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人原代肝细胞PHH与肝非实质细胞应用解析：药物代谢、肝毒性检测与MASH模型研究
关键词：人原代肝细胞、PHH、人肝非实质细胞、Kupffer细胞、肝星状细胞、肝内皮细胞、肝细胞培养基、药物肝毒性检测、MASH模型、体外肝脏模型 一、人原代肝细胞选型主要标准人原代肝细胞是药物研发中评估代谢稳定性 三、人原代肝细胞PHH的主要类型与应用场景人原代肝细胞是药物研发中使用广泛的肝脏细胞模型。 图2. 人原代肝细胞培养基清单以冻存人原代肝细胞为例，细胞签收后应立即转移至气相液氮中长期储存，推荐储存温度通常在-135℃至-190℃范围内。 接种后2至4小时可吸出培养液，更换为预热的维持培养基。后续培养过程中通常每天更换新鲜维持培养基，直至实验结束。六、常见问题FAQQ1：人原代肝细胞的供体筛选需要关注哪些信息？ Q2：不同类型人原代肝细胞应该如何选择？
5910编辑于 2026-07-06 - 来自专栏细胞培养
人原代肝细胞长期培养模型比较：HepatoPac、Spheroids与TCS在慢代谢药物ADME研究中的应用解析
摘要：在人原代肝细胞（PrimaryHumanHepatocytes,PHH）相关研究中，传统悬浮人肝细胞（SuspendedHumanHepatocytes,SHH）由于培养时间较短、代谢活性维持周期有限 表2：人血浆和肝细胞中鉴定出的BI425809及其代谢产物。从BI425809的结果可以看出，长期原代肝细胞模型能够在更长时间窗口内维持代谢活性，因此更容易观察到SHH中难以生成的连续代谢产物。 对于需要评估葡萄糖醛酸结合、谷胱甘肽结合、硫酸化或其他结合反应的化合物而言，培养时间更长且功能维持更稳定的人原代肝细胞模型，能够提供比传统SHH体系更丰富的代谢信息。图2：BI-A的预测代谢途径。 图5：LifeNetHealth人原代肝细胞相关产品。八、总结随着慢代谢药物研究、复杂连续代谢研究以及ADME评价需求不断增加，长期原代人肝细胞培养模型正在逐渐成为药物研发中的重要工具。 本文根据人原代肝细胞、三培养系统、药物慢代谢研究等相关应用技术文章、参考文章等公开资料曼博生物整理，用于科学技术研究和相关实验学习参考。文章内容参考链接：人原代肝细胞应用参考资料Kamel,A.
20010编辑于 2026-05-13 - 来自专栏类器官/器官芯片/3D培养
人原代肝细胞3D肝球培养技术解析：LifeNet长期稳定肝球模型在药物代谢与肝脏研究中的应用
2D肝细胞培养？ 图1：人原代肝细胞球体形成示意图。二、LifeNetHealth3D肝球培养方案为何更加关注培养一致性？ 三、人原代肝细胞复苏与接种过程为何对3D肝球形成如此重要？在人原代肝细胞3D培养中，细胞复苏阶段往往是影响最终成球质量的重要步骤之一。 图3：人原代肝细胞及相关培养体系。 相比2D培养，基于人原代肝细胞建立的3D肝球能够更好维持细胞间相互作用、代谢功能以及长期培养稳定性，因此在药物代谢、肝毒性以及疾病模型研究中具有较高应用价值。
16910编辑于 2026-05-14 - 来自专栏类器官/器官芯片/3D培养
肝脏器官芯片用于siRNA/ASO寡核苷酸递送研究
原代人肝细胞在第0天接种到各孔中，每2-3天更换培养基并取样，寡核苷酸在第4天添加一次，或在第4、6、8天添加三次，或用培养基对照处理（图1D）。 在胶原蛋白涂层支架上可生成稳定且有功能的原代人肝细胞，用于评估标记寡核苷酸的摄取情况（图1E）。图1.使用PhysioMimix核心微生理系统生成3D人肝脏微组织。 该原代人肝细胞供体的白蛋白产量维持在20-40μg/天/10⁶个细胞之间，峰值产量通常出现在第6天（图2A）。 使用GalNAc偶联的靶向小干扰RNA处理原代人肝细胞，观察到更大的目标基因（GAPDH）敲低效果（GalNAc-siGAPDH，图2B）。 实验结束时，肝脏微组织仍保持功能性，通过阳性白蛋白染色显示，该染色同时也用于共标记原代人肝细胞（图2C）。如图2C所示，确认了原代人肝细胞在支架孔隙中摄取了Cy5标记的小干扰RNA。
