▐ 活性氧 (ROS)【定义】: 活性氧 (Reactive oxygen species, ROS),细胞正常代谢的副产物,氧的部分还原代谢产物,是源自 O2 且比 O2 本身更活泼的物质的统称[1] 活性氧的潜在来源[3]。 ▐ 为什么要测活性氧 (ROS) ?ROS 具有强氧化能力,低浓度时发挥复杂的信号传导功能,但在高浓度时对细胞有害。 检测/定量活性氧的方法 (不同环境)[5]。 ROS:•OH检测试剂:HKPerox-1,HKPerox-2在所有活性氧 ROS 中,•OH 被认为是最具活性和最有害的一种。
活性氧代谢失衡,引起细胞损伤和抗性降低,是各类果品腐败的共同问题之一(图1)。如何有效控制各类果品内源活性氧的稳态平衡,已成为果品生物保鲜的一个瓶颈问题。 在Food & Function (1区), Antioxidants (2区)等SCI及一级期刊等学术期刊上发表文章16篇,出版专著1部;申请专利2项。主要研究方向:植物分子遗传学。 在Food & Function (1区), Free Radical Biology and Medicine (2区)、微生物学报等SCI及一级期刊等学术期刊上发表文章64篇,其中被SCI收录的论文 29篇,出版专著2部;申请专利8项。 主要研究细胞内源活性氧代谢调控机制。
如图 3C,SH-SY5Y 细胞中,Erastin 处理会导致细胞中 ROS 活性氧水平增加 (DCFH-DA 活性氧探针检测),但是铁死亡抑制剂 DFO 会显著减少 Erastin 诱导的活性氧增加。 图 3D,Hela 细胞中,用 C11-BODIPY 染料进行脂质活性氧测定,结果表明药物预处理显著增加脂质活性氧的积累。 看完以上文献,小白有了一些想法,他设置了以下分组 (Table 1. 相关产品 Erastin 铁死亡 (ferroptosis) 诱导剂,结合且抑制电压依赖性阴离子通道 (VDAC2/VDAC3)。 H2DCFDA 用于检测细胞内活性氧 (ROS) 水平的探针。 MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报,我们不为任何个人用途提供产品和服务 参考文献 1. Nrf2 represses ER stress-related ferroptosis in renal carcinoma cells via HO-1. Biorxiv 2.
Mn/PSAE可通过类芬顿反应催化细胞内的H2O2转化为·OH,并且也能促进H2O2分解以产生O2,同时通过其类氧化酶活性而不断催化O2转化为细胞毒性·O2-。 因此,Mn/PSAE可以利用这些级联反应以高效产生活性氧(ROS),进而有效地杀死肿瘤细胞。 此外,Mn/PSAE中的非晶态碳也具有优的异光热转换性能,可用于肿瘤光热治疗。 综上所述,Mn/PSAE能够在肿瘤微环境刺激下产生多种活性氧和光热性能,表现出显著的治疗效果。 Yang Zhu. et al.
摄取的胱氨酸被还原为半胱氨酸,参与谷胱甘肽的合成;谷胱甘肽可以在谷胱甘肽过氧化物酶的作用下还原活性氧和活性氮;所以谷胱甘肽在体内是一种重要的抗氧化剂。 (2)生物学特征为铁和活性氧(ROS)聚集,激活丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase; MAPK)系统,通过降低胱氨酸的摄取、耗竭谷胱甘肽,抑制ystem Xc acyl-CoAsynthetase family member 2; ACSF2)以及受代谢、储存基因TFRC、ISCU、FTH1、FTL、SLC11A2的调节。 ③ 活性氧的水平:细胞内活性氧和脂质活性氧通过流式细胞术使用DCFH-DA(表达上调)或C11-BODIPY 荧光探针检测(在铁死亡细胞中,探针会由红色转化为绿色)。 ④ qPCR/Western Blot:检测细胞内与铁死亡相关的因子的变化,例如COX-2,ACSL4,PTGS2,NOX1,GPX4和FTH1等,其中COX-2,ACSL4,PTGS2和NOX1在铁死亡细胞中表达上调
在细胞生物学、疾病机制研究及药物研发等领域,活性氧(ROS)的精准检测是揭示氧化应激相关机制的核心手段。如何精准捕捉ROS的动态变化,成为科研与药物筛选中的关键一环。 1 、活性氧检测应用及方法活性氧(ROS)是一类具有高反应活性的含氧物质,主要包括超氧阴离子(・O₂⁻)、过氧化氢(H₂O₂)、羟基自由基(・OH)和单线态氧(¹O₂)等。 活性氧种类及其细胞内来源[1]2、 ROS检测方法怎么选? Q2:细胞样本本身有荧光对结果有影响吗?请问用荧光酶标仪测出的荧光强度值范围是多少呢?
