在上文图形化开放式生信分析系统开发 - 3 生信分析流程的进化 讨论了生信分析pipeline的进化,从手动到自动,但仍然停留在终端命令行阶段,为了让更多非生信专业的人能够使用,就要想办法实现生信分析pipeline ${tools.samtools} 分析流程中用的reference文件以及数据库,如 hg19.fa ${ref.hg19} 分析流程中,用到的cutoff值. 如 cnv的cutoff值 ${cutoff.cnv} 分析流程运行时配置的资源,如 线程数 ${threads} 分配内存大小${mem} 变量值的类型: 字符:通用的格式,比较宽松 /节点设计:前文提到,生信分析pipeline其实就是基于文件输入输出的工作流,这里对工作流做了简化,归纳起来工作流中有4种节点。 Task节点,输入文件,运行分析过程,输出分析过程运行结果 task.png task_menu.png 4.
在上文生信分析系统开发 - 5 生信分析流程服务器端运行 解决了设计好的流程在分析服务器上运行的问题,随之而来就衍生出的新需求: 一、批量分析流程的运行顺序 流程输入文件是按照样本编号来匹配运行的,运行顺序就取决于样本信息 样本优先级:此处设计样本录入时候,输入优先级字段范围1-9,数字越大优先级越高 样本顺序:样本默认按照录入的时间先后排序,相同优先级的样本数据,按照录入先后顺序排序运行 二、分析流程的过程控制 强制停止 :开始分析流程之后,可以在任意时间停止分析过程 错误恢复运行:分析流程运行错误,再次运行,可以选择从错误处恢复运行 调试恢复运行:分析结束,修改pipeline参数后,可以选择从任意一点开始重新分析(应用修改后的参数 ) 覆盖运行:分析错误或者正常结束后,重新从头开始运行整个分析流程,并覆盖之前的分析结果 技术实现: 一、批量样本分析流程的运行顺序: 依赖于样本的优先级和输入的顺序先后,每次从数据库取出未完成分析的样本列表 其实就是一个带有优先级参数的先进先出的堆栈 二、分析流程的控制 前文描述了如何将设计好的pipeline运行于服务器,如果要监控整个运行过程,就需要创建一个守护线程,如果用户操作停止分析,这时候守护进程就要终止运行进程
导言 构建生信分析流程是生物信息学从业人员必备的技能之一,对该项能力的评估常常是各大公司招录人员的参考项目之一。 一个好的生物信息分析流程可以让你事倍功半,有效减负,同时也有利于他人重复你的数据分析结果。 根据生信信息学数据分析流程(管道、工作流程序)构建的风格和方式,大致有以下几大流派(注1): 脚本语言流 Common Workflow language 语言流 Makefile流 配置文件流 Jupyter 生信分析流程构建的几大流派 | 脚本语言流 脚本语言流的主要是通过简单的脚本语言(如 shell,R,Python,Perl)运行各类命令行脚本/程序。 前两种(1 和 2)是大多数生物信息学初学者(不具备封装和打包能力)最早开始接触生信分析流程的方式。后两种(3 和 4)是专业人员开发新工具、新流程的必备技能。
导言 构建生信分析流程是生物信息学从业人员必备的技能之一,对该项能力的评估常常是各大公司招录人员的参考项目之一。 根据生信信息学数据分析流程(管道、工作流程序)构建的风格和方式,大致有以下几大流派(注1): 脚本语言流 Common Workflow language 语言流 Makefile流 配置文件流 Jupyter 生信分析流程构建的几大流派 | 脚本语言流 脚本语言流的主要是通过简单的脚本语言(如shell,R,Python,Perl)运行各类命令行脚本/程序。 )最早开始接触生信分析流程的方式。 后两种(3和4)是专业人员开发新工具、新流程的必备技能。
接上两篇内容,本文主要讲述工作中NGS从科研进入医学临床领域,工作中接触到生信流程,以及最终在实现的过程。 接触二代测序,生信分析,那真是打开了一个新世界的大门,各种名次术语满天飞,搞的头晕脑胀。 下面分阶段描述生信分析流程升级/进化的过程: ---- 1.手动命令行运行 经过几个月接触,自学、爬坑,慢慢搞清楚了部分内容,在似懂非懂之间开始了生信流程分析,终于有一天明白过来,这所谓的pipeline 比如其中一个步骤: 生信分析流程的进化_1.png QC 完成后,然后运行下一个步骤: 生信分析流程的进化_2.png 运行模式,一个输入或者多个输入文件,通过软件分析/计算得到一个或者多个输出文件 脚本连续运行 随着熟练程度提高,生信分析上用到的软件/工具也熟悉起来了,但是问题也暴露出来了,简单的一套 GATK Best Practice 肿瘤突变分析流程,加上CNV,SV 分析从 fastq 文件开始到最后得到过滤的 到这里,基本上就达到很多公司的生信自动化分析水平了 6. 然而到这里就足够了么?
