂酰丝氨酸外翻和细胞膜完整性丧失,实现了对活细胞、早期凋亡细胞及晚期凋亡/坏死细胞的精确区分 5.活细胞分析能力:相较于碘化丙啶等传统染料,7-AAD对早期凋亡细胞的毒性较低,更利于进行活细胞分析。 5.干细胞与发育生物学:研究干细胞分化、组织发育或退化过程中的细胞凋亡事件。 六、总结与展望AnnexinV-FITC/7-AAD细胞凋亡检测试剂盒凭借其基于凋亡早期关键事件的检测原理、清晰的细胞分群能力以及操作的便捷性,已成为细胞凋亡研究中应用最广泛、最可靠的金标准方法之一。

    18010编辑于 2026-02-04
  • 来自专栏纳米药物前沿

    徐兵Angew:酶促自组装的促凋亡多肽选择性杀伤肿瘤细胞

    在活细胞碱性磷酸酶活性谱的研究中发现碱性磷酸酶存在于多种肿瘤细胞(例如HeLa和Saos2)的表面,而不存在于骨髓基质细胞(例如HS-5)的表面。 考虑到凋亡蛋白抑制因子的上调导致了肿瘤对硼替佐米的耐药性,作者在磷酸肽中引入了与凋亡蛋白抑制因子结合的基序(AVPI),能够在细胞内自组装并与凋亡蛋白抑制因子作用。 胶束通过小窝蛋白依赖性的内吞作用进入肿瘤细胞,主要定位于内质网,形成组装体,阻断凋亡蛋白抑制因子,从而显著增强硼替佐米诱导的肿瘤细胞凋亡。 相比之下促凋亡肽和硼替佐米的胶束通过巨胞饮作用进入HS-5细胞,定位于HS-5的溶酶体中,从而阻断了硼替佐米对其靶点(蛋白酶体)的作用,降低了硼替佐米的毒性。 本工作中报道的磷酸肽不仅组装成纳米纤维使癌细胞中的凋亡蛋白抑制因子失活,而且还将正常细胞从抗肿瘤药的副作用中解救出来。

    2.2K10发布于 2021-02-04
  • 来自专栏纳米药物前沿

    陈小元杨振范文培Nat Biomed Eng:膜联蛋白A5在肿瘤中的突释通过阻断凋亡细胞的吞噬作用增强细胞毒性T细胞反应

    膜联蛋白A5通过与垂死的肿瘤细胞上的吞噬标记磷脂酰丝氨酸结合,阻断免疫抑制细胞凋亡并促进免疫刺激性继发性坏死。 在肿瘤小鼠模型中,由于在肿瘤微环境的氧化条件以及肿瘤细胞的胞内还原条件下的二硒键断裂,导致膜联蛋白A5的爆发释放诱导了系统性细胞毒性T细胞反应以及与肿瘤消退相关的免疫记忆,预防了肿瘤复发,并导致约50% 释放的膜联蛋白A5阻止了磷脂酰丝氨酸在垂死的肿瘤细胞上的暴露,从而阻止了巨噬细胞对其识别,并使免疫抑制性细胞凋亡朝着免疫刺激性继发性坏死转移,从而将肿瘤转变成可触发特异性、强大免疫反应的抗原库。 系统给药后,HMSeN–ANX5 @ HOMV引起肿瘤微环境炎症,增强了DC的宿主活化,引发了强大的细胞毒性T细胞免疫应答,并诱导了免疫记忆。 总之,鉴于大多数当前的癌症治疗方法均可诱导细胞凋亡,因此原位治疗性疫苗方法可为开发个性化原位肿瘤疫苗提供强大而直接的通用方法。

    1.7K20发布于 2021-02-04
  • 来自专栏用户10100972的专栏

    文献分享(1)|S63845:肿瘤研究中的高效MCL抑制剂

    1.细胞凋亡的概念细胞凋亡细胞的一种基本生物学现象,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。 3)细胞因子激活类Caspase蛋白酶(cytokineactivation)这一类Caspase包括Caspase-1、4、5和13。 TNFR-1(又称CD120a或p55);2)Fas(又称为CD95或Apo1);3)DR3(死亡受体3deathreceptor3,又称Apo3);4)DR4(死亡受体4,又被称为TRAIL-R1);5) DR5(死亡受体5,又被称为Apo2,TRAIL-R2)。 5.凋亡的检测方法(1)形态学光学显微镜下细胞缩小、核浓缩、细胞周围出现透明圈等现象。相差显微镜下细胞鼓泡,凋亡小体的产生等现象。

    84060编辑于 2022-11-23
  • 来自专栏生命科学

    胞葬作用 (Efferocytosis) :程序性死亡细胞临终前最后一站 - MedChemExpress

    吞噬细胞迁移到凋亡细胞附近后,表面受体识别凋亡细胞的 “Eat me” 信号,与之结合。 凋亡细胞本身也能改变吞噬细胞的免疫代谢 (图 4):(1) 凋亡细胞表面的 PS 与受体结合后能激活或上调 LXR 和 ABCA1,可促进胆固醇的代谢与输出;(2) 凋亡细胞线粒体的脂肪酸氧化可促进抗炎因子 研究者们首先设计了针对细胞凋亡和胞葬作用的传感器。针对细胞凋亡,他们设计了 一种绿色荧光蛋白 (GFP) 探针。 细胞凋亡时表达的 caspases 3/7 能切割 GFP,使之发出荧光 (图 5a);GFP 在溶酶体的酸性条件下易淬灭,经突变 Q204H 基因后, GFP 对 pH 耐受。 最后将这两种传感器结合起来,获得探针 “CharON” (图 5b)。