配制 10 mM 的 H2DCFDA (2,000×),如用 1.03 mL DMSO 溶解 5 mg H2DCFDA。 上述结果表明,自花花粉在大白菜的柱头乳头细胞中触发了高水平的活性氧 (ROS),可能参与自交不亲和 (SI) 的发生。 HKPerox-2:H2O2作为一种稳定的活性氧成分,在氧化损伤和细胞信号转导中也是发挥着很重要作用的。下面图 5a 就可以看出对 H2O2的高选择性。 此外,用 H2O2处理细胞,HKPerox-2 的荧光 30 分钟内就可以到达高峰。染色效果看图5c,亮眼的绿色荧光。使用方法和 H2DCFDA 的差不多。 相关产品 H2DCFDA 用于检测细胞内活性氧 (ROS) 的探针。 HKSOX-1 对超氧阴离子自由基具有极好的选择性和敏感性。
H2O是如何自发变成H2O2的? 水分子转变成过氧化氢,从化学式层面上来看,就是往H2O上加个O,变成H2O2。 但事实上,要在原子层面上打断一个共价键,然后添上去一个氧原子,并非是一件易事。 具体来说,就是电荷会在液体和固体两种材料之间“跳跃”,从而产生不稳定的分子碎片,即活性氧(reactive oxygen species)。 并且这些额外的发现还表明,无论微滴在哪里自然形成(包括在雾和雨滴等),水都可以转化为少量的诸如过氧化氢这类的活性氧。 具体而言,夏天室内空气的湿度会比较高,这就有利于液滴中的活性氧有足够的时间杀死病毒。 相反,人们冬天在室内为了取暖,往往会采取一系列加热的行为,这就会使空气中的湿度降低。 于是,液滴在活性氧起消毒作用之前就蒸发了。 对此,研究团队表示: 这一过程的化学基础,部分解释了为什么病毒性呼吸道疾病具有季节性。
内容概要Elabscience 线粒体超氧化物荧光法测试盒是一款专为活细胞线粒体超氧化物及活性氧(ROS)检测打造的高性能科研工具,凭借特异性靶向、多仪器适配、操作便捷等优势,广泛适用于氧化应激、铁死亡 保存条件灵活,1 周内使用可置于 2-8°C 储存,长期保存(6 个月)需在 - 20°C 避光环境下,有效期长达 6 个月,批间差控制在 6.2%-11.7%,精密度稳定可靠。 线粒体超氧化物是活性氧(ROS)的重要成员,过量产生会引发氧化应激反应,进而导致细胞损伤、铁死亡,甚至诱发代谢疾病、神经退行性疾病等多种病症。 实验中可通过两种激发波长实现不同检测目标:396nm 激发波长可特异性检测线粒体超氧化物,510nm 激发波长则适用于线粒体活性氧(ROS)的检测,实现 “一盒双用”,满足多样化科研需求。
由于sp2富碳杂化有机聚合物溶解度低、生物相容性差、缺乏有效的刺激响应性能,其在导电自愈合水凝胶制备中的应用仍存在一定难度。 谷胱甘肽(GSH)或活性氧(ROS)对水凝胶中碳点的二硒化基团的裂解会引发氢键的形成,从而影响Gel-UPY/dsCD水凝胶的自愈能力、导电性和粘附性。 该传感器基于癌细胞中谷胱甘肽或活性氧对二硒醚的裂解反应。
图:HTH5提高花粉中热诱导磷酸吡哆醛(PLP)含量及降低活性氧(H2O2和MDA)积累水平 生理实验分析表明HTH5通过提高热诱导的吡哆醛磷酸含量来减少高温下活性氧的积累,从而提高水稻花粉的耐热性,达到提高结实率 启动子区域序列分析发现HTH5启动子上游2个单核苷酸变异影响了基因表达量,并且与水稻耐热性多样化相关。