开源生信 Python教程 生信专用简明 Python 文字和视频教程 源码在:https://github.com/Tong-Chen/Bioinfo_course_python 一些练习题 给定 aDict[key] = [] aDict[key].append(value) 用到的知识点 提取给定名字的序列 (2分) 用到的知识点 print >>fh, or fh.write() 取模运算,4 (4分) 逻辑与操作符 and 文件中读取的内容都为字符串,需要用int转换为整数,float转换为浮点数 用到的知识点 写程序 transferMultipleColumToMatrix.py 将文件 x4 TCCTACGAGTTGCATGGATTC 简化的短序列匹配程序 (map.py) 把short.fa中的序列比对到ref.fa, 输出短序列匹配到ref.fa文件中哪些序列的哪些位置。 第4列为短序列自身的序列.)。 附加要求:可以只匹配到给定的模板链,也可以考虑匹配到模板链的互补链。这时第5列可以为短序列的名字,第六列为链的信息,匹配到模板链为’+’,匹配到互补链为’-‘。
clusterProfiler 是Y叔写的一个R包,可以用来做各种富集分析,如GO、KEGG、DO(Disease Ontology analysis)、Reactome pathway analysis 以及GSEA富集分析等。 而除了富集分析,他还可以非常方便的对富集分析结果进行可视化。这里使用clusterProfiler进行GO、KEGG以及GSEA富集分析。 source("http://bioconductor.org/biocLite.R") > biocLite('clusterProfiler') 2、ID转换 由于clusterProfiler富集分析推荐的输入文件是 Entrez ID,因此这里提取的是Entrez ID,接下来就可以进行富集分析了: # ========================================================
SCIwork\\F20ELFN1\\COAD') load('exp.rda') count_matrix = as.data.frame(assay(data)) count_matrix[1:4,1 :4] fpkmToTpm <- function(fpkm) { exp(log(fpkm) - log(sum(fpkm)) + log(1e6)) } expr <- as.data.frame
赋值x<- 1+2<-赋值符号删除变量rm(x)rm(list=ls()) #删除所有变量列出历史命令history清空控制台ctrl+l
生信论文的套路 ONCOMINE从全景、亚型两个维度做表达差异分析; 临床标本从蛋白水平确认(或HPA数据库),很重要; Kaplan-Meier Plotter从临床意义的角度阐明其重要性; cBio-portal 数据库做基因组学的分析(机制一); STRING互作和GO/KEGG分析探讨可能的信号通路(机制二); TISIDB/TIMER分析肿瘤免疫特征(机制三)。 差异分析,无论是Oncomine,GEPIA,还是UALCAN、HPA数据库,都不需要R语言编写代码,容易上手,基本上一个星期甚至更短的时间就可以搞定,属于菜鸟级别生信操作。并没有想象中那么难。 生存分析是生信论文中经常出现的表型,也就是说基因在正常和肿瘤组织中表达的差异,与生存率的指标密切相关。如A基因在肿瘤中表达明显上调,生存率显著下降,这就是非常明确的相关性。 生存分析是非常重要的表型,诸多文章均有介绍。这里,我们对生存分析的纯生信数据库进行总结,果友们在选择时也可以作为参考。