16110编辑于 2026-05-07 - 来自专栏细胞培养
全长Laminin在肝细胞培养与3D肝类器官中的应用：LN521、LN111、LN411促进hPSC来源肝细胞成熟的研究解析
因此，人重组全长层粘连蛋白（laminin）开始受到越来越多关注，并逐渐成为构建高生理相关性培养体系的重要方向。 图2：不同亚型层粘连蛋白laminin针对肝细胞培养的适用场景存在差异。二、LN521、LN111与LN411有哪些特点？ 这对于长期培养、药物筛选以及标准化肝细胞模型建立具有重要意义。四、LN411在原代肝细胞培养中的作用除了hPSC来源肝细胞之外，LN411在原代肝细胞培养中同样表现出较好的应用价值。 这说明LN411不仅有助于维持原代肝细胞成熟状态，同时也可能进一步改善细胞代谢功能与稳定性。 图6：LN411用于原代胎儿肝细胞培养时肝细胞相似指数评估及功能性相关因子ALB与CYP1A1的基因表达水平。
17110编辑于 2026-05-12 - 来自专栏细胞培养
人肝非实质细胞NPC如何突破传统肝细胞模型局限？Kupffer Cells、肝星状细胞与LSECs应用解析
关键词：人肝非实质细胞；肝NPC；KupfferCells；肝星状细胞；LSECs；肝病模型；药物ADME-Tox；NASH；肝纤维化；3D肝脏模型；原代肝细胞一、为什么传统单一肝细胞模型越来越难满足现代肝病研究需求 在肝病机制研究、药物肝毒性评价以及新药研发过程中，原代肝细胞长期以来一直是重要研究工具。然而，随着研究不断深入，研究人员逐渐发现，传统单一肝细胞模型存在明显局限。 图2：人库普弗细胞（KupfferCells）。四、肝星状细胞（HSCs）为何是肝纤维化研究的重要模型？ 与此同时，LSECs还能通过旁分泌HGF、VEGF等因子维持肝细胞分化状态，从而延缓原代肝细胞体外去分化过程。 本文内容基于人肝非实质细胞、人原代肝细胞、肝NPC、肝毒性等公开科研资料、应用文献等内容曼博生物整理，仅用于科研技术交流。
15010编辑于 2026-05-18 - 来自专栏药物代谢与原代肝细胞研究
库普弗细胞（Kupffer Cells）是什么？从DILI、NASH到肝纤维化的关键免疫调控机制解析
关键词：库普弗细胞、Kupffer Cells、药物性肝损伤、原代库普弗细胞、DILI、NASH机制、肝纤维化、肝脏免疫、肝脏巨噬细胞、肝病研究、原代人肝细胞 一、库普弗细胞为何受到广泛关注？ 当药物或其代谢产物形成免疫原性复合物后，库普弗细胞能够被激活并释放大量炎症因子，从而诱导肝细胞损伤和坏死。因此，仅使用单一肝细胞模型往往无法充分反映真实DILI发生过程。 图2：人原代库普弗细胞形态示意图。七、常见问题（FAQ）为什么原代库普弗细胞不能传代？库普弗细胞属于终末分化细胞，体外培养条件下几乎不具备增殖能力，因此无法像常规细胞系一样进行连续传代培养。 大量研究表明，许多药物性肝损伤属于免疫介导过程，仅使用肝细胞模型往往难以完整模拟疾病机制，而加入库普弗细胞后可提高模型生理相关性。原代库普弗细胞最长可以培养多久？ development, dynamics, and functionsCellular & Molecular Immunology, 2025.关于技术来源：本文基于LifeNet Health、人原代肝细胞
