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  • 来自专栏生物信息云

    染色质免疫沉淀(ChIP)实验(附视频)

    染色质免疫沉淀技术是目前唯一研究体内 DNA与蛋白质相互作用的方法。 实验前准备 在实验开始前,先准备好本次实验所需的各种试剂盒和相关常规试剂,如本次实验分装 Pierce Agarose ChIP Kit, 此试剂盒, 提供了简化的方法来实现交联反交联、 蛋白消化、 免疫沉淀和 这时可继续进行接下来的免疫沉淀反应实验,也可以将样品冻存于-80℃中备用。 染色质免疫沉淀反应将上一步骤得到的上清,约 50μl,转移 5μl 至另一新的离心管中作为 Input对照。 DoctorA,您在实验中,以及上个问题中提到的 Input 对照,它是怎么来的,重要性体现在哪里呢? 在进行免疫沉淀前,取一部分断裂后的染色质做 Input 对照。 若想得到一个好的实验结果, 抗体的选择需要注意什么呢? 染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是 ChIP 实验成功的关键。

    2.8K22发布于 2019-09-17
  • 来自专栏生命科学

    蛋白 AG 磁珠免疫沉淀(IP)实验 精选参考文献|MCE

    蛋白 A/G 磁珠为 IP、Co-IP 和 ChIP 实验提供了一种快速便捷的方法。 MCE 蛋白质 A/G 磁珠通常用于从血清、细胞培养上清或腹水中分离抗体,以及从细胞或组织提取物中免疫沉淀和共免疫沉淀抗原。Free Sample (200 μL)限时可申请试用。 功能实验表明,MAGE-C3通过激活上皮间质转化(EMT)促进肿瘤转移。MAGE-C3抑制抗肿瘤免疫并调节T细胞的细胞因子分泌,这意味着免疫抑制功能。 用来自小鼠肝全细胞裂解物的泛Kbhb或泛Kac抗体进行免疫沉淀。赖氨酸β-羟基丁酰化(Kbhb)是由生酮饮食(KD)诱导的翻译后修饰,KD是一种对多种人类疾病具有治疗作用的饮食。 用针对Myc-标签或Flag-标签的抗体免疫沉淀蛋白质提取物,然后用指定的抗体进行免疫印迹。

    37310编辑于 2025-09-10
  • 【免疫学实验】揭秘蛋白互作:免疫沉淀与免疫共沉淀

    一、 免疫沉淀(IP):精准捕获目标蛋白 免疫沉淀是利用抗体从复杂的混合物中分离特定蛋白质的技术。 1. 免疫沉淀与 SDS-PAGE 分析 免疫沉淀法用于从细胞裂解液中富集特定抗原。细胞可通过 ³⁵S-蛋氨酸代谢标记(标记所有新合成蛋白)或 表面碘化/生物素化(仅标记膜蛋白)进行示踪。 最后通过放射自显影(或显色)确定蛋白位置 三、 免疫共沉淀(Co-IP):验证蛋白互作 如果说免疫沉淀是“抓单个”,那么免疫共沉淀就是“抓团伙”。 实验逻辑: 捕获: 在含有潜在复合物的细胞提取物中,使用蛋白A的抗体进行免疫沉淀。 验证: 将沉淀下来的复合物进行电泳和免疫印迹(Western Blot),使用蛋白B的抗体进行检测。 总结 免疫沉淀技术不仅帮助我们纯化和鉴定蛋白质(分子量、等电点),更是通过免疫共沉淀技术,成为了揭示蛋白质之间物理相互作用的金标准实验方法。

    36810编辑于 2025-12-29
  • 来自专栏Hank’s Blog

    4-2 R语言函数 apply

    #apply函数,沿着数组的某一维度处理数据 #例如将函数用于矩阵的行或列 #与for/while循环的效率相似,但只用一句话可以完成 #apply(参数):apply(数组,维度,函数/函数名) > x <- matrix(1:16,4,4) > x [,1] [,2] [,3] [,4] [1,] 1 5 9 13 [2,] 2 6 10 14 [3,] 3 7 11 15 [4,] 4 8 12 16 >

    66110发布于 2020-09-16
  • 来自专栏趣学算法

    数据结构 第4-2讲 双向链表

    数据结构第4-2讲双向链表 链表是线性表的链式存储方式,逻辑上相邻的数据在计算机内的存储位置不一定相邻,那么怎么表示逻辑上的相邻关系呢? 可以给每个元素附加一个指针域,指向下一个元素的存储位置。

    90540发布于 2018-09-13
  • 来自专栏Java

    试题 算法训练 4-2找公倍数

    试题 算法训练 4-2找公倍数 资源限制 内存限制:256.0MB C/C++时间限制:1.0s Java时间限制:3.0s Python时间限制:5.0s 问题描述   这里写问题描述。   