好在时至今日,已经有很多科学家开发了非常多优秀的算法及软件,很多时候我们要做的是怎么将这些软件串联起来并构建成生信分析流程,而这项技能通常是各大公司考核应聘者的项目之一。 这种理念是我们最直观的分析逻辑,也是最常用的流程框架。通常,生信刚入门的同学们会选择这种方式,简单而暴力;段位较高的同学,则会选择将分析内容进行包装,然后提供多个参数选择,增加流程灵活性。 大部分时候,这样都会满足我们分析需求,但是其作为一个生信流程有着严重的缺点就是缺乏重入性(reentrancy),即当流程在运行过程中,很容易因为某些不知名的原因而发生中断,而普通的脚本流程只能是从头来过了 4. ,那么就可以使用Implicit/Explicit类的流程,如:Snakemake、Nextflow等,而这一类的流程也比较适合刚入门生信的小伙伴们去尝试; 如果是需要进行高性能流程开发,致力于解决特定的生物学问题
源自生信星球,由于有R基础,内容1、2、3跳过了基础代码1、显示文件列表(右下角窗口file直接有显示,在R中其实不那么重要)dir()list.files()图片2、显示历史命令(右上角history
在上文图形化开放式生信分析系统开发 - 4 生信分析流程的图形化设计 讨论了生信分析pipeline的图形化,如何用图形的方式显示生信pipeline,但是pipeline脚本按照变量的形式保存之后,如何运行 本程序作为控制端,可以和分析端部署在一台机器,也可以通过联网方式连接。 综合考虑,结合软件设计目标,这里选择远程模式 运行服务器节点: 服务器节点信息: 经常手动分析脚本的朋友大家的习惯可能是,ssh远程登录Linux服务器,在shell控制台输入各种脚本,软件。 SliverWorkspace_V2.1.pdf 首先这里实现了,服务器账户信息的管理,账户、主机名、端口、密钥、密码,这些信息为了保证安全,需要二次加密,不能将密码明文保存在数据库中,一旦泄漏危害巨大 服务器信息2.png 针对分析流程 运行完成后服务器端推送信息到控制端,判断是否符合要求,输出文件是否存在 运行失败后服务器端推送信息到控制端,显示错误信息,错误日志,便于生信开发人员查找错误 统计每一个分析步骤的运行时间,便于统计分析
欢迎关注R语言数据分析指南 加载R包 library(WGCNA) library(tidyverse) library(cowplot) 导入数据 gene_exp <- read.table(file signed saveTOMs = TRUE, saveTOMFileBase = "blockwiseTOM", # 聚类并划分模块 # deepSplit = 0, # 0|1|2|3|4,
今天的学习内容: 1.安装R(基础)和Rstudio(人性化一些的界面) 2.粗略了解R语言是什么,干什么的,认识Rstudio的工作界面 3.学会外观设置和基本操作 4.完成第一个R做的图 如果已经安装或者基础较好 3.加减乘除 1+2 回车 4.赋值 赋值符号用<-,这是小于号加上减号,也可以按Alt加上减号 x<- 1+2 意思是把1+2的运算结果赋值给x, 赋值后,x会显示在右上角的框,Environment 里的Value列表里 直接输入x 回车,就会把x的值(3)打印到控制台上,前面的那个[1]是结果的第一个,不用管他。 5.删除变量 a<-3 b <- 1 c <- 4 u <- 5+6 rm(b) rm(u,c) rm(list = ls())#清空所有变量 代码可以复制,更推荐的方式是用键盘上q前面的那个tab 7.列出历史命令 history() 相当于鼠标单击右上角的history标签 当你双击某个命令,他就会跳到你的控制台大于号后面了,可以修改后运行。 8.清空控制台 快捷键ctrl+l