17220编辑于 2026-06-01 - 来自专栏细胞培养
CYP450酶诱导研究模型解析：全人源肝细胞TCS体系的应用表现
传统原代人肝细胞（PHH）虽广泛应用于CYP诱导评价，但在长期培养稳定性、部分CYP亚型表达维持等方面仍存在局限。 关键词全人源肝细胞；三培养体系；TCS；原代人肝细胞；PHH；CYP450；CYP酶诱导；CYP2C酶诱导检测；肝细胞诱导评估模型；药物代谢研究一、引言在药物研发阶段，新型化合物对主要细胞色素P450（ CYP）酶的体外诱导潜能评估是关键环节，传统方法多采用三明治培养的原代人肝细胞（PHH）。 2、评估CYP表达对原型诱导剂的反应将原代人肝细胞（PHH）和饲养细胞接种到96孔胶原包被板上，构建三培养体系（TCS）；培养至第10天，向孔中加入含不同浓度原型诱导剂（含0.1%二甲基亚砜）的培养基（ 参考说明本文基于CYP450酶、原代人肝细胞、全人源肝细胞TCS等公开研究资料、参考文献、应用文章曼博生物整理，仅用于科研技术交流与行业信息分享。
18110编辑于 2026-05-08 - 来自专栏药物代谢与原代肝细胞研究
肝星状细胞与肝窦内皮细胞研究进展：生物学特性、培养方法指南
关键词：肝星状细胞、肝窦内皮细胞、肝非实质细胞、HSCs、LSECs、LECs、原代肝细胞培养、肝纤维化模型、药物肝毒性、肝脏微环境、3D肝脏模型一、肝非实质细胞为什么是肝病研究中的关键对象？ 四、人原代肝星状细胞培养流程与关键控制点人原代肝星状细胞的体外培养需要重点关注细胞复苏、接种密度、贴壁均匀性、培养基更换、形态观察以及传代时机。 七、人原代肝窦内皮细胞培养流程与实验注意事项人原代肝窦内皮细胞培养同样需要严格控制复苏、接种、培养维护、消化传代和冻存流程。 九、FAQ：肝非实质细胞培养与研究常见问题Q1：原代HSCs和LSECs可以传代多少次？人原代HSCs在体外培养过程中会逐渐自发激活，因此通常不建议过多传代。 Gut, 2026.关于技术资料来源本文基于肝星状细胞（HSCs）、肝窦内皮细胞（LSECs）、肝非实质细胞（NPCs）、原代肝细胞培养、肝纤维化模型及药物肝毒性研究等公开文献与技术资料整理，仅用于科研信息分享与实验参考
15810编辑于 2026-06-10 - 来自专栏药物代谢与原代肝细胞研究
器官芯片应用方向：CN Bio肝芯片联合PBMC共培养如何重现免疫介导肝损伤？【SOT2026研究解读】
SOT2026期间展示的一项研究利用CN Bio PhysioMimix肝脏微生理系统，通过将原代人肝细胞与外周血单个核细胞整合到同一动态培养体系中，构建出更接近人体生理环境的免疫相关肝损伤研究模型。 PhysioMimix肝芯片与PBMC共培养实验设计研究中使用冷冻保存的原代人肝细胞（PHHs）以及外周血单个核细胞（PBMCs），按照预设比例构建共培养体系。 原代人肝细胞接种于PhysioMimix Liver-12板中，并在持续灌流条件下培养8天，以形成稳定的肝脏微组织结构。 图5：IL-2、IL-6和TNF-α表达变化这些结果进一步证明，肝芯片体系能够在细胞因子水平重现免疫介导肝损伤的关键机制过程，并区分不同药物之间的毒性差异。 肝芯片与PBMC共培养模型的研究价值研究表明，将HLA匹配的PBMC整合到原代人肝细胞微生理系统中，可以有效模拟免疫相关药物诱导肝损伤过程。
17000编辑于 2026-06-03 - 来自专栏药物代谢与原代肝细胞研究
PhysioMimix Liver-12肝脏MPS模型与传统2D培养体系对比研究