    2.4K30编辑于 2022-12-23
  • 来自专栏生命科学

    当坏死性凋亡碰撞肿瘤免疫 | MedChemExpress

    具有代表性的 RCD 是细胞凋亡细胞凋亡 (apoptosis) 是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡 (见推文: 细胞凋亡——如何检测?速戳!) Aaes 等人还指出,发生坏死性凋亡的肿瘤细胞可诱导树突状细胞的成熟、细胞毒性 T 细胞的交叉启动以及 IFN-γ 的产生。 2022 年 5 月 25 日,肿瘤免疫领域又有了关于坏死性凋亡的新发现。 但是抑制剂能在某些细胞中诱导细胞凋亡,在区分坏死性凋亡凋亡方面不够特异。因此,需要通过敲除关键蛋白 (如 RIPK3 或 MLKL 阻断坏死性凋亡),补充抑制实验的证据。 HY-L003 细胞凋亡化合物库1,600+ 种凋亡相关产品,主要靶向凋亡信号通路中的主要靶点,用于细胞凋亡信号通路及相关疾病的研究。

    47220编辑于 2023-01-04
  • AbMole丨SN-38:调控DNA损伤、细胞凋亡与免疫应答的多功能分子

    SN-38可通过稳定拓扑异构酶I-DNA断裂复合物,阻止DNA单链断裂的重新连接,进而诱导细胞凋亡[1]。并且,SN-38还可以诱导细胞的氧化应激和线粒体凋亡通路的激活[2]。 SN-38对多种肿瘤细胞系(如HT1080、HCT116、A204等)表现出显著细胞毒性。 Mechanisms of cell death induced by SN-38[5].范例详解Nat Commun. 2019 Dec 20;10(1):5799.华桥大学、福建医科大学的科研团队在上述文章中引用了 :86639-52-3)、YM-155(DNA嵌入剂/cIAP1/2抑制剂, CAS:781661-94-7)、Imatinib(BCR-ABL融合蛋白酪氨酸激酶抑制剂,CAS: 152459-95-5) The Journal of pathology 2023, 259 (4), 428-440.[5] Kciuk, M.; Marciniak, B.; Kontek, R.

    11410编辑于 2026-01-07
  • 来自专栏生信菜鸟团

    细胞死亡途径指南 | Nature Reviews Molecular Cell Biology

    外在凋亡(右)是由位于质膜上的死亡受体(如 TNFR1、Fas 和 TRAIL 受体 DR4 和 DR5)通过其特定配体(分别是 TNF、FasL 和 TRAIL)激活介导的。 坏死性凋亡代表了发现的第一个介导坏死的程序性细胞死亡机制。 在凋亡缺陷条件下,死亡受体包括TNFR1、Fas、DR4和DR5,被其相应的配体激活,可以促进坏死性凋亡。 Para_04 与Fas和TNFR1相似,DD受体DR4和DR5在缺乏caspase活性的细胞中,可以被其特异配体TRAIL激活,进而引发坏死85,86。 Fig. 5: Lipid peroxidation and ferroptosis. 然而,由于我们还没有针对铁死亡的特定生物标志物,因此应谨慎区分脂质过氧化(无细胞死亡)和铁死亡(有细胞死亡)。 Para_03 脂质过氧化水平受细胞氧化还原机制调节,作为一个可逆过程(图5)。

    88110编辑于 2024-12-27
  • 来自专栏单细胞天地

    癌症起源和治疗中的细胞死亡

    文章信息 2020年5月28日,美国芝加哥大学病理系的Andreas Strasser和David L. 他们发现放射线会增加鳞状细胞癌的细胞凋亡率,而卵巢切除术会增加大鼠乳癌的细胞凋亡率,从而预见诱导凋亡的方法可以用来治疗癌症。最初,很少有研究人员注意到他们的工作,但是在80年代后期,情况发生了变化。 当前对细胞死亡的巨大兴趣归因于其分子机制的阐明,人们认识到凋亡是后生动物生命的基本组成部分,而且细胞经历凋亡的方式从蠕虫到哺乳动物都是保守的。 相反,一些细胞通过凋亡作为应激反应来响应药物引起的变化。诸如DNA损伤反应和内质网应激反应等应激反应可以触发细胞凋亡。例如,通过增加促凋亡的BH3蛋白的转录和转录后过程(图3)。 CTL和NK细胞通过穿孔素,成孔蛋白和某些颗粒酶的作用以及FAS配体诱导的FAS介导的细胞凋亡杀死靶细胞。据报道,穿孔素加粒酶介导的细胞杀伤涉及靶细胞中胱天蛋白酶的活化,但非凋亡过程也可能起作用。

    1.6K30发布于 2021-03-10
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