生信论文的套路 ONCOMINE从全景、亚型两个维度做表达差异分析; 临床标本从蛋白水平确认(或HPA数据库),很重要; Kaplan-Meier Plotter从临床意义的角度阐明其重要性; cBio-portal 在差异分析的前提下,表型分析成为重点内容,也是可以玩出花样的地方。 生存分析是非常常见的表型分析。与生存分析相比,相关性分析是另外一个常见的表型分析。 免疫浸润分析比生存分析、差异分析和相关性分析难度更大,因为免疫学是不断延伸、拓展的学科,并不断从理论走向应用、临床,兼有科学性和技术性,比如实验中已经普遍应用的免疫印迹(WB),流式分析,免疫组化和免疫荧光等等 生信分析中,有一种算法叫反卷积分析,英文名叫Deconvolution。 生信开发人员可以先通过预设一个优秀的数据训练集(训练集主要包含了每种不同免疫细胞的基因表达特征),然后通过反卷积算法推算出这个整体样本中究竟有哪些免疫细胞。
每月一生信流程栏目灵感来自于《铁汉1991》博客的《每日一生信》,他那个时候介绍的主要是生信基础知识,包括数据结构,数据格式,数据库资源,计算机基础等等,所以每天都可以进步,每天都有成果。 这些基础知识已经被分享的七七八八了,所以我这里推陈出新,来一个每月一生信流程,陪生信技能树的粉丝们一起进步! image.png 不同数据变换公式的差异 学习这样的流程是需要一定背景知识的 首先是LINUX学习 我在《生信分析人员如何系统入门Linux(2019更新版)》把Linux的学习过程分成6个阶段 , 第4阶段:高级目录管理:软硬链接,绝对路径和相对路径,环境变量 第5阶段:任务提交及批处理,脚本编写解放你的双手 第6阶段:软件安装及conda管理,让linux系统实用性放飞自我 然后是R学习 我在在生信分析人员如何系统入门 生信小白的RNA-seq实战历程 RNA-seq数据分析指南 后记 听说隔壁openbiox团队在组织翻译这个bioconductor流程系列,而且还是由我们生信技能树元老-思考问题的熊领头,希望他们的翻译成果早日出版
单基因生信分析流程(1)一文解决TCGA数据下载整理问题 单基因生信分析流程(2)一文解决差异分析和基因相关分析问题 本文目的 学会如何使用差异分析 学会绘制火山图和热图 学会如何求取相关基因 第一招: 差异分析 差异分析步骤总结 (1)读取基因表达矩阵 (2)根据基因表达量设置样本分组 (3)设置差异倍数、生成差异分析结果 (4)绘制火山图和热图 加载所必须的包 # ============== ======================= 设置分组,我们根据ERBB2基因的表达中位值,将样本分为ERBB2高表达组和ERBB2低表达组,通过求两组样本的差异基因,来对ERBB2的生物学功能进行分析
(唯一不足是Conda安装的singularity不是最新版本) conda create -n singularity singularity=3.8.6 -y 4生信分析中为什么使用Singularity Singularity 容器可以将软件及其依赖项打包在一起,确保分析环境的一致性,无论是在本地机器、服务器还是云平台上。 这种高度的移植性确保了生物信息学分析可以轻松地从一个计算环境迁移到另一个,无论是从个人电脑到云平台,还是在不同的研究机构之间共享。 /ubuntu.sif 创建容器 主要分为4步 创建容器沙盒:沙盒是一个可写的容器目录。通过创建沙盒,可以轻松地更改容器内部的文件系统,就像在一个常规的目录中一样。 singularity build --fakeroot test.sif test.def ## 运行 singularity run test.sif 示例演示 运行输出 6来看一个实例 刚好前段时间生信技能树有发一个推文介绍了中国人群的肝癌多组学队列研究
以iris内置数据集画箱线图,以length为纵坐标,species为横坐标2:字体设置学到新的知识跳转以后可自行修改,蛙去~牛啊生信星球公众号