关键词：DILI、胆汁淤积、肝脏MPS、器官芯片、PhysioMimix、原代人肝细胞、药物安全性评价、NAMs一、为什么胆汁淤积性DILI长期难以准确预测？ 实验同时采用原代人肝细胞（PHH）、HepaRG细胞以及诱导多能干细胞来源肝细胞（iHeps）作为研究对象，通过胆汁酸代谢分析、转运体表达、核受体调控、线粒体损伤、细胞应激反应以及功能标志物检测等多个终点 图2：PhysioMimix微流控器官芯片系统三、PhysioMimix Liver-12系统有哪些特点？ 研究显示，在长达30天的培养周期内，PhysioMimix Liver-12系统中的原代人肝细胞和HepaRG细胞均表现出较高水平的白蛋白分泌、尿素生成以及CYP450酶活性，说明其能够更好地维持长期肝功能 更重要的是，在胆汁淤积诱导实验中，仅有PhysioMimix系统中的原代人肝细胞能够稳定检测到胆汁酸分泌变化，而这一指标正是胆汁淤积发生过程中最关键的机制特征之一。
9310编辑于 2026-05-29 - 来自专栏类器官/器官芯片/3D培养
CN Bio肝脏器官芯片研究显示：Thykamine在MASH模型中展现剂量依赖性抗纤维化与抗炎作用
传统二维肝细胞培养体系难以长期维持肝细胞功能，动物模型又存在明显的物种差异，因此越来越多研究开始关注基于人源细胞构建的微生理系统（MPS）与器官芯片（OOC）技术。 研究采用动态三细胞肝脏模型，包括：原代人肝细胞库普弗细胞肝星状细胞并在连续微流控条件下诱导形成MASH表型。 图2：Thykamine在MASH模型中展现剂量依赖性抗纤维化与抗炎作用。3、炎症因子水平下降除了纤维化外：炎症也是MASH的重要病理过程。 尤其是：肝细胞、Kupffer细胞与肝星状细胞之间的相互作用，对于MASH疾病进展至关重要。因此：人源肝脏MPS系统正在逐渐成为MASH研究的重要工具。 通常与：肥胖2型糖尿病血脂异常高血压等代谢综合征密切相关。随着疾病发展：NAFLD可进一步发展为MASH。
14810编辑于 2026-05-09 AbMole | Alirocumab助力揭秘HTR期间肝脏免疫调节新机制
在体外用这些细胞因子刺激原代小鼠的肝细胞，得出了TNF-α和IFN-γ能诱导PCSK9的mRNA表达（图2B）的结论。 B，从B6小鼠中分离出原代肝细胞，用PBS、TNF-α或IFN-γ培养24小时，并收集Pcsk9 mRNA，用qPCR测定进行分析（n=3）。 水平(图3A和3B)，并得到TNF-α和IFN-γ能通过SREBP2协同促进肝细胞中PCSK9的表达(图3C)的结论。 C，细胞因子（TNF-α和IFN-γ）和信号通路（P65和STAT1）通过转录因子SREBP2调节肝细胞中PCSK9表达。 图 6 用Alirocumab（200μg/小鼠，腹腔注射，每2天一次，从心脏移植当天开始）、人IgG1同种型对照或洛伐他汀（100μg/小鼠，每天腹腔注射，从心脏移植当天开始（n=5；log-rank
19310编辑于 2025-12-22- 来自专栏生信技能树
转录组讲师带你读文献(4)-转录组数据到底起多大作用呢？
Hepatocyte Functions In Vitro by Inhibiting Mechanical Tension-Induced YAP Activation 标题：通过抑制机械张力诱导的YAP激活维持体外原代肝细胞功能 2 数据和方法 数据：GSE138158 ，14个样本 测序平台：Illumina HiSeqTM 2500 质控：Trimmomatic 比对：hisat2 定量：htseq-count 差异表达：DESeq 基于以上数据，我们推测机械张力可能通过活化Yap而触发肝细胞去分化。 2 Yap介导的肝细胞去分化伴随着机械张力 在皮氏培养皿中培养的贴壁细胞，细胞拉力随着细胞的扩散而增大。 **为了测试机械张力的减轻是否能抑制肝细胞去分化，我们接下来将单个肝细胞在微图玻片上沉积以限制细胞的扩散。**这些载玻片是玻璃盖玻片，带有700-mm2的粘性圆盘微图案，印在疏细胞表面上。 单个肝细胞在基质涂层微图案结构上可作为圆形细胞存活3周。在700-mm2的椎间盘区域，F-actin染色呈点状，未观察到应力纤维。