需要注意的是,BODIPY 581/591 C11 对脂溶性膜内各种活性氧 (ROS) 和过氧亚硝酸盐 (ONOO-) 也较为敏感,因此它也可以用于铁死亡细胞中 ROS 和 RNS 的检测。 (2) 染色前用无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液,制备 2-10 μM BODIPY 581/591 C11 工作液(请根据实际情况调整工作液浓度)。2. 1.2 活性氧的检测[20]活性氧(ROS) 在铁死亡过程中不仅促进脂质过氧化和细胞损伤,还抑制抗氧化信号通路,是铁死亡检测的重要生物标志物。 H2DCFDA(DCFH-DA)是一种可渗透细胞的活性氧探针。 (2) 染色前用无血清细胞培养基或PBS稀释储备液,配制成1-10μM的H2DCFDA工作液。(请根据实际情况调整工作液浓度)。2.
癌细胞的氧化还原状态受到活性氧生成和清除的调节,活性氧水平总体高于细胞耐受阈值将导致细胞凋亡或坏死。
铁死亡是依赖铁离子及活性氧诱导脂质过氧化导致的调节性细胞坏死,其在形态学、生物学及基因水平上均明显不同于凋亡、坏死、自噬等其他形式的程序性性细胞死亡。 当 system Xc- 活性被抑制或 GPX4 活性被抑制时,会造成脂质过氧化,并导致活性氧 ROS 的积累,在铁离子的作用下,细胞会发生铁死亡。 目前研究发现,一些其他的信号通路及生命进程也会影响铁死亡的敏感性,如 CoQ10 作为细胞膜上的抗氧化剂,是一种内源性的铁死亡的抑制剂;NADPH 及硒的丰度也会影响铁死亡的敏感性;p53 及 Nrf2 为方便科研研究,MCE 铁死亡化合物库,主要包含一些常用的铁死亡诱导剂及抑制剂,化合物主要靶向 GPX4,system Xc-,ROS,DPP4,p53,Nrf2 等与铁死亡密切相关的靶点,可以用于铁死亡机制及相关疾病的研究 J Hematol Oncol 12, 34(2019). [2] Brent R.Stockwell, José Pedro Friedmann Angeli. et al.
活性氧(ROS)在细胞的生命活动中扮演着极为重要的角色,涉及到细胞的衰老、死亡、癌变。对ROS的检测是许多课题中的关键实验之一。 一、H2DCFDA(DCFH-DA)的机理H2DCFDA(2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯,AbMole,M9096)是一种常用的活性氧(ROS)荧光探针,广泛应用于细胞生物学、生物化学和分子生物学等领域的研究 实验人员在探究铁离子(Fe3+)能否引起细胞氧化应激和铁死亡的实验中,使用了AbMole的H₂DCFDA(DCFH-DA,AbMole,M9096)和JC-1(AbMole,M9724),它们分别被用于检测活性氧 在这项研究中,AbMole的H2DCFDA(DCFH-DA,AbMole,M9096)被用来检测LO2和HSC-T6细胞在H2O2刺激下的氧化水平和微囊系统的保护作用。图 4. , H2O2, or PDA-MCs[3]参考文献[1] Y.