    20310编辑于 2025-01-21
  • 来自专栏生命科学

    MCE | 磁珠 VS 琼脂糖珠

    琼脂糖珠长久以来,多孔的琼脂糖珠(也称琼脂糖树脂)作为免疫沉淀实验中的固相支持物常用的材料 但值得注意的是,在免疫沉淀实验中,抗体的量常常不足以满足琼脂糖珠的饱和荷载量,没有被抗体覆盖的琼脂糖珠的部分则可以自由地结合任何可粘附的物质,这种非特异性结合升高引起背景信号升高,这时,“高荷载量优势” 排除由于微珠本身材质引起的非特异性结合:将裂解样本与微珠单独混合孵育,随后去除微珠并收集上清液,再进行免疫沉淀实验。b. 琼脂糖珠:琼脂糖珠必须通过离心浓缩在管底部,并在每次孵育和洗涤除去上清液,通常需要肉眼识别管底部的琼脂糖珠,因此,每个免疫沉淀实验至少需要使用25-50 μL 的琼脂糖珠。 相反,磁珠免疫沉淀反应不需要离心,配合使用磁性分离架磁性分离,在 30 分钟内即可完成实验,因此可以在较短时间内轻松处理并获得较多样本的分析数据。

    60020编辑于 2023-03-15
  • 来自专栏生命科学

    免疫沉淀常见问题解答 | MedChemExpress

    其次根据实验目的,选择合适的表面活性基团以及由此衍生的偶联方式、蛋白结合量等。 注 1:Co-IP 实验时,常用 NP-40 等非离子型裂解液,以免破坏蛋白-蛋白相互作用。注 2:确保目的蛋白在抗原样品中有较高水平表达。 例如,同型对照抗体 (没有特异靶标的一抗,但在类别和亚型上,其跟实验应用中的靶标一抗一致) 等。 Output:在某些 Co-IP 实验中,实验人员会把 IP 后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测,该对照组称为 output 组。...... 好了,说了这么多,希望本篇对大家有所帮助,祝伙伴们拿到心仪的实验结果。

    71820编辑于 2023-02-03
  • 来自专栏sringboot

    x86汇编加载用户程序-4-2

    索引寄存器的端口号是 0x3d4,可以向它写入一个值,用来指定内部的某个寄存器。比如, 两个 8 位的光标寄存器,其索引值分别是 14(0x0e)和 15(0x0f),分别用于提供光标位置的高 8 位和低 8 位。 指定了寄存器之后,要对它进行读写,这可以通过数据端口 0x3d5 来进行。 高八位 和第八位里保存这光标的位置,显卡文本模式显示标准是25x80,这样算来,当光标在屏幕右下角时,该值为 25×80-1=1999

    92130编辑于 2021-12-06
  • 来自专栏生命科学

    MCE丨重组蛋白常见的融合标签

    相关产品Tag Peptides标签多肽,可用于标签蛋白的竞争性洗脱,可作为相关检测的阳性对照Anti-HA Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 HA 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-c-Myc Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 c-Myc 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-Flag Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 Flag 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。 Anti-GST Magnetic Beads用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 GST 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验

    53310编辑于 2023-03-22
  • 链霉亲和素-生物素系统在免疫沉淀中的应用 - MedChemExpress

    因此 SABS 广泛应用于免疫沉淀 (IP)、蛋白纯化以及成像实验的信号放大,如免疫荧光 (IF)、酶联免疫吸附实验 (ELISA)、原位杂交等实验。 MCE链霉亲和素磁珠在涉及多种应用的 64 篇文献中被引用 (累计影响因子 360+),如免疫沉淀 (IP)、染色质免疫共沉淀 (CHIP)、RNA pull down、蛋白纯化等。 为了验证这一假设,作者使用三种生物素标记的 CnHsf3-线粒体靶向寡核苷酸进行 CHIP 实验。 ▐ 案例 3:RNA 免疫沉淀 (RIP)作者假设 YTHDC1 参与 HaCaT 细胞中 SQSTM1 表达的调节。 RNA 免疫沉淀(RIP)-qPCR 实验表明,YTHDC1 蛋白可以与 SQSTM1 mRNA 相互作用。

    1.9K00编辑于 2024-01-18
  • 来自专栏育种数据分析之放飞自我

    笔记 | GWAS 操作流程4-2:LM模型+数值协变量

    上一篇,我们介绍了数量性状进行GWAS的一般线性模型分析的方法(笔记 | GWAS 操作流程4:LM模型assoc),这里我们考虑一下数字协变量,然后用R语言进行对比。

    1.4K20发布于 2020-05-26
  • 来自专栏生信菜鸟团

    Cell:对亚细胞蛋白质组进行全局表征,发现许多蛋白质是通过其空间分布的变化而非丰度变化来调节的

    所有免疫沉淀和N/O/C分离均使用每个重复107个细胞进行了三次实验。 Para_02 定量分析揭示了每种细胞器免疫沉淀的丰富的蛋白质富集谱(图1F–1L;图S1D;STAR方法)。 线粒体外膜蛋白TOMM20的天然免疫沉淀显示982种蛋白质的富集(富集≥2倍,p值≤0.01,在三次实验中;图1F和1G),其中线粒体蛋白质的富集最大(图1H)。 我们的数据集总共包括8,192个独特的表达基因("猎物",在至少一次免疫沉淀的所有重复实验中被检测到;STAR方法)和8,538个总蛋白质,包括相同基因产物的异构体。 可以在天然免疫沉淀下游进行PTM富集,以提供更多见解。 最后,我们的质谱实验是在大量细胞群体中进行的,无法解析单细胞水平上的蛋白质定位变化。 所有实验均在二级生物安全实验室中进行。