98210发布于 2021-05-27 - 来自专栏类器官/器官芯片/3D培养
肝脏微生理系统在胆汁淤积性DILI预测中的应用分析
二、研究设计：不同模型的系统对比在一项针对肝脏模型的系统性研究中，对以下模型进行了对比评估：肝脏微生理系统（MPS）模型不同结构的器官芯片模型传统二维静态培养模型实验选用三类常见细胞来源：原代人肝细胞（ PHH）HepaRG细胞iPSC衍生肝细胞并围绕以下关键指标进行分析：胆汁酸代谢转运体表达（如BSEP、MRP2/3）核受体信号通路（如FXR、PXR）代谢功能（CYP活性）细胞功能指标（白蛋白、尿素） ：提供稳定的营养与氧气分布降低局部应激更接近体内肝脏微环境四、关键实验结果分析1长期功能维持能力在约30天培养周期内：白蛋白分泌保持稳定尿素生成持续CYP酶活性维持较高水平说明：动态培养体系有助于维持肝细胞功能 2胆汁酸相关响应能力在胆汁淤积诱导条件下：部分模型可检测到胆汁酸分泌变化这一指标与胆汁淤积机制密切相关说明：模型对关键毒性通路的响应能力存在差异3胆汁酸组成差异实验观察到：不同模型产生的胆汁酸类型存在差异部分模型更接近人体主导胆汁酸谱这一点会影响
6300编辑于 2026-03-25 - 来自专栏计算机视觉战队
智慧工地：2PCNet，昼夜无监督域自适应目标检测（附原代码）
我们提出了一种两阶段一致性无监督领域自适应网络2PCNet来解决这些问题。 为了解决这个问题，我们提出了2PCNet，一种用于夜间目标检测的两阶段一致性无监督域自适应网络。 我们的2PCNet将在第一阶段预测的高度自信的伪标签的边界框与学生的区域建议网络（RPN）提出的区域合并在一起。然后，教师在第二阶段使用合并后的提议来生成一组新的伪标签。 总体而言，使用2PCNet，我们可以在图1中看到我们的结果在质量上的改进。 03 新框架设计 我们的2PCNet的体系结构如下图所示。我们的2PCNet由一个学生和一个教师网络组成。 在2PCNet的第一阶段的每次迭代中，教师从夜间图像中产生伪标签。通过置信阈值对这些伪标签进行过滤。这是为了确保只给学生高置信度的伪标签。然后将来自伪标签的边界框与学生的RPN生成的区域建议相结合。
91210编辑于 2023-09-20 - 来自专栏生信菜鸟团
ChIP分析笔记|| PRJNA1037717 脂肪肝-肿瘤抑制基因Sirt6：文献阅读
基于这一标准，作者鉴定出五个基因（图2A、B和EV2B）。其中，Serpina12、Cyp2b10、Gal3st1和Orm3在进一步验证后被发现在肝脏组织中显著上调（图2C）。 体外实验验证：Serpina12和Cyp2B10在原代肝细胞中的表达显著增加（图2D）。 在这项研究中，作者挑选了变化最显著的基因，Serpina12，作为进一步分析的候选基因。 （TSS）附近与CEBPRE的结合位点有~90%的相似性共识序列 3）实验验证Sirt6通过CEBPα调节Serpina12的表达：原代肝细胞中敲除Sirt6，并共转染CEBPα和Serpina12启动子到这些细胞 图4A、C：通过感染原代肝细胞以腺病毒-Cre（adeno-Cre virus）敲除Sirt6，同时敲除或敲低Serpina12，并观察到胰岛素信号传导出现下降。 Sirt6缺乏引起的脂肪生成和脂肪肝形成的影响 这一段主要是为了理解Serpina12如何影响脂肪生成，做了各种实验，大致思路是这样： 体外实验：高浓度葡萄糖条件下，敲除Sirt6或敲低Serpina12的原代肝细胞