其 “大佬” 地位毋庸置疑,但它的功能状态与线粒体膜电位、线粒体膜通道、线粒体 Ca2+ 浓度、呼吸链复合体活性、活性氧生成以及 DNA 突变密切相关。 它们可以不经泛素化直接与 LC3 结合,从而启动线粒体自噬(图 2)。 在哺乳动物中,这些受体主要包括 Nip3 样蛋白 X (Nip3-like protein X, NIX) 受体、bcl2 相互作用蛋白 3 (BCL2-interacting protein 3, BNIP3 Rotenone 通过促进线粒体活性氧的产生来诱导细胞凋亡 FCCP 线粒体中氧化磷酸化 (OXPHOS) 解偶联剂。 Theranostics. 2023;13(2):736-766. [2] Lemasters JJ.
一个典型的氧化还原平衡模型是:当肿瘤发生时,癌细胞的代谢活性增加,导致活性氧产生增加,随后,激活支持癌细胞增殖、存活和代谢适应的信号通路。 如图 2 所示,肿瘤微环境中的不同细胞类型,包括:基质细胞和免疫细胞等,他们具有不同的代谢需求。肿瘤微环境的营养有限且呈酸性。 Vorasidenib (AG-881)Vorasidenib (AG-881) 是一种口服活性的和透过血脑屏障的 IDH1/2 双重性抑制剂。 Nat Rev Cancer. 2011 May;11(5):325-37. 2. Kim J, DeBerardinis RJ. Sci Adv. 2016 May 27;2(5):e1600200. 8. Martínez-Reyes I, Chandel NS.
. : 347174-05-4分子量:262.35Formula:C15H22N2O2CAS 号:347174-05-4性状:固体体外研究Ferrostatin-1 可防止 erastin 诱导的细胞溶质和脂质 Ferrostatin-1(2 μM;24 小时)可防止大鼠器官型海马切片培养物 (OHSC) 中谷氨酸 (5 mM) 诱导的神经毒性[2]。 Ferrostatin-1 抑制脂质过氧化,但不抑制线粒体活性氧的形成或溶酶体膜通透性[2]。 Ferrostatin-1 在亨廷顿病 (HD)、脑室周围白质软化症 (PVL) 和肾功能障碍的细胞模型中抑制细胞死亡[2]。 在细胞内,尤其是在谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)活性受到抑制或谷胱甘肽(GSH)耗竭的情况下,脂质活性氧(ROS)会大量积累,导致细胞膜损伤,最终引发铁死亡。
图2 常见荧光染料的化学结构三、科研常用荧光染料荧光染料在生命科学和基础医学研究中起到了重要的作用,它们可以染色细胞核、细胞膜和膜性结构、线粒体、溶酶体等,也可以对细胞的状态例如凋亡、活死等进行染色以便于大家分析 图3 Hoechst 33342染色效果图2. 活性氧探针DCFH-DA活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)是机体进行正常有氧代谢的产物,含氧并且性质活泼的一类物质的总称。 包含超活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)是机体进行正常有氧代谢的产物,是含氧并且性质活泼的一类物质的总称。因此具有很高的化学反应活性。
关于 GSH/GPX4 途径System Xc- 是一种广泛分布在磷脂双分子层中的重要的抗氧化体系,由两个亚基 SLC7A11 和 SLC3A2 组成的异二聚体。 活性氧 (ROS) 检测ROS 和脂质 ROS 在铁死亡中起关键作用,文献报道增加的超氧化物歧化酶 (SOD) 可抑制体内的 ROS 水平。 因此 ROS 检测也是常用方法 (活性氧检测探针: ROS 探针大赛,你要的检测方法都在这里!) H2DCFDA可渗透细胞的,用于检测细胞内活性氧 (ROS) 水平的探针。JC-1 试剂盒用于测量线粒体膜电位的荧光探针试剂盒。 Hepatology. 2017 Aug;66(2):449-465. 6. Li L, et, al.