    77210编辑于 2025-02-27
  • 来自专栏cwl_Java

    C++编程之美-数学之趣(代码清单4-2)

    代码清单4-2 struct point { double x, y; }; double Product(point A, point B, point C) { return

    29430编辑于 2022-11-30
  • 来自专栏Android点滴积累

    IOS Widget(4-2):创建可配置小组件(动态修改配置数据)

      上一篇文章,讲解了如果通过配置修改小组件行为,只不过配置数据是写死的,本文将继续探索配置数据的高级用法,配置数据在小组件中动态创建的

    4.1K11发布于 2021-05-10
  • 来自专栏数据科学(冷冻工厂)

    HiChIP 数据分析: 分析简介

    摘要 HiChIP 是一种基于原位 Hi-C 的新型方法,用于分析染色质相互作用,它在流程中加入了一个免疫沉淀 (ChIP) 步骤,以研究由特定蛋白质驱动的染色质结构。 在本文中,我们描述了一种计算流程,用于分析在人类胚胎干细胞中,在热休克处理前后,通过 Rad21(黏连蛋白复合体的一部分)免疫沉淀获得的 HiChIP 数据。 它属于 3C 技术 的一种,并复现了经典的原位 Hi-C 流程,只是在 DNA 消化和连接之后额外增加了一个染色质免疫沉淀 (ChIP) 步骤,从而仅分离并测序与特定蛋白质交联的片段。 尽管具备方法学优势,免疫沉淀步骤的加入会导致测序读取在分布上不均匀,并偏向特定限制性片段,这一点必须在识别局部富集的相互作用(loops)时予以特别考虑。 来自公共 HiChIP 数据集(包含不同实验条件)的原始测序数据,首先使用 HiC-Pro进行处理,该流程对读段对进行比对和过滤。

    48110编辑于 2025-09-17
  • 来自专栏历史专栏

    【愚公系列】2021年12月 攻防世界-进阶题-MISC-072(4-2)

    文章目录 一、4-2 二、答题步骤 1.词频分析 总结 一、4-2 题目链接:https://adworld.xctf.org.cn/task/task_list?

    59120编辑于 2021-12-09
  • 来自专栏AI机器学习与深度学习算法

    机器学习入门 4-2 scikit-learn中的机器学习算法封装

    本系列是《玩转机器学习教程》一个整理的视频笔记。本小节主要介绍使用sklearn实现KNN算法。

    1.1K00发布于 2019-11-13
  • 来自专栏生信技能树

    m6A-Seq数据质量评估:trumpet包

    文献摘要 RNA甲基化免疫沉淀测序(MeRIP-seq或m6A-seq)已被广泛用于分析RNA N6-腺苷甲基化在转录组中的分布。 除此之外,还可以用于其他RNA免疫沉淀测序技术数据评估如m1A-seq, CeU-Seq, Ψ-seq等。 低reads count或比对到特定基因组区域的reads比例差异过大可能与低数据质量有关,这是由于多样本混库测序不平衡、DNA污染或实验过程中的其他偏差造成的。 PCR artifacts 可能进一步加剧了m6 A-seq实验reads覆盖的异质性。 ? 3.reads分布可视化 RNA m6A一般分布在起始密码子和终止密码子附近。 4.使用ESES评估免疫沉淀反应效率 m6A-Seq数据的一个主要评价指标就是免疫沉淀反应效率,只要体现在免疫沉淀信号的富集程度。

    1.8K20发布于 2021-02-03
  • 来自专栏技术开发——你我他

    实验六 异常处理实验

    实验六 异常处理实验 一、实验目的与要求 1、理解异常的概念,掌握Python中重要的内建异常类以及处理异常的几种方式。 二、实验原理 在Python中,程序在执行的过程中产生的错误称为异常,比如列表索引越界、打开不存在的文件等。所有异常都是基类Exception的成员,它们都定义在exceptions模块中。 三、预习与准备 1、提前预习Python异常以及模块的语法知识,实验之前编写好程序代码。 2、练习关于Python异常处理以及模块使用的常见操作。 四、实验过程记载 (对实验的主要过程与步骤进行记载;若有较多的截图或代码,可以单独用附件的形式列出) 实验题1 假设成年人的体重和身高存在此种关系:身高(厘米)-100=标准体重(千克)。 except AssertionError as reason: print(reason) 实验题3 创建一个模块文件,它用于互换两个数的值。

    2.6K30发布于 2020-06-08
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