61210编辑于 2024-11-23 - 来自专栏生命科学
类器官——从 2D 到 3D 的进阶 | MedChemExpress
1) 与传统的体外培养不同，类器官在组成和结构上与原代组织 (Primary tissue) 相似：包含了少量基因组稳定、自我更新的干细胞，这些子代的细胞谱系与活组织的主要细胞谱系相似； 2) 类器官可以快速扩增 、异质性和稳定性，与传统的患者来源的癌细胞系 (PDC) 模型和人源肿瘤异种移植 (PDX) 模型相比，具有无可比拟的优势 (如图 3)。 各种组织的类器官的培养方法是类似的，可以简单得概括为： 1) 类器官可以从原代组织中产生，把原生组织被分解成含有干细胞的功能性亚组织单元，再进一步消化成单个细胞并进行流式细胞分选以富集干细胞。 HGF 可充当肝细胞的有丝分裂原，用于肝类器官培养。 Human Wnt3aWnt 参与调节细胞发育、增殖、分化、粘附、极性、细胞-细胞通信、生存和自我更新功能。 体外实验中，BMP-2 和 BMP-4 被广泛应用于诱导多能干细胞 (iPSC) 和胚胎干细胞 (ESC) 产生肝细胞。
1K20编辑于 2023-02-23 Cell | 当深度学习学会「开药方」：从化学结构直接预测转录组变化，再从头设计抗癌和抗纤维化新药
模型的数据来源是 LINCS Phase I 项目——一个包含 18,746 个化合物在 978 个标志基因（landmark genes）上的表达谱数据集，涵盖 HEPG2、MCF7、PC3、VCAP 肝细胞癌：从七百万化合物到亚微摩尔先导物 GPS 平台的第一个端到端应用案例是肝细胞癌。 初筛中脱颖而出的化合物 PB56874852 在 Huh7 肝癌细胞中表现出约 4 μM 的 IC₅₀，同时对原代肝细胞的毒性远低于对癌细胞的杀伤力——这种选择性在早期筛选阶段并不常见。 PB56874852 在 HCC 细胞系与原代肝细胞中的活性对比，显示该化合物对癌细胞具有选择性杀伤效果。 但 4 μM 的活性距离临床候选还有很大差距。 在人源精密切割肺切片（PCLS）实验中，pyrithyldione 的抗纤维化活性与临床一线药物尼达尼布相当。
29410编辑于 2026-03-31- 来自专栏机器人课程与技术
ROS2机器人案例学习linorobot2机器人模型
ROS2之G/F版本支持较多的机器人为turtlebot3和即将发布的turtlebot4： turtlebot4+树莓派4+ros2专属机器人 2022 ros@ros:~ sudo apt install (y or n) ros@ros:~ ---- 如果学习导航包，并且想自己从零起步搞定一款机器人，可以参考： linorobot2，如下引用 ---- 编译完成即可学习机器人模型/SLAM/导航等。 export LINOROBOT2_BASE=2wd ros2 launch linorobot2_description description.launch.py ros2 launch linorobot2 _viz robot_model.launch.py ---- export LINOROBOT2_BASE=mecanum ros2 launch linorobot2_description description.launch.py ros2 launch linorobot2_viz robot_model.launch.py ---- Gazebo： ros2 launch linorobot2_gazebo gazebo.launch.py
1K10编辑于 2022-05